以转录因子AP-1为靶点的decoy ODNs对大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的抑制作用

目的探讨AP-1decoy ODNs对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖及细胞胶原合成的抑制作用,为高血压心肌纤维化的防治提供理论依据。方法通过2.5%胰酶分离培养新生SD大鼠心脏成纤维细胞,采用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目,羟脯氨酸比色法测定培养细胞上清胶原合成,流式细胞分析技术(FCM)检测细胞周期,分别观察不同浓度的AP-1decoy ODNs对AngⅡ诱导的CFs增殖,胶原的合成及细胞周期的影响。结果CFsMTT比色法显示10-7mmol/LAngⅡOD490值明显高于空白对照组(0.451±0.014和0.342±0.096,n=9,P<0.05);100nmol/L和200nmol/L组的OD490值分别为0.329±0.04和0.214±0.25,均较AngⅡOD490值显著降低(P<0.05);AngⅡ作用24h后能够显著增加CFs胶原合成,decoy ODNs可以抑制这种作用,其中100nmol/L和200nmol/L均有显著性抑制作用。FCM细胞周期分析表明,AngⅡ作用24h后能够明显增加S期细胞百分率(21.93±0.71%和10.93±0.2%,n=6,P<0.01),随着decoy ODNs浓度增加,S期细胞百分率明显降低,其中100nmol/L和200nmol/L作用具有显著性意义(P<0.01)。但突变的decoy ODNs对CFs的增殖及胶原合成均没有明显的影响。结论AP-1decoy ODNs可以抑制AngⅡ诱导的CFs增殖和胶原的合成,其作用机制可能与影响CFs细胞周期有关。

兔上腔静脉肌袖细胞动作电位及L型钙电流特征

研究兔上腔静脉肌袖细胞(SVCM)动作电位和L型钙电流(ICa,L)特征及异丙肾上腺素(Iso)对其影响。通过全心灌流酶解方法来分离兔SVCM,利用全细胞膜片钳技术,记录10nmol/LIso干预前后SVCM及右房心肌细胞(RAM)的动作电位、钙电流。结果:与RAM比较,SVCM动作电位复极50%时间(APD50),复极90%时间(APD90)明显要长(175.11±8.21msvs77.78±7.74ms,354.39±16.40msvs173.69±11.44ms,P均<0.05),Iso明显延长两者动作电位时程。SVCMICa,L较RAM大(4.04±0.74pA/pFvs2.75±0.33pA/pF,P<0.05),Iso明显增加ICa,L峰值,SVCMICa,L变化较RAM明显(4.04±0.74pA/pFvs7.14±0.77pA/pF;2.75±0.33pA/pFvs4.72±0.86pA/pF,P<0.05)。结论:SVCM动作电位及钙离子通道与RAM存在差异,可能是触发或驱动局灶性心房颤动的基础,Iso在其中发挥重要的作用。

结合转录因子激活蛋白1的诱杀性寡聚脱氧核苷酸能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞胶原表达

目的探讨结合转录因子激活蛋白1的诱杀性寡聚脱氧核苷酸(AP-1 decoy ODNs)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型及Ⅲ型胶原的影响,为高血压心肌纤维化的防治提供理论依据。方法采片用羟脯氨酸比色法测定 SD 大鼠心肌成纤维细胞(CFs)上清胶原合成,分别观察不同浓度的 AP-1 decoy ODNs 对 AngⅡ诱导的 CFs 胶原的合成、Ⅰ型及Ⅲ型 mRNA 的影响。结果①10^(-7) mol/L AngⅡ刺激24 h 后能够显著增加CFs 胶原合成,decoy ODNs 在10～200 nmol/L范围内量-效相关地抑制 CFs 胶原合成,但突变的 decoy ODNs 对CFs 的增殖、胶原合成没有明显的影响。②10^(-7)mol/L Ang Ⅱ作用24 h 后能够显著使 CFs Ⅲ型(1.04±0.07比1.63±0.07,n=3,P<0.05)和Ⅰ型(1.09±0.09比0.20±0.10,n=3,P<0.05)基因表达上调,而100 nmol/L(Ⅰ型0.45±0.05和Ⅲ型0.84±0.04)、200 nmol/L(Ⅰ型0.22±0.06和Ⅲ型0.61±0.07)的 AP-1 decoy ODNs(P<0.05)能够抑制这种作用。突变的 AP-1 decoy ODNs 没有此作用。结论 AP-1 decoy ODNs 通过抑制 Ang Ⅱ诱导的 CFs Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达,从而抑制胶原的合成。

