陆川猪GPR1基因启动子甲基化及其mRNA表达分析

为了探讨G-蛋白偶联受体1（GPR1）基因启动子甲基化对其在陆川猪和杜洛克猪背最长肌组织中差异表达的影响,试验采用实时荧光定量PCR方法检测GPR1基因mRNA在两个品种猪背最长肌中的表达水平,在线预测的方法预测GPR1基因启动子区CpG岛,亚硫酸氢盐测序（BSP）法分析猪GPR1基因启动子区CpG岛的甲基化水平。结果表明：GPR1基因在两品种猪背最长肌组织中的相对表达量差异显著,在陆川猪背最长肌中的相对表达量明显高于杜洛克猪;GPR1基因启动子区存在一个CpG岛,长度为103 bp,位于-1 031--929 bp处;GPR1基因启动子区CpG岛在两品种猪背最长肌中的整体甲基化水平差异不显著,但在-126,-116,-64,-10位点甲基化水平差异显著。说明GPR1基因启动子甲基化程度与肌内脂肪沉积存在一定关联。

西藏日喀则地区马铃薯地方资源评价

为高原马铃薯地方种质资源的保护与利用提供依据,对西藏日喀则地区10份地方马铃薯材料的农艺性状和块茎物质含量进行观测,并对马铃薯块茎贮藏物质进行相关性和聚类分析。结果表明:10份马铃薯均为中晚熟品种,不同材料间产量差异极显著(P<0.01),产量与综合品质评价较优的有200905、S10a和S50。10份马铃薯的营养物质以VC含量的变异幅度最大,干物质的变异幅度最小;矿质元素以K和Mg含量最高,P的含量最低;异戊烯焦磷酸异构酶(IPI)含量最高达399 520.5U/g,过氧化物酶(POD)含量最高达527 851.4 U/g;VC与P呈极显著正相关,全糖与IPI呈显著负相关;聚类分析将11份材料分成四类。

陆川猪黑皮质激素受体4基因克隆及序列分析

试验旨在对陆川猪黑皮质激素受体4(melanocortin-4receptor,MC4R)基因进行克隆及相关信息学分析。通过提取陆川猪背最长肌总RNA,采用RT-PCR、克隆等方法获得含目的基因MC4R的质粒pMD18-T-MC4R,经菌落PCR和测序鉴定正确后,应用相关生物信息学软件对陆川猪MC4R基因的理化性质、蛋白质的结构、修饰结构和亚细胞定位等进行预测分析。结果表明,MC4R基因CDS区长999bp,编码332个氨基酸,与NCBI上公布的野猪MC4R基因序列中的CDS区存在4个碱基差异,其中175和906bp处为同义突变,110和278bp处为错义突变,分别引起第37位谷氨酸变为甘氨酸和第93位缬氨酸变为丙氨酸。同源性比对结果发现,MC4R基因在不同物种及进化的过程中具有较高的保守性。陆川猪MC4R蛋白有明显的疏水区域,不存在信号肽,但有7个跨膜结构域,其编码蛋白的二级结构元件有α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲。修饰结构预测表明,MC4R蛋白存在多处N糖基化位点,但无O糖基化位点,可能主要分布于内质网和囊泡。本研究成功克隆了陆川猪MC4R基因,为更好地开发利用地方品种陆川猪及其繁育奠定理论基础。

添加物料和菌剂对日喀则地区马铃薯茎叶青贮品质的影响

以日喀则地区马铃薯(Solanum tuberosum)茎叶为原料制作青贮饲料,分别与玉米(Zea mays)面、小麦(Triticum aestivum)麸、聚合草(Symphytum officinale)、紫花苜蓿(Medicago sativa)、青饲玉米、燕麦草(Arrhenatherum elatius)、干青稞(Hordeum vulgare)秸秆、干油菜(Brassica napus)壳等材料混贮,以甲酸、尿素、食盐和6种生物菌剂(A,活性乳酸菌冻干粉;B,益加益秸秆发酵剂;C,千牧EM菌原种;D,百益宝EM菌种;E,微特美益生菌种;F,粗饲料降解剂)为添加剂,聚乙烯袋真空包装分别于发酵30、60、90d后进行感官评定及生化分析,采用隶属函数法综合评价青贮品质。结果表明,日喀则地区马铃薯茎叶青贮饲料在制作后30d已经基本完成发酵进入青贮稳定阶段,能长期有效保持饲料的水分及营养物质。单独的马铃薯茎叶青贮效果差,添加生物菌剂、甲酸、麦麸、玉米面、青饲玉米秸秆、燕麦草可以改善青贮品质,其中添加麦麸的效果优于玉米面,添加青饲玉米优于添加燕麦草。聚合草含水量高、紫花苜蓿营养丰富,但是与马铃薯茎叶混贮发酵效果差。干油菜壳不适于与马铃薯茎叶混贮。菌剂A、B的青贮效果要优于E、F。研究得出,马铃薯茎叶+30%麦麸,马铃薯茎叶+0.3%尿素+0.4%食盐+30%麦麸+D,茎叶+30%麦麸+B这3个青贮处理效果较好。

