Bt乳剂生态效益的初步研究

室内、田间试验表明,菜地用Bt乳剂防治菜青虫、小菜蛾、爪蛸螟等食叶害虫,天敌数量比化防区增长13.2倍;棉田用Bt乳剂防治二代棉铃虫,药后10天的天敌数量比敌杀死施药区增长11.3—16倍,保持下来的天敌有瓢虫、草蛉等,对蚜虫有控制作用,蚜害减轻,省去治蚜用药,呈现了良好的生态效益。

苏云金杆菌GC-91发酵上清液的增效作用

利用生物测定，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方法对苏云金杆菌ＧＣ－９１发酵液的上清液进行了研究。研究表明，上清液中含有增效物质，离心丢弃上清液是导致毒力收率大幅度下降的根本原因。上清液对粉剂增效明显，本实验中最高增效倍数为２３．５倍，且上清液对不同菌种粉剂增效力不同，对ＧＣ－９１菌粉增效极为显著，对ＨＤ－１菌粉增效较为缓慢。上清液中含有的增效物质是一种热稳定物质，能耐１５分钟沸水浴，在ｐＨ２～１０范围内稳定。

苏云金杆菌高效培养基优选模型的研究

本研究设计一套“正交试验－浓度加倍－生物测定”新的培养基配方优选模型，获得了理想的高效培养基配方。采用７９００７号菌株和５号配方，用７吨发酵罐进行试验，平均发酵效价达２８８７×１０３ＩＵ／ｍｌ。实验结果表明，该方法是苏云金杆菌发酵培养基配方优选中十分简单、实用。

苏芸金杆菌代谢特性研究

采用12L玻璃发酵罐,测定了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis, B. t)发酵过程中的菌体浓度、总糖、还原糖、氨基氮、溶磷、溶氧、铵离子、核酸、ATP、pH、蛋白酶及粘度等参数。获得了B.t生长过程的代谢曲线,从中分析了各参数变化间的相互关系。这对于控制B.t发酵过程及提高发酵水平具有一定指导意义。

苏芸金杆菌(H_(3a3b))发酵中常见噬菌体的研究

从生产车间周围分离到苏芸金杆菌(H_(3a3b))四种类型的噬菌体,并对其进行了感染能力、pH稳定性、热稳定性及紫外线照射失活试验,尤其对生产危害最大的噬菌体TP-1进行了研究。以H_(3a3b)-85-10-6(S)为供试菌株进行了发酵试验。

苏云金杆菌无芽孢突变菌株的选育

采用亚硝基胍、紫外线等处理苏云金杆菌HD-1和7216菌株,获得8663,8714、87085 3株无芽孢突变菌株。分别进行摇瓶试验,并将8663进行7吨发酵罐试验,证明该菌株的发酵性能与原出发菌株基本相当。采用B(?)制剂标准化的程序进行生物测定,效价基本稳定。

苏云金杆菌耐温菌株的选育及其应用

如何防治噬菌体的危害是苏云金杆菌研究中的重要课题。工业发酵中的噬菌体的感染严重影响该制剂的质量,阻碍微生物农药的健康发展。国内有的学者曾采用选育抗噬菌体菌株的方法,已经取得了一定的效果。迄今为止,国内生产厂家仍没能从根本上解决噬菌体引起的倒罐问题。我们于1985年选育出耐温菌株H3a3b—1985—10—6（S）以后,摸索出了一套既适合该菌株正常生长繁殖,又能避开噬菌体侵染期的发酵工艺。

湖北省苏云金杆菌资源调查初报

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)分布广泛。过去,许多研究者不但从死亡昆虫中分离获得大量对鳞翅目害虫有毒的菌株。而且还获得了对双翅目害虫等有效的菌株。自1970年以来,天门县微生物研究所、武汉病毒研究所等单位先后从自然死亡的昆虫体内分离到7216、140、荆菌2号、82612等苏云金杆菌菌株,并在防治农林果蔬害虫方面得到了广泛的应用。为了充分挖掘我省微生物资源,作者从1972年开始。