兔上腔静脉中的心肌细胞组织学结构

目的 :观察兔上腔静脉壁内心肌细胞组织学结构。方法 :选取健康的新西兰大白兔 10只 ,取上腔静脉和右心房 ,10 %福尔马林溶液固定 ,HE染色。另取健康的新西兰大白兔 10只 ,取上腔静脉和右心房 ,切成 1mm宽的小组织块置于 2 .5 %戊二醛固定液 ,染色后 ,透射电镜下观察。结果 :发现上腔静脉壁内有心肌细胞的延伸 ,壁内的心肌呈纵向、环行或斜行排列 ,电镜下可见壁内心肌细胞的存在 ,细胞之间可以见到明显细胞连接 ,心肌细胞内可见心房肽颗粒。结论 :兔上腔静脉壁内有心肌细胞存在 ,可能在心房收缩时起到阀门作用 ,是发生心律失常的结构基础 。

腔静脉和局灶性心房颤动的关系

近年来随着对心房颤动 (简称房颤 )的发生机制的深入理解 ,发现局灶驱动是其中重要机制之一 ,腔静脉内的病灶可以触发房颤 ,而腔静脉内的心肌 (即肌袖 )在其中发挥着重要的作用。综述腔静脉肌袖的解剖、电生理。

高频刺激左心房引起家兔慢性心房颤动

目的:探讨以高频率起搏刺激左心房建立家兔慢性心房颤动模型的方法。方法:20只家兔随机分为实验组及对照组,对照组为假手术组,植入起搏器但不起搏,实验组10只家兔予开胸植入高频率起搏器(1000次/分)刺激左心房30d,术后定期监测起搏、心房颤动的发生情况、房颤时心室率变化,同时测定起搏前及房颤发生后心房有效不应期(AERP)的变化。结果:实验组均完成了实验,术后第7d,7只(70%)兔发生了房颤,2周时共有8只(80%)发生了房颤并能稳定维持(与对照组比较,P<0·01),30d时仍示房颤,其余2只兔至30d时仍呈起搏心律,对照组则未发生任何心律失常情况。心房颤动时的心室率最初明显增快(P<0·05),随后有所降低(P<0·05),但仍高于基础心室率(P<0·05)。AERP缩短,AERP频率适应不良,与基础状态相比有显著意义。结论:长期高频率起搏刺激家兔左心房是建立慢性房颤模型的有效方法。

兔腔静脉肌袖细胞IK、Ito、IK1 电流特征

目的研究兔腔静脉肌袖细胞离子通道特性,与右房肌细胞比较.……

急性右心室心肌梗死的临床特点及预后分析

目的对急性下壁心肌梗死住院患者的临床资料进行分析,观察合并右心室梗死对病情和转归的影响,并探讨早期再灌注治疗对预后的作用。方法急性下壁心肌梗死患者304例,其中单纯下壁心肌梗死232例,合并右心室梗死72例,记录一般资料、并发症、实验室检查和治疗情况。结果右心室梗死组心源性休克、机械并发症、完全性房室传导阻滞、心室颤动、持续性室速和再梗死均明显增高。单纯下壁心肌梗死组病死率为8.6%,右心室梗死组病死率为34.7%。右心室梗死组进行再灌注治疗者病死率为27.8%,保守治疗者病死率为55.6%。结论右心室梗死作为急性心肌梗死的高危亚组,其严重并发症和病死率显著增加。通过早期再灌注治疗能显著降低右心室梗死的住院期病死率,改善预后。

OX-LDL对巨噬细胞Toll样受体和炎症反应的影响以及GW1929的干预作用

目的:研究ox-LDL对巨噬细胞TLR2、TLR4表达和TNF-α、L-10、IL-12、NO以及MDA生成的影响并观察GW1929的干预作用。方法:ox-LDL(50mg/L;100mg/L)、GW1929(20μmol/L)作用于小鼠腹腔巨噬细胞24h后,测定培养液上清中MDA(TBA法)和NO(硝酸盐还原酶法)以及TNF-α、IL-10和IL-12(ELISA法)的浓度。采用流式细胞技术观察ox-LDL(50mg/L)作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h、12h及24h后TLR2、TLR4的表达。结果:ox-LDL(50mg/L,100mg/L)组MDA、NO2-/NO3-、TNF-α以及IL-10的浓度均明显高于control与GW1929组;而ox-LDL(50mg/L,100mg/L)+GW1929组以上指标的浓度分别明显低于ox-LDL(50mg/L,100mg/L)组;各组培养液中均无检测到IL-12的生成。ox-LDL(6h、12h、24h)组以及ox-LDL+GW1929(6h、12h、24h)组TLR-2、TLR4的表达明显高于control与GW1929组。其中,ox-LDL+GW1929(6h、12h、24h)3组TLR-2的表达分别低于ox-LDL(6h、12h、24h)组;ox-LDL+GW1929(12h)组TLR-4的表达明显低于ox-LDL(12h)组。(P<0.05)。结论:ox-LDL上调了巨噬细胞TLR2及TLR4的表达,促进巨噬细胞活性氧、NO以及细胞因子TNFα、IL-10的生成,GW1929对抗了ox-LDL在以上过程中的作用。