利用隶属函数法评价马铃薯组培苗的抗旱性

为了建立马铃薯组培苗抗旱性评价体系,以6个马铃薯品种(系)的脱毒组培苗为试验材料,研究比较了在固体培养基中分别添加5%,10%,15%和20%PEG-8000模拟干旱胁迫和对照处理下(不含PEG-8000)培养50 d后组培苗生长生理指标的变化。结果表明,在0～20%PEG浓度,随着胁迫处理PEG浓度的增加,所有材料的组培苗表现出受干旱胁迫越严重的现象,生长指标下降,干物质含量逐渐升高,脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖、丙二醛含量升高。不同品种(系)对干旱的反应不同,当固体培养基中PEG浓度为5%时,供试品种(系)间的差异最大。单采用某一胁迫强度下的生理指标数据不能准确评价植物的抗旱性。以生长指标和丙二醛含量在不同浓度PEG下的变异系数为抗旱评价指标,利用隶属函数法综合分析,6个品种(系)的抗旱性由强到弱为:‘渭薯1号’>‘青薯9号’>‘春薯2号’>‘东农303’>‘200902’>‘D613’。

日喀则地区马铃薯生产现状及发展对策

日喀则地区为西藏马铃薯主产区,发展马铃薯产业具有资源、品质、品牌及出口优势,但存在品种单一,种薯体系不完善,加工能力弱,种植规模小,配套技术落后等问题。提出了加快育种步伐实现品种多元化,完善脱毒种薯推广体系,营造品牌优势,实行标准化规模化种植,重视马铃薯配套技术研究等发展措施,为发展日喀则地区马铃薯产业,促进农村经济发展提供理论参考。

马铃薯抗旱评价指标及方法

干旱是限制马铃薯生产的重要因子。根据国内外马铃薯抗旱性鉴定指标和鉴定分析方法的研究成果,对马铃薯抗旱评价指标进行总结与分析,分析结果如下:目前马铃薯抗旱性鉴定多利用干旱胁迫下马铃薯形态、生理生化指标变化的差异确定品种的抗旱性。耐旱品种在根系分布的深度、根系的拉力和强度、根系吸收能力、根系活力等方面优于不耐旱品种,抗旱性品种受干旱胁迫影响较小,干旱胁迫下产量降幅、株高降幅、相对含水量的降幅、叶片质膜相对透性升高幅度小的品种抗旱性强,脯氨酸的积累幅度大的品种抗旱性强,MDA含量增幅低的品种抗旱性强。SOD活性、POD活性、CAT活性在受旱植株体内的变化规律性差,且与胁迫强度、时间等相关,适于作为抗旱性鉴定参考。抗旱性是由多基因控制的数量性状,单个抗旱基因不能完全代表植株整体的抗旱性。马铃薯抗旱性是由多种因素和多种机制相互作用构成的一个复杂的综合性状,近年来较多采用综合指标法。

陆川猪GPR1基因真核表达载体构建及组织表达谱分析

试验旨在构建陆川猪G蛋白偶联受体1(G protein-coupled receptor 1,GPR1)基因真核表达载体,并对其组织表达谱进行分析。采用RT-PCR技术从10周龄陆川猪皮下脂肪组织中扩增出GPR1基因CDS区后,使用常规分子克隆手段构建含GPR1基因片段的真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,利用双酶切和测序对重组质粒pEGFPN1-GPR1进行鉴定,并以脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞24h后观察细胞荧光表达情况。收集所转染3T3-L1细胞并提取其总RNA,实时荧光定量PCR进一步检测GPR1真核表达载体表达情况;提取6头10周龄陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪总RNA,实时荧光定量PCR检测GPR1基因mRNA在陆川猪各组织中的表达量。结果表明,陆川猪GPR1基因CDS全长1 068bp,成功将其连接至pEGFP-N1真核表达载体,重组表达载体pEGFP-N1-GPR1质粒和空载pEGFP-N1质粒所转染3T3-L1细胞均能表现出绿色荧光,且空白对照组并未表现出绿色荧光。实时荧光定量PCR结果证实,GPR1基因在重组质粒试验组的表达量极显著高于空载质粒组(P<0.01)。GPR1基因在10周龄陆川猪肝脏中表达量最高,在心脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪中均有表达,在背最长肌中几乎不表达。本试验成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,并获得了GPR1基因组织表达谱,为进一步研究GPR1基因对陆川猪脂肪沉积的影响提供参考。