棉铃虫作供试虫的苏云金杆菌制剂毒力生物测定的研究

本研究采用棉铃虫初孵幼虫为试虫,结果表明:初孵幼虫个体间差异小,测定结果准确性高;36℃下培养48小时,其药剂浓度与供试虫死亡相关系数皆在0.9以上。测定周期仅需2天;供试虫数40头以上,结果重复性好;利用本测定技术,检测100多批试验样品和产品,结果准确可靠,变异系数在20％以下。

Bt杀虫蛋白对棉铃虫的抗虫毒力和增效作用

用 Bt杀虫蛋白 (ICP) Cry1A汰选的棉铃虫 (H elicoverpa armigera)抗性种群和同源对照种群分别测定了 4种不同类型 Bt ICP的抗虫毒力。结果表明 :4种杀虫蛋白对对照种群的毒力顺序为 :Cry1Ac>Cry1Ac+ 1C>Cry2 A>Cry1C;对抗性种群的毒力顺序为 :Cry1Ac+ 1C>Cry1Ac>Cry2 A>Cry1C,其中Cry1Ac+ 1C表现出对抗性种群有显著的协同增效作用。采用从 Bt液体发酵上清液中提取的增效粉 ,与Cry1Ac以 1∶ 1和 1∶ 2的比例混合 ,对 Cry1Ac有显著的增效作用 ,用抗性种群测定的增效比值明显大于对照种群 ,处理 5d的增效比值大于

苏云金杆菌血清H_(3a3b)标准品CS_(3ab—1986)的性状考核及其毒力效价测定

考核了湖北农科院微生物实验工厂制备的苏云金杆菌血清H_(3a3)b型参考标准品CS3ab-1986的性状,表明含活芽孢数为180×10_s/g,含水量3.7％,悬浮率64％.采用棉铃虫初孵幼虫为供试虫,美国标准品HD-1-S-1080为标准,进行了24次毒力生物浏定.确定CS_(aab)-1986毒力效价为7400IU/mg。

棉铃虫作供试虫的Bt毒力生物测定感染饲料的研究

研究表明,酵母粉、黄豆粉和维生素C是棉铃虫生长发育的必需成分;仅用醋酸即可达到防腐的目的。本研究确定生物测定感染饲料配方为:黄豆粉7g、酵母粉4g、维生素CO.5g、36％醋酸1.25ml、琼脂1.5g,水100ml.醋酸用量占饲料重量的1～1.5％为宜。

苏云金杆菌发酵过程的代谢研究

测定了苏云金杆菌发酵过程中总核酸,菌数、总糖、还原糖、溶磷、氨基氮、pH和溶氧的变化。核酸曲线与苏云金杆菌典型生长曲线的形状相似,随培养基浓度而增减,因此认为发酵液的核酸含量可以反映菌体数量。在发酵罐发酵条件下,A、B配方培养基在发酵结束时的残糖分别为起始浓度的62.75％和66.6％,表明碳源的供给是充裕的,但溶氧和溶磷在对数生长期都降至很低水平,启示调整溶氧,增加溶磷可能与进一步提高发酵菌数密切相关。

管碟法测定苏云金杆菌上清液中增效物质含量的研究

以草生欧文氏杆菌LS0 0 5为指示菌 ,用管碟法测定苏云金杆菌KN 1 1发酵液中增效物质的相对浓度。结果表明管碟法和生物测定法在测定增效物质的代谢曲线有较好的一致性 ,均表明 ,菌株KN 1 1的增效物质在营养体时 (约 9h)开始产生 ,到芽孢初步形成时(约 2 0h)已达到最高值的 80 %以上 ,之后是一个缓慢的积累过程。

