慢性病贫血骨髓细胞学及病理学改变的观察研究

目的研究慢性病贫血（ACD）和缺铁性贫血（IDA）骨髓涂片及骨髓活检的特点及临床意义。方法患者行两步法骨髓穿刺术，获取骨髓涂片和骨髓活组织标本。骨髓涂片常规做瑞氏染色和铁染色，骨髓活检切片做苏木精-姬姆萨-酸性品红（HGF）染色和Gomori网状纤维染色。结果骨髓涂片中：ACD骨髓增生程度高于IDA，ACD患者的粒红比高于IDA患者，ACD患者的铁染色中外铁增高，多为2＋～3＋。骨髓活检中：ACD患者中约有1／3的患者可见到反应性浆细胞增多，有将近一半的ACD患者可见到网状纤维染色增高。结论骨髓活检塑料包埋切片在ACD诊断及鉴别诊断中有重要的参考意义，骨髓涂片和骨髓活检切片的联合应用可以提高ACD实验诊断的准确率。

高渗法制备过程中红细胞及其吗啡载体的形态学

目的 了解高渗法制备吗啡红细胞载体过程中红细胞形态及体积的变化规律,为阐明红细胞药物载体的载药机制提供依据。方法 采用自动化血细胞分析仪及倒置显微镜、扫描电子显微镜等技术,对正常红细胞、脱水红细胞及载药红细胞的体积、体积分布宽度、直径、厚度、外观等指标进行观测,比较载体形成前后红细胞的形态学变化。结果 经高渗脱水的红细胞的体积较正常的缩小18.7％,载药红细胞的体积分别较正常及脱水红细胞增大20.4％和49.8％;载药红细胞趋球形状态,脱水红细胞则趋扁平状态;有一定量的脱水红细胞呈空泡状态;部分脱水红细胞表面皱缩,当其形成载药红细胞时,皱缩现象基本消失。结论 利用红细胞在高渗液中脱水在低渗药液中膨胀的原理,制备红细胞药物载体。

急性白血病骨髓组织中低氧诱导因子-1α表达与血管生成关系的研究

目的:了解低氧诱导因子(H IF)-1α在急性白血病骨髓组织中的表达水平,探讨其与骨髓内血管生成的关系。方法:应用改良的乙二醇甲基丙烯酸酯(GMA)塑料包埋法进行骨髓活检组织制片,采用EnV ison免疫组化二步法检测对照10例和20例初诊急性白血病骨髓组织中H IF-1α表达水平及微血管密度(MVD)。结果:20例急性白血病骨髓组织中H IF-1α蛋白低、中等、较高和高水平表达分别为1、5、6和8例;对照组10例中等、较高水平表达分别为7和3例,两组差异显著(P<0.05)。初诊急性白血病骨髓内MVD在40倍镜下为8.50±3.92,较对照组(4.71±1.53)明显增高(P<0.05)。急性白血病骨髓组织中H IF-1α蛋白表达水平与MVD具有相关性(r=0.578,P<0.05)。结论:H IF-1α在急性白血病骨髓组织中表达水平明显升高,可能对骨髓内异常新生血管生成起一定的调节作用。

病态造血在骨髓增生异常综合征诊断中的意义

目的研究骨髓病态造血在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中的意义。方法回顾性分析本院2008年1月至2015年2月采集的160例原发性MDS标本,另选取28例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),104例特发性血小板减少性紫癜(ITP),53例非重症再生障碍性贫血(NSAA),40例巨幼细胞性贫血及50例感染和自身免疫性疾病作为对照组,进行外周血和骨髓形态学检查。结果在MDS、巨幼细胞贫血和PNH三者之间,各种细胞病态造血的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。但是,在NSAA和MDS之间的三系细胞的质和量的变化有明显的不同。ITP和MDS在骨髓髓系和红系形态改变上差异有统计学意义(P<0.05)。在感染、自身免疫性疾病和MDS之间差异也有统计学意义(P<0.05),主要表现在红细胞和巨核细胞的多种改变。与骨髓增生异常综合征密切相关的异常形态包括多核红细胞、环状铁粒幼、异形红细胞病、巨大红细胞、假Pelger中性粒细胞、环形核和小巨核细胞。结论通过细胞形态学手段来区分巨幼细胞性贫血、PNH和MDS是很困难的,特殊的病态造血在MDS中有特异性诊断价值。