2003～2013年我国马铃薯研究文献分析

采用文献计量学等统计方法，以《中国知网》为数据源，对2003-2013年间中国马铃薯领域研究文献进行了论文数量、年份分布、期刊分布、省份分布和研究内容的统计分析，总结分析马铃薯领域研究的现状及发展趋势，为今后的马铃薯研究工作提供指导。

抗甘蔗花叶病毒的无标记反向重复转基因玉米

构建了无标记基因源自玉米矮花叶病的主要病原——甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)复制酶基因的反向重复序列表达载体,通过农杆菌介导法以该表达载体和除草剂标记基因表达载体共转化玉米自交系综3的幼胚,用除草剂梯度筛选,获得了可育的再生株。对T1和T2代群体作PCR和DNA点杂交,结合温室和田间人工接种病毒进行抗病性鉴定,获得了比较稳定的对SCMV高抗的无标记转基因玉米株系。

雷州黄牛生长发育和肉质性状研究

采用随机抽样法调查测量了雷州黄牛的体尺和测定了部分肉质性状指标,结果表明:雷州黄牛的主要体尺性状与30年前相比,提高幅度超过10%;除宽度与体长之间外,各项体尺间呈正相关;肉质性状方面,眼肌面积大,嫩度优于北方牛种。提出了雷州黄牛今后的选育和改良重点。

企业资金管理的高效模式构建研究

企业资金管理是财务工作的一项重要内容,对于企业的经营管理有着重要的影响。但是目前有很多企业的财务人员对资金管理不到位,出现很多问题,导致企业资金管理效率低下。因此文章着眼于建立高效的企业资金管理模式,以从根本上解决这一方面的问题。首先分析了企业资金管理模式的现状与存在的问题,然后提出企业资金管理的高效模式构建的必要性与紧迫性,接着构建企业资金管理的高效模式,最后阐述了企业资金管理的高效模式的应用环境与条件。

雷州黄牛的遗传资源与利用建议

抽样测定和分析雷州黄牛的体尺、肉质性状,调查雷州黄牛的历史形成和生产利用现状。探讨雷州黄牛的进一步高效利用途径。

西藏林芝地区牛奶子青果期与红果期营养品质的比较分析

比较西藏林芝地区牛奶子果实在青果期与红果期各营养品质生理指标的差别,初步探究牛奶子成熟过程中营养品质变化特征,以期对高原牛奶子果实资源的开发利用有一定指导作用。结果表明:牛奶子果实青果期与红果期的各生理指标差异十分明显。总糖、番茄红素、异戊烯焦磷酸异构酶(IPI)、Na、Fe、P的含量红果期明显高于青果期;干物质、淀粉、抗坏血酸、蛋白质、K、Ca、Zn、Mg的含量则相反;可溶性糖与过氧化物酶(POD)含量差异不明显。牛奶子果实红果期番茄红素8 935.00mg/kg的含量也远远超过其他地区牛奶子果实资源,说明高原产牛奶子果实具有显著优势,应加大开发力度。

鼠伤寒沙门氏菌/微粒体系统检测抗蠕虫新药AH-85012的诱变性研究

本文用沙门氏菌诱变性试验(Ames试验),对本所研制的抗蠕虫新药AH-85012进行了致突变作用的研究,实验证明该化合物无致突变作用。

陆川猪MYL9基因克隆及其表达差异分析

【目的】克隆陆川猪肌球蛋白调节轻链9基因(MYL9),并进行生物信息学分析及检测其在不同猪种中的表达差异,为明确陆川猪骨骼肌生长规律及研究MYL9的生理功能打下基础。【方法】根据NCBI上的家猪MYL9基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR克隆陆川猪MYL9基因,利用在线软件对其进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测陆川猪和杜洛克猪背最长肌中MYL9基因的表达情况。【结果】陆川猪MYL9基因编码区(CDS)序列长519bp,共编码172个氨基酸;与NCBI上已公布的家猪MYL9基因(NM_001244472.1)CDS序列比对,陆川猪MYL9基因存在2处碱基突变,分别是195 bp处C→A和498 bp处T→C,均为同义突变;陆川猪MYL9基因推导氨基酸序列与家猪MYL9基因推导氨基酸序列的同源性最高,为99.6%,与鸡的同源性最低,为88.4%。陆川猪MYL9蛋白存在3个N糖基化位点和15个磷酸化位点,不存在跨膜结构域和信号肽,符合一般EFh-PEF超家族的结构特征。陆川猪MYL9蛋白二级结构中α-螺旋占54.65%,无规则卷曲占35.47%,β-转角占8.14%,延伸链占1.74%。MYL9基因在杜洛克猪背最长肌中的相对表达量极显著高于陆川猪背最长肌(P<0.01)。【结论】MYL9基因序列在不同物种中具有较高的保守性,其在10周龄陆川猪背最长肌中的相对表达量极显著低于杜洛克猪,与其在不同猪种背最长肌中的磷酸化程度有关,也说明MYL9基因对猪肌肉生长速度有一定影响。

