基于直接TaqMan-PCR的无创检测脂质代谢相关SNP基因分型技术

目的建立一种基于直接TaqMan-PCR的无创多重单核苷酸多态性分型技术用于高通量检测与脂质代谢相关的rs688和rs964184位点,以满足风险人群快速筛查的需求。方法采用提取的DNA对设计的TaqMan探针进行PCR退火延伸温度和扩增程序的优化;将口腔拭子放入样品处理液后进行短暂震荡和离心,取少量上清进行直接qPCR扩增分析;探索探针冻融稳定性和样品保存时间对分型结果的影响。结果本方法仅需对口腔拭子样本简单处理后即可进行qPCR分析,并且可在室温情况下保存4 d。优化后的方法能够较好地区分rs688和rs964184位点的野生纯合子、突变纯合子及杂合子。结论建立了一种快速便捷、高通量、低成本的SNP分型新技术,为大规模筛查携带易感基因的风险人群提供了高效且准确的新方法。

中老边境地区江城县登革热媒介及病毒感染调查

目的了解中老边境江城县登革热媒介的种群密度、孳生习性以及登革病毒自然感染情况,为边境登革热的防控提供参考。方法 2015年6-10月在中老边境江城县选择3个自然村作为固定监测点,采用人诱捕法诱捕白天成蚊,同时在监测点居民区进行幼虫密度和孳生习性调查。捕获的成蚊用液氮低温保存带回实验室用RT-PCR进行登革病毒检测。结果白天人诱法共捕获7属20种2 247只成蚊,其中白纹伊蚊1 405只,占捕获总数的62.53%,其次为骚扰阿蚊438只,占捕获总数的19.49%,未捕到埃及伊蚊,白纹伊蚊成蚊平均密度为16.7只/人工小时;白纹伊蚊幼虫的平均房屋指数、布雷图指数、容器指数和千人指数分别为12.0、18.3、2.2和25.4。8、9月是白纹伊蚊孳生和活动的高峰;白蚊伊纹幼虫以轮胎、罐子和竹筒为主要孳生容器,3种容器占总阳性容器数比例分别为26.3%、23.4%和20.4%;人诱法捕获成蚊RT-PCR检测37组蚊虫,黄病毒属阳性17组,批阳性率为46.0%,未检出登革病毒。结论中老边境江城县登革热传播媒介白纹伊蚊密度较高且分布广,蚊虫携带黄病毒属病毒比例高,应加强当地登革热监测工作。

一次性塑料杯中邻苯二甲酸酯向饮用水中的迁移研究

本文模拟人们喝水习惯,将沸腾的饮用水倒入一次性塑料杯中,自然冷却后采用正己烷萃取,气相色谱-质谱法测定浸出液中16种邻苯二甲酸酯(PAEs)含量。结果表明:在方法检出限0.02-0.05mg/L下,20种不同品牌的塑料杯浸出液全部检出PAEs,总量为0.102-0.288mg/L,检出率100%,检出含量最高的是DIBP,但检出量均为超过《食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准》(GB 9685-2008)中规定的1.5mg/kg,总体看来,16种PAEs的迁移存在差异,分子质量大的PAEs迁移率低于分子质量小的PAEs。

miRNA-21调控HER-2阳性乳腺癌的血管生成

目的探讨mi RNA-21 (mi R-21)对HER-2阳性乳腺癌生物学特性以及血管生成的影响。方法收集HER-2阳性乳腺癌标本,通过PCR分析mi R-21的表达,通过CCK8和Transwell实验验证增殖和侵袭能力,通过Western blotting实验验证VEGF表达变化。结果 mi R-21在HER-2阳性乳腺癌中过表达(P<0.001),但其过表达不会影响预后(在所有乳腺癌患者中P=0.47,在HER-2阳性乳腺癌患者中P=0.26)。抑制mi R-21表达可抑制HER-2阳性乳腺癌的增殖(P<0.01)和侵袭(P<0.001),并且抑制mi R-21的表达可抑制血管生成因子VEGF的表达。结论癌基因mi R-21在调控HER-2阳性乳腺癌生物学行为以及血管生成中发挥一定作用。