应用荧光原位杂交技术动态观察急性早幼粒细胞白血病患者PML-RARα融合基因的变化

目的:探讨荧光原位杂交(FISH)技术在急性早幼粒细胞白血病(APL)诊断及疗效判断中的作用。方法:对初发的急性白血病患者行常规形态学、细胞化学染色,并采用FISH技术检测PMLRARα融合基因,流式细胞术分析白血病细胞的免疫表型,对治疗过程中患者PMLRARα融合基因阳性细胞比例进行动态观察。结果:FISH对标准的PML-RARα融合基因的检出与形态学和临床符合率为100%,对流式细胞学免疫表型不符合的APL诊断的1例作出了明确诊断,对累及17号染色体的附加染色体异常也有一定的提示作用,对APL治疗过程中分子生物学缓解的判断非常直观。结论:FISH技术检测PMLRARα融合基因,实验方法简便、快速、直观和准确,具备了用以确定白血病类型,指导临床治疗和进行治疗后的疗效监测的作用。

白血病患者血清及骨髓PCⅢ、Ⅳ·C、LN和HA含量变化的研究

目的 检测骨髓增生异常综合征 (MDS)、急性白血病 (AL)和慢性髓性白血病 (CML)患者血清Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、Ⅳ型胶原 (Ⅳ·C)、层粘连蛋白 (LN)和透明质酸 (HA)的水平 ,探讨血清基质成分改变的临床意义。方法 放免法测定 2 6例健康者 ,11例MDS ,2 6例CML ,33例AL患者的PCⅢ、Ⅳ·C、LN和HA水平 ,其中 12例白血病检测骨髓和外周血上述指标 ,并进行临床分析。结果 与健康者相比 ,MDS者血清Ⅳ·C、HA、LN水平明显增高 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,PCⅢ水平无差异 (P >0 0 5 ) ;AL者初诊时四项指标升高 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ;CML明显增高 (P均 <0 0 1) ,但慢性期与急变期无差异 (P >0 0 5 )。 12例白血病患者骨髓HA水平高于外周血 (P <0 0 5 ) ,PCⅢ、Ⅳ·C、LN的水平无差异 (P >0 0 5 )。AL化疗获CR后血清HA水平较初诊时下降 (P <0 0 5 ) ,PCⅢ、Ⅳ·C、LN水平无变化 (P >0 0 5 ) ;复发时血清HA水平比CR时上升 (P <0 0 1)并达初诊时水平 (P >0 0 5 )。结论 MDS、AL、CML患者均存在细胞外基质成分的异常 ,动态血清HA水平观测可一定程度反映AL化疗疗效 ,但无助于慢粒急变的预测。

真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者骨髓病理特点及JAK2突变

目的:探讨真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(IMF)患者的骨髓病理特点并且检测JAK2V617F突变的发生率,分析骨髓中纤维增生程度以及JAK2V617F突变对PV、ET患者白细胞数的影响。方法:69例初诊患者的骨髓切片经HGF染色以及Gomori染色后进行形态学研究,并利用real-timePCR法测38例患者的骨髓或者外周血的JAK2V617F突变;分析骨髓切片中纤维组织增生程度以及JAK2突变对患者白细胞数的影响。结果:15例PV和15例ET患者的骨髓切片中可以观察到不同程度的纤维组织增生,所有PV、ET、IMF患者骨髓中可见到巨核细胞增多、巨核细胞多形性改变以及巨核细胞定位于骨小梁旁;12例PV、4例ET、4例IMF中检测到JAK2V617F突变;有突变和无突变患者发病时白细胞数均值分别为20.4×109/L和11.4×109/L,不同纤维增生程度的PV、ET患者的白细胞数均值差异无显著性(P=0.367)。结论:69例PV、ET、IMF患者骨髓切片中均有巨核细胞的形态以及定位变化,PV、ET、IMF患者中JAK2V617F突变的发生率分别为80%、27%、50%;有突变患者的白细胞数均值高于无突变患者,初诊的PV、ET患者骨髓中不同纤维增生程度患者的白细胞均值无明显差异。

骨髓活检在骨髓转移癌病理诊断中的价值

目的:探讨骨髓活检对转移癌的诊断价值。方法:应用塑料包埋骨髓活检制片技术对43例诊断为转移性癌的病例进行观察,同步对比骨髓涂片。结果:活检中骨髓的增生程度明显高于涂片;涂片中23例增生减低,20例增生活跃。活检中3例增生减低,40例增生活跃。涂片中16例可见癌细胞,骨髓活检中29例可见癌巢。结论:骨髓活检结合涂片对转移癌有互补诊断价值。

成人急性白血病自然缓解1例报道并文献复习

目的:探讨成人急性白血病自然缓解的特点及其可能原因。方法:对1例成人急性混合细胞白血病的临床资料、细胞形态学、流式细胞仪免疫分型结果进行分析,并结合文献进行复习。结果:16例成人急性白血病自然缓解病例中急性淋巴细胞白血病2例,急性非淋巴细胞白血病12例,急性混合细胞白血病占1例。大多有输血和抗感染史。结论:成人白血病自然缓解病例鲜见报道,推测输血和抗感染能通过激活白血病特异的T细胞反应可能与自发缓解有关。

