新型免疫抑制剂浅蓝霉素A诱导肾损伤炎症的作用

目的探究高浓度浅蓝霉素A(Cae A)对人肾小管上皮细胞HK2的影响,并探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)在此过程中发挥的作用。方法采用MTT法测定不同浓度的Cae A对HK2细胞活力的影响;采用实时定量PCR,Western blotting以及免疫荧光法检测高浓度Cae A对肾损伤分子1(KIM-1)以及NLRP3表达情况的影响;同时用实时定量PCR方法,检测高浓度Cae A对白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素33(IL-33)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达情况;随后将HK2细胞分为对照组、高浓度Cae A组和高浓度Cae A加NLRP3抑制剂CY-09组,Western blotting检测KIM-1和NLRP3蛋白的表达变化。结果MTT的结果显示,高浓度Cae A可以抑制HK2细胞活力;实时定量PCR,Western blotting和免疫荧光实验表明,高浓度Cae A可以上调KIM-1和NLRP3的水平,以及IL-1β、IL-18、IL-33、MCP-1、TNF-α的mRNA表达水平,而CY-09能显著下调NLRP3和KIM-1的蛋白水平。结论高浓度的Cae A能明显抑制HK2细胞的活力,诱导HK2细胞发生损伤及炎症反应,有显著的肾毒性,而且该肾毒性是通过激活NLRP3通路来实现的。