云南省西南边境地区蚊虫及蚊媒病原体调查

目的了解云南省西南边境地区蚊媒分布及相关蚊媒传染病的存在及流行情况,为该病的预防控制提供科学依据。方法 2013-2015年在云南省孟连傣族拉祜族佤族自治县、勐海和江城哈尼族彝族自治县采用诱蚊灯法和人工诱捕法进行蚊虫采集,采用试剂盒提取蚊虫DNA及RNA,通过反转录-聚合酶链式反应和核苷酸序列测定方法获得病原体基因序列,采用Clustal X1.83、DNASTAR 7.1和MEGA 5.0等生物学软件进行核苷酸序列分析及系统进化分析。结果共捕获成蚊10属39种126 893只,其中捕获三带喙库蚊104 476只、中华按蚊18 422只、白纹伊蚊1 212只、致倦库蚊891只,分别占82.33%、14.52%、1.00%和0.70%。分离出2株流行性乙型脑炎病毒(JEV),均来自三带喙库蚊,未检出疟原虫、丝虫及其他黄病毒。结论云南省边境地区蚊媒传染病媒介种类较多,三带喙库蚊和中华按蚊为优势蚊种,自然界中存在着JEV,应加强重要蚊媒监测工作。

云南省西双版纳州景洪市居民登革热认知现状初步研究

目的了解云南省西双版纳傣族自治州(西双版纳州)景洪市居民对登革热认知现状,为登革热精准应对机制建立和可持续控制提供科学依据。方法2019年在景洪市登革热防控网格中随机选取代表性网格,对网格中居民采用一对一问答方式开展问卷调查。利用SPSS 20.0软件进行统计分析。结果共收回有效问卷249份。χ2分析显示,城市居民较农村居民更为关注登革热相关知识(χ^2=12.444,P=0.040);教育系统工作人员、较高学历者更为关注蚊虫防制相关知识。如不慎感染登革热后,不同职业、不同月平均收入水平及不同文化程度的居民选择的就医方式不同,高学历者、高收入者和教育系统人员更倾向于去三甲医院就诊。城市居民认为自身周围登革热感染者多于农村居民;高学历者认为自身掌握登革热防控知识足够者多于学历较低者。二分类非条件logistic回归分析显示,不同年龄、不同学历和现居地的居民使用新媒体获取登革热防控知识水平方面存在差异。结论西双版纳州景洪市高年龄组人群、农村居民、低学历者、低收入者的登革热认知水平相对较低。建议今后当地登革热精准应对机制的建立和登革热科学防控应重点关注上述人群。

维生素C对纳米二氧化钛致突变的保护作用研究

目的观察维生素C对50nm TiO2致小鼠体细胞和生殖细胞突变的保护作用。方法将体质量为20-26g（精子畸形实验小鼠为15～18g）的健康小鼠150只随机分为5组，分别为阴性对照组（生理盐水）、50nm TiO2组（剂量为2g／kg）和高、中、低3个维生素C＋50nm TiO2组（维生素c剂量分别为100、200、400mg／kg，50nm TiO2剂量为2g／kg），连续灌胃染毒5d，1次／d，于末次染毒后24h观察小鼠骨髓细胞染色体畸变率、外周血微核率、骨髓细胞微核率、睾丸染色体畸变率，末次染毒后第36天观察精子畸形率。结果高、中维生素C＋50nm TiO2组外周血微核率明显低于50nm TiO2组（P〈0．05）。各不同剂量维生索C＋50nm TiO2组骨髓微核、骨髓染色体畸变、睾丸染色体畸变以及精子畸形率均明显低于50nm TiO2组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论维生素C对50nm TiO2致小鼠体细胞的和生殖细胞突变具有一定的保护作用。