蛋白磷酸酶2A在三氧化二砷诱导NB4、MR2细胞株凋亡过程中的变化

本研究探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性与表达的变化。不同浓度ATO单用或与冈田酸(OKA)联合作用于NB4、MR2细胞,然后采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响,用瑞氏染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术测定细胞凋亡率,丝/苏氨酸磷酸化酶检测试剂盒分析药物对细胞内PP2A活性的影响,Western blot检测细胞内PP2A各亚基表达。结果表明:蛋白磷酸酶抑制剂OKA能明显增强ATO对NB4、MR2细胞的增殖抑制;OKA能促进ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡;ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中PP2A活性均下降,且随ATO浓度的增加PP2A活性下降越明显;与OKA连用后PP2A活性下降更加明显;在ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中,PP2A/A表达较对照组均明显减少,而B和C亚基表达与对照组比较变化不明显。结论:在ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡过程中,细胞内PP2A/A表达减少,PP2A活性降低,且随ATO浓度增加PP2A活性下降越明显,抑制PP2A活性有助于ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡。

血液病远程多媒体医疗系统的体系结构

根据血液病诊断的特点 ,以模式识别理论为基础建立核心专家系统 ,并且利用现有的多种通信网络平台及网络数据库技术建立方便迅速的血液病远程多媒体医疗系统 ,实现诊断过程的自动化。

121例淋巴增殖性疾病的流式细胞学免疫表型分析

背景与目的多参数流式细胞免疫表型分析可提供有力的技术支持,以提高淋巴增殖性疾病诊断的准确率。我们采用流式细胞仪对121例临床怀疑淋巴瘤患者的135份淋巴结、血液、骨髓和脑脊液标本的免疫表型进行分析,观察其在提高诊断准确率和诊断效率方面的作用。方法所有标本均进行常规形态学、病理学和免疫组化检测,行WHO标准分型;同时对采集的标本制备单个细胞悬液,行多参数流式细胞学检测。比较常规检测和加用流式细胞学免疫表型分析对检测结果的影响。结果①淋巴结常规病理中3例误诊或按照WHO标准无法分型的病例,经流式检测诊断明确。②97例外周血和骨髓标本,FAB分类诊断明确的88例,均按照新的WHO分类标准重新分型;FAB分类中诊断未明的有9例,经流式细胞仪进一步分析,仅有一例按照WHO标准仍未能明确诊断。③脑脊液标本多参数免疫标志,有助于中枢神经系统白血病/淋巴瘤的诊断。结论流式细胞仪免疫表型检测可用于淋巴增殖性疾病的诊断和鉴别诊断,以及微小残留病灶的检测,提高了诊断的准确率。

末稍血白细胞碱件磷酸酶定量测定法

本文报道用皂素溶血后,通过离心进行白细胞分离,并以β-萘酚磷酸钠为底物,固兰盐B 为显色剂进行白细胞ALP 测定。吸光度在0.9以下与酶活性有良好的线性,此范围是健康者平均吸光度的十倍。批内平均OCV 为6.9%。51例健康者(男23例,女28例)白细胞ALP 活力:(?)=25.27,SD=10.07。中性白细胞ALP 活力:(?)=35.95,SD=13.76。

少见或特殊类型慢性淋巴细胞增生性疾病的临床研究

目的提高对少见或特殊类型慢性淋巴细胞增生性疾病(CLPDs)的认识,探讨流式细胞术免疫表型在该类疾病鉴别诊断中的价值。方法对4例CLPDs患者进行细胞形态学、免疫表型和临床资料的系统回顾分析,结合文献进行讨论及鉴别。结果4例均见淋巴单克隆生长证据(3例IgH基因重排阳性,1例TCRr基因重排阳性);年轻人慢性淋巴细胞白血病1例,形态为典型小淋巴细胞增多,表型为CD5+CD7-CD19+CD20+CD22+D23+CD11c+HLA-DR+;食道癌合并毛细胞白血病1例,细胞表面不规整,有短绒毛,表型为CD5-CD11c+CD19+CD20+CD22+CD25+;大颗粒淋巴细胞白血病1例,淋巴细胞胞浆中多量嗜天青颗粒,表型为CD3+CD4-CD5+CD8+(CD16+56)-HLA-DR+;脾淋巴瘤伴血循绒毛淋巴细胞1例,淋巴细胞有绒毛,位于细胞一端或双端,表型为CD5-CD19+CD20+CD22+CD25-HLA-DR+。电镜下脾淋巴瘤伴血循绒毛淋巴细胞及毛细胞白血病均见细胞表面有绒毛,但前者绒毛数量偏少。结论CLPDs的诊断需要对形态学、免疫表型和临床信息加以综合考虑,流式细胞术免疫表型分析对疑难CLPDs的鉴别诊断具有重要价值。