从土壤中高效分离苏云金杆菌的方法

在醋酸钠分离方法的基础上添加抗生素 ,能显著提高从土壤中分离苏云金杆菌的效率。当青霉素钠盐和硫酸庆大霉素的浓度分别达到 40 0︼g/ ml时 ,除地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和日本甲虫芽孢杆菌有微弱生长外 ,其它 9种杂菌均不能生长。对 2 9个 Bt亚种的生长抑制试验结果表明 ,仅 4个亚种有轻度至中度的生长抑制 ,但仍能形成孢晶。其它各亚种均能正常生长和形成孢晶。醋酸钠 -抗生素方法的可操作浓度为每克土壤稀释 2 0倍 ,较醋酸钠方法可操作浓度高 2 4倍。采用醋酸钠 -抗生素方法分离 Bt,总出菌率为 7.5 % ,高于醋酸钠方法总出菌率(3.8% ) ;分离菌株的基因类型较醋酸钠方法丰富 ,且相同基因型菌株的重复比例亦大大低于醋酸钠方法。

BtMP—342菌株的生物学特性分析及毒力测定

１９９２年，从自然死亡尺蠖幼虫体内分离出ＢｔＭＰｋ３４２菌株，经对落叶松毛虫室内外生测证明，该菌株是高毒力的优良菌株。１９９５年７月～８月期间，采用ＰＣＲ技术分析了ＢｔＭＰｋ３４２菌株特异性，该菌株含有ＣｒｙⅠＡａ、ＣｒｙＡｃ、ＣｒｙＡ、ＣｒｙＢ以及Ｃｒｙ等五种毒蛋白基因。质粒电泳图谱分析表明，ＢｔＭＰｋ３４２菌株由９个质粒构成，其中ＣｒｙＡａ和Ａｃ基因位于１５１．３Ｍｄ和１４６．８Ｍｄ以及４８．７Ｍｄ等质粒上。Ｃｒｙ和Ｃｒｙ均位于两个大质粒上。血清鉴定表明ＭＰ—３４２菌株属Ｋｕｒｓｔａｋｉ亚种，血清型为Ｈ３ａ３ｂ。ＭＰ—３４２菌株在毒蛋白种类、质粒电泳图谱以及基因在质粒上的定位同ＨＤ—１菌株相比均有显著的不同。

苏云金杆菌研究进展

苏云金杆菌研究进展吴继星，陈在佴，谢天健（湖北Ｂｔ研究开发中心武汉４３００６４）目前，苏云金杆菌（Ｂｔ）传统育种技术、分类鉴定、毒素化学、杀虫机制等方面的研究已受到挑战，遗传工程、昆虫抗性及其生态等领域方兴未艾。自从日本生物学家Ｓ．Ｉｓｈｉｗａｔａ于...

BtMP-342菌剂对棉龄虫和小菜蛾的防治效果

在河南、河北和湖北进行了 Bt MP- 34 2菌剂田间防治大龄棉龄虫和小菜蛾试验 ,供试液剂是湖北省农科院生产的 Bt MP- 34 2粉剂 ( 160 0 0 IU/ mg)和液剂 ( 4 0 0 0 IU/ ml)稀释配制而成。试验结果表明 ,粉剂 50 0倍和 10 0 0倍液对棉龄虫 70小时的虫口减退率分别为 75.0 %～95.7%和 72 .2 %～ 85.9% ,均明显高于参试的化学农药。防治小菜蛾液剂的 10 0 0倍和 2 0 0 0倍液 4 8小时的虫口减退率分别达 98.5%和 88.4 %

以棉饼粉为主的BT发酵培养基的筛选

苏云金杆菌(BT)是目前世界上生物杀虫剂中应用最广泛的一类细菌。近几年来,由于化学农药存在污染环境问题。因而使生物农药的应用越来越引起人们的重视。美、苏、法等发达国家BT杀虫剂的产量稳步上升,质量也不断提高,但采用的原料价格贵、成本高。发展中国家科技工作者所面临的重要课题,是如何利用本国廉价的资源生产高效的生物杀虫剂。