中缅部分边境地区登革热流行情况调查

目的了解中缅边境地区云南省盈江那邦镇和缅甸拉咱市登革热流行状况,为边境地区登革热防控提供科学依据。方法 2017年9-10月,在中缅边境地区中国云南盈江那邦镇和缅甸拉咱市各选3个调查点,采用背负式电动捕蚊器采集成蚊并用形态学方法鉴定蚊虫种类,捕获的蚊虫标本通过接种C6/36细胞分离病毒;采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测健康人群血清登革病毒IgG抗体;采用NS1抗原检测试剂检测疑似DF病例血清标本,阳性标本采用RT-PCR方法检测鉴定登革病毒血清型。结果共捕获6属14种703只蚊虫,其中登革热媒介埃及伊蚊为当地优势蚊种(57.75%,406/703),未发现埃及伊蚊携带登革病毒。采集的256份健康人血清中DENV IgG抗体阳性13份(5.08%,13/256),其中盈江那邦DENV IgG阳性率4.17%(4/96),缅甸拉咱5.63%(9/160),差异无统计学意义(χ^(2) =0.265,P>0.05);488份疑似登革热病人血清DENV阳性166份(34.02%,166/488),其中盈江那邦阳性83份(32.0%,83/259),缅甸拉咱阳性83份(36.24%,83/229)。从10份阳性标本中分离出5株DENV病毒,其中4株DENV-1(盈江那邦3株,缅甸拉咱1株),1株DENV-3(盈江那邦)。结论中缅边境地区盈江那邦镇和缅甸拉咱市登革热媒介埃及伊蚊分布广,DENV血清型主要以DENV-1为主,应加强中缅边境地区登革热疑似病例和媒介的监测。

澜沧江-湄公河流域登革热临床特征分析

目的探讨澜沧江-湄公河流域登革热的临床特征,为当地登革热患者的临床诊断和救治提供参考。方法收集2019年西双版纳传染病医院住院的登革热患者650例的个案及其临床资料,采用实时荧光定量PCR法检测登革病毒(Dengue virus,DENV)RNA,确定DENV血清型;采用SPSS 25.0软件分析不同DENV血清型患者临床特征。结果650例登革热患者中,共检测出DENV-1、DENV-2、DENV-33种DENV血清型481例,其中279例DENV-1(58.0%),107例DENV-2(22.2%),95例DENV-3(19.8%);重症4例,占病例总数的0.8%(3例DENV-1、1例DENV-3),二次DENV感染者4例(1例DENV-1,2例DENV-2,1例DENV-3);以18~65岁为主要感染人群,发病高峰集中在8~10月;DENV患者临床特征主要表现为发热、头痛、乏力、肌肉酸痛,白细胞、血小板减少,ALT/AST升高等,其中DENV-1型感染临床特征主要为腹泻、肌肉酸痛、乏力、头痛、眼结膜充血、皮肤潮红,白细胞、血小板圧积、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞绝对值、总蛋白降低较明显;DENV-2型感染以血红蛋白、CRP升高,胆囊壁毛糙增厚发生率较明显;DENV-3型感染尿酸碱值、甘油三酯升高发生率较明显。结论2019年西双版纳传染病医院收治的登革热患者主要为成年人,且以DENV-1型为主,不同血清型临床症状有所差异,可供诊疗时参考。

云南地区老挝籍留学生重要传染性疾病调查

目的调查云南地区老挝籍留学生传染病感染状况,为当地传染性疾病的防控措施提供依据。方法采集受检者血液采用ELISA法检测血清中的乙肝表面抗原(HBsAg)、丙肝(HCV)抗体和梅毒(TP)抗体和HIV抗体水平;采用免疫层析法检测登革热非结构蛋白1抗原(DENV-NS1)。结果共检测504例,其中HIV抗体阳性4例、TP抗体阳性1例、HBsAg阳性48例,阳性率分别为0.79%、0.19%和9.52%,HCV和DENV抗原均阴性。阳性者中,HBsAg和TP合并感染1例,HBsAg和HIV合并感染2例,HBsAg、抗-TP同时合并抗-HIV感染(抗-HIV/HBsAg/抗-TP)1例。感染者主要来自老挝的万象省、南塔省、琅勃拉邦省和波乔省,分别占27.08%、18.75%、14.58%和12.50%。结论云南省中老边境地区老挝籍留学生HBV、HIV感染率较高,建议加强对外籍人员HBV、HIV和TP等重要传染病的监测。