心脏再同步治疗慢性心力衰竭随访疗效分析

目的探讨心脏再同步化治疗(CRT)对慢性充血性心力衰竭近远期治疗的效果。方法心力衰竭患者48例,男31例、女17例,年龄62.0±15.6(35～80)岁,其中扩张型心肌病28例,高血压性心脏病2例,缺血性心肌病l3例,Ⅲ度房室传导阻滞5例。心功能Ⅲ级(NYHA分级)34例、Ⅳ级14例。植入CRT系统(含CRTD),随访23.4±15.8个月。结果48例中有良好反应者32例,对治疗无明显反应者11例。死亡9例,其中2例猝死,4例死于心力衰竭恶化。结论CRT疗效肯定,定期随访和程控,将有助于减少无反应者。CRTD有助于降低猝死的发生。

缬沙坦对自发性高血压大鼠血管紧张素ⅡⅠ型受体密度及亲和力干预的研究

目的 研究缬沙坦对自发性高血压大鼠左室心肌血管紧张素ⅡⅠ型受体 (AT1)密度及亲和力的影响 ,探讨高血压左室肥厚的细胞分子机制及缬沙坦的干预机制。方法 (1) 12只 6周龄雄性自发性高血压大鼠 (SHR)分二组 :自发性高血压大鼠 (SHR) 6只为阳性对照组 ;缬沙坦干预组 (SHR V) 6只 :缬沙坦 2 0mg·kg-1·d-1;同源正常血压大鼠 (WKY) 6只为正常对照组。 (2 )用放射配基结合分析法测定左室心肌AT1受体密度及亲和力 ;用放免法测定血液及左室心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )浓度 ;测量血压、左室重量 /体重及左室厚度 /体重。结果 (1)AT1受体密度及亲和力的变化 :SHR组左室心肌AT1受体亲和力较WKY组增强 (P <0 0 5 ) ,但AT1受体密度降低 (P <0 0 1) ;SHR V组较SHR组AT1受体亲和力降低 (P <0 0 5 ) ,与WKY组无明显的差异 ,在SHR V组 ,AT1受体密度明显高于SHR组 (P <0 0 1)。 (2 )AngⅡ浓度的变化 :SHR组心肌AngⅡ水平较WKY组明显升高 (P <0 0 1) ,但血浆AngⅡ水平无明显差异 ;SHR V组心肌AngⅡ水平明显低于SHR组 (P <0 0 1) ,而血浆AngⅡ浓度较另二组明显升高 (P <0 0 1)。 (3)血压及左室结构的变化 :缬沙坦可显著降低SHR的血压、左室重量 /体重及左室厚度 /体重 (P <0 0 1)。结论 (1)左室心肌AT1受?

GW1929对小鼠腹腔巨噬细胞源泡沫细胞的形成及MMP-2、MMP-9分泌的影响

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂(GW1929)对小鼠腹腔巨噬细胞源泡沫细胞的形成及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)分泌的影响。方法:氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)(50μg/mL),过氧化酶体增殖物激活受体γ激动剂1929(GW1929)(20μmol/L)作用于小鼠腹腔巨噬细胞24 h后,油红O染色观察各组泡沫细胞的形成。并用ELISA法测定各组培养液上清中MMP-2、MMP-9的浓度。结果:对照组及GW1929组细胞几乎未被油红O染色,oxLDL组大量细胞胞质被油红O染成暗红色,而oxLDL+GW1929组细胞胞质染色明显浅于oxLDL组细胞。oxLDL组MMP-9的浓度明显高于对照组及GW1929组(P<0.05)。而oxLDL+GW1929组MMP-9的浓度明显低于oxLDL组(P<0.05)。而各组间MMP-2的浓度并没有差别(P>0.05)。结论:GW1929可能具有稳定粥样斑块的作用,其机制可能与其抑制泡沫细胞的形成及MMP-9的生成有关。

