输尿管软镜钬激光碎石术治疗上尿路结石(附86例报告)

目的探讨输尿管软镜钬激光碎石术治疗上尿路结石的疗效。方法 2012年10月~2015年11月采用输尿管软镜钬激光碎石术治疗86例上尿路结石,其中肾结石60例,输尿管上段结石26例,结石直径0.8~2 cm。术中输尿管硬镜探查患侧输尿管,留置导丝并引导置入F_(12/14)输尿管软镜外鞘,输尿管软镜通过外鞘进入输尿管上段及肾盂,寻找肾脏各盏结石及输尿管上段结石,连接200μm钬激光高频率低能进行碎石,使结石粉末化(结石<2 mm),稍大的结石碎片通过镍钛合金套石网篮取出,术毕留置导丝并撤出输尿管软镜,沿导丝留置双J管。若输尿管软镜不能通过导丝直接插入,留置F_6双J管2周后再行输尿管软镜碎石。术后4周复查CT评估碎石效果。结果 86例手术均获成功,手术时间30~90 min,(50.5±10.6)min。结石清除率93.0%(80/86),其中肾盂及上盏清石率100.0%(25/25),中盏清石率94.4%(17/18),下盏清石率77.8%(7/9),多个肾盏清除率87.5%(7/8),输尿管上段结石清石率92.3%(24/26)。术后住院时间1~5 d,(2.6±0.5)d,术后2周复查KUB及CT平扫,结石清除率96.5%(83/86)。无尿脓毒血症、出血、穿孔及尿外渗等并发症。结论输尿管软镜钬激光碎石术治疗上尿路结石安全可靠,是值得推广的腔内手术方式。

miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制研究

目的探讨miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制。方法收集2017年1月至2018年9月在台州市中心医院接受手术治疗的40例乳腺癌患者(乳腺癌组)及同期性别、年龄相匹配的40例健康体检者(健康对照组)的血清。采用实时定量逆转录-聚合酶链反应检测血清中miRNA-224-5p的表达;采用免疫印迹试验检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中miRNA-224-5p的表达与自噬活性的关系。采用生物信息学的软件TargetScan 7.2和MiRDB预测miRNA-224-5p作用的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验对预测的靶基因进行验证。结果乳腺癌组血清miRNA-224-5p相对表达量为188.51±59.26,明显高于健康对照组的41.63±14.29,差异有统计学意义(P<0.05)。在MDA-MB-231细胞中,抑制miRNA-224-5p的表达后自噬活性增加。双荧光素酶报告基因实验验证JAG1为miRNA-224-5p的靶基因。结论miRNA-224-5p在乳腺癌患者血清中高表达,在MDA-MB-231细胞中miRNA-224-5p通过靶向JAG1抑制自噬活性。

抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA的建立及在肝癌中的应用

目的:制备抗人Dysbindin-1特异性单克隆抗体,建立DAS-ELISA检测体系,并初步应用于肝癌血清的检测。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗Dysbindin-1单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和SDS-PAGE电泳法检测抗体的亚类、滴度;采用DAS-ELISA技术制备Dysbindin-1检测试剂盒,检测正常、肝硬化及肝癌患者各30例血清并比较其差异。结果:细胞融合后获得了4株稳定产生抗Dysbindin-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1C6A11、1E8H3、2D1C11、5B6D4),抗体亚类分别为IgG2b,IgG2b,IgG1和IgG2a,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106以上,通过抗体配对实验筛选确定2D1C11作为包被抗体,1E8H3作为酶标抗体。该ELISA方法线性范围为62.5-1000ng/mL,检测限为62.5ng/mL;应用该方法检测显示正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P<0.001),Dysbindin-1诊断肝癌的敏感性和特异性分别为90%和93.3%。结论:Dysbindin-1可以成为新的候选的肝癌血清标志物,抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA体系可以初步应用于肝癌的早期诊断。

环介导等温扩增技术对解脲脲原体的临床检测

目的建立并优化环介导等温扩增(LAMP)技术对解脲脲原体(U.urealyticum)的检测,并应用于临床样本分析。方法针对U.urealyticum的urease基因设计LAMP引物;研究LAMP的最适温度、最佳检测时间及灵敏度和特异度;与传统PCR检测进行方法学比对。结果 LAMP技术检测U.urealyticum的最适温度和最佳时间分别是61℃和60 min,并且具有良好灵敏度和特异度,较普通PCR检测的灵敏度高出1 000倍。临床样本检测中,PCR和LAMP技术达到的灵敏度分别为25.00%和87.50%。两种方法的特异度均为100.00%。结论 LAMP与PCR相比在基层检测和大规模筛查方面有显著的优势和巨大的利用价值。