互联网金融时代银行网点转型方式之研究

近年来，互联网金融方兴未艾，传统银行经营模式遭受了巨大冲击，以物理网点作为主要经营模式的银行已经逐渐失去了竞争力。因此，需要融合互联网思维，对银行网点进行转型，改进经营模式，提高银行效益。

解析外资银行在华发展的内外因素

时间飞逝,转眼间中国加入WTO已近四年了.四年间,外资银行在中国的业务获得了飞速的发展,并已成为中国银行业中一支不可忽视的重要力量.随着2006年底中国即将全面开放银行业,外资银行纷纷加快了其在中国发展的步伐,这使得中国银行业的竞争更趋白炽化.本文试就外资银行在中国发展所面临的外围环境及其自身的优势、劣势做一些探讨.

行动研究在护理本科生临床教学中应用的范围综述

目的 全面综合分析国内外行动研究在护理本科生临床教学中的应用现状,旨在为临床护理教育者开展行动研究提供参考。方法 基于Arksey和O'Malley范围综述方法学框架,检索Scopus、PubMed、Web of Science、Cochrane Library、CINAHL、中国知网、万方知识数据服务平台、维普网、中国生物医学文献数据库9个中英文数据库,检索时限为建库至2024年1月24日,并由2名研究者对行动研究在护理本科生临床教学中应用的研究进行回顾分析及信息提取。结果 共纳入18篇文献,行动研究应用于护理本科生临床教学的多个方面,包括创新临床教学及考核方式、构建临床教学指导方案、探究优质教学方法的应用效果;纳入文章的研究模式、观察策略、评价工具等均有一定的差异,且行动研究实施过程中存在不足之处。结论 行动研究在国内外护理本科生临床教学中应用广泛,并能切实解决临床教学问题,但行动实施过程规范性欠佳,学生参与度有待加强,行动研究的效果评价亦需要进一步研究。

陆川猪IGFBP5基因克隆及其差异表达分析

【目的】克隆陆川猪胰岛素生长因子结合蛋白5(IGFBP5)基因,并明确其在不同猪种中的表达情况,为今后揭示IGFBP5基因在陆川猪肌肉发育中的作用机理提供理论依据。【方法】通过TRIzol法提取陆川猪背最长肌总RNA,反转录合成cDNA后进行PCR扩增,将正确的测序结果采用在线生物信息软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测分析IGFBP5基因在陆川猪和杜洛克猪背最长肌中的表达差异。【结果】陆川猪IGFBP5基因编码区(CDS)序列全长816bp,编码271个氨基酸,与NCBI上已公布的野猪IGFBP5基因(NM_214099.1)CDS序列相比,存在3处碱基差异,其核苷酸同源性为99.6%。陆川猪IGFBP5氨基酸序列与NCBI上已公布的野猪(NM_214099.1)、牛(NM_001105327.2)、水牛(NM_001290940.1)、马(NM_001308603.2)、人类(NM_000599.3)、猕猴(NM_001284032.1)、小鼠(NM_010518.2)和大鼠(NM_012817.1)IGFBP5氨基酸序列同源性分别为98.9%、98.2%、98.9%、97.4%、96.7%、97.4%、95.2%和95.2%;基于IGFBP5氨基酸序列同源性构建的系统发育进化树也显示,陆川猪与野猪的遗传距离最近。陆川猪IGFBP5蛋白二级结构由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,其中无规则卷曲占比最高,为65.68%;陆川猪IGFBP5蛋白不存在跨膜结构,在第1~20位氨基酸残基存在1个信号肽序列;蛋白修饰结构预测结果表明,陆川猪IGFBP5蛋白存在2个O糖基化位点、2个N糖基化位点和多个潜在磷酸化位点,包含IB保守结构域和Thyroglobulin-1保守结构域。IGFBP5基因在杜洛克猪背最长肌中的相对表达量极显著高于其在陆川猪背最长肌中的相对表达量(P<0.01)。【结论】IGFBP5基因保守性较强,其在不同猪种间的差异表达可能是导致猪肉瘦肉率差异的主要原因,可作为陆川猪胴体重和瘦肉率等生长性状的遗传标记予以开发利用。