急性心肌梗死患者血清IL-18升高参与斑块破裂的机制

目的观察急性心肌梗死患者血清白细胞介素18(IL-18)的水平,探讨其导致动脉粥样斑块破裂的可能机制。方法采用ELISA分别检测急性心肌梗死组(n=20)、稳定型心绞痛组(n=20)和正常对照组(n=20)中血清IL-18和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,用流式细胞术检测各组外周血单核细胞表面细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达;在体外,分别通过实时定量聚合酶链反应和蛋白印迹法检测IL-18对人外周血单核细胞EMMPRIN mRNA和蛋白表达的影响。结果急性心肌梗死组血清IL-18、MMP-9水平和外周血单核细胞表达的EMMPRIN均明显高于稳定型心绞痛组和正常对照组,且急性心肌梗死组患者血清IL-18水平与外周血单核细胞表达的EMMPRIN呈正相关(r2=0.57,P<0.001)。在体外,IL-18能刺激外周血单核细胞EMMPRIN表达上调(P<0.05)。结论 IL-18能够上调单核细胞EMMPRIN的表达,可能通过这一机制刺激MMP-9分泌,降低动脉粥样硬化斑块的稳定性,引起斑块破裂。

糖尿病酮症患者糖化血红蛋白水平与心血管事件的关系探讨

目的:探讨糖尿病酮症患者糖化血红蛋白(HbA1c)水平与心血管疾病的关系。方法:根据HbA1c水平将124例糖尿病酮症患者分成两组,回顾性分析两组间3年内不良心血管事件的风险及死亡率。结果:76例患者的HbA1c>7%,追踪3年后,HbA1c水平与糖尿病酮症患者死亡率及不良心血管事件发生率有关。结论:糖尿病酮症患者的HbA1c水平升高预示未来心血管事件发生率及死亡率升高。

兔腔静脉肌袖细胞动作电位及钙电流特征

目的研究兔腔静脉肌袖细胞离子通道特性,与右房肌细胞比较.……

优化骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的:探讨全骨髓贴壁培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的优化方法。方法:全骨髓贴壁法分离、体外培养原代大鼠骨髓MSC,种植后3 h首次换液,培养前72 h内频繁换液;通过流式细胞学方法检测原代培养细胞的MSC特征性表面标记的表达及比例;通过体外培养诱导成脂、成骨、成软骨分化,确立原代培养骨髓MSC的多向分化潜能。结果:早期、频繁换液的方法分离培养大鼠骨髓MSC,P0 MSC以单克隆生长,呈典型漩涡状排列,细胞形态均一;P1细胞均一表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45;原代培养骨髓MSC具有成脂、成骨、成软骨分化潜能。结论:全骨髓贴壁法分离培养大鼠原代骨髓MSC,早期、频繁换液有助于在早期获得高纯度细胞,原代细胞具有多向分化潜能。早期、频繁换液的全骨髓贴壁法是体外分离培养骨髓MSC的优化方法。

脉冲消融在心房颤动治疗中的研究进展

脉冲电场是近年来新兴的心脏导管消融能量源。相较射频和冷冻消融而言,脉冲电场消融具有快速且特异性损伤心肌的优势。脉冲消融应用前景广阔,将可能成为治疗心房颤动的一大利器。本文将综合近年国内外研究资料,介绍脉冲消融的基本原理、以及其在心脏消融治疗中的应用进展、优势和局限性。

兔上下腔静脉中的心肌细胞组织结构研究

目的 观察兔上腔静脉和下腔静脉的心肌细胞组织结构 ,探讨其在生理状态和心律失常中的作用。方法 选取健康的新西兰大白兔 15只 ,取出心脏 ,福尔马林溶液固定。取上腔静脉、下腔静脉 ,石蜡包埋 ,分别作纵向和横向连续切片 ,HE染色。结果 发现腔静脉壁内有心肌细胞的延伸 ,其内穿插有平滑肌细胞。心肌分布在前壁较侧壁、后壁厚 ,上腔静脉壁内心肌比下腔静脉延伸长且数目多。心肌在上腔静脉壁内呈纵行、环行或斜行排列 ,在下腔静脉壁内呈环行或斜行排列 ,这些心肌与心房肌形态相似。结论 兔上腔静脉和下腔静脉壁内有心肌细胞存在 ,在心房收缩时可能起到“阀门”作用 ,是发生心律失常的结构基础 ,上腔静脉和下腔静脉壁内心肌排列不同可能使两者之间存在电生理差异。