目的:探讨应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术分离脑微血管及双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)研究微血管蛋白质的方法及可行性。方法:将新鲜大鼠脑皮质常规制备冰冻切片,采用快速免...目的:探讨应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术分离脑微血管及双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)研究微血管蛋白质的方法及可行性。方法:将新鲜大鼠脑皮质常规制备冰冻切片,采用快速免疫组织化学染色,应用LCM技术分离脑微血管,提取微血管蛋白质,建立双向凝胶电泳图谱。结果:通过LCM技术可以准确、快速地分离微血管。通过优化2-DE各参数,2-DE能充分分离微血管蛋白质,并获得了分辨率和重复性较好的2-DE图谱。结论:LCM技术可以成功解决组织异质性问题,获取纯度较高的脑微血管,2-DE技术能应用于微血管蛋白质组研究。这些结果表明2-DE联合免疫染色法-LCM技术运用于脑微血管蛋白质组学研究的可行性。展开更多
探讨MRI引导聚焦超声开放兔血脑屏障(BBB)后药物在脑内的摄入量与药物分子量之间的关系及药物在靶区空间分布情况。25只新西兰大白兔被随机平均分为5组,在MRI引导聚焦超声开放BBB后,分别静脉注入荧光标记的不同分子数量级的右旋糖酐(10,...探讨MRI引导聚焦超声开放兔血脑屏障(BBB)后药物在脑内的摄入量与药物分子量之间的关系及药物在靶区空间分布情况。25只新西兰大白兔被随机平均分为5组,在MRI引导聚焦超声开放BBB后,分别静脉注入荧光标记的不同分子数量级的右旋糖酐(10,150 and 2000 k Da),采用激光共聚焦显微镜检测其在靶区的荧光强度,并将切片行免疫荧光染色观察右旋糖酐与神经元标志物共区域化现象。10k Da的右旋糖酐以最高浓度呈片状分布在整个超声照射区域,而150 k Da和2000 k Da的右旋糖酐以较低的浓度在靶区呈点状分布(P<0.01);通过与神经元标志物共区域化,10k Da的右旋糖酐更为均一的分布在整个神经元胞浆和胞核内,而150 k Da和2000 k Da的右旋糖酐在神经元胞浆内主要以囊泡样结构分布,且后者该结构的数量较少。MRI引导聚焦超声开放BBB后,药物在脑内的摄入量与药物分子量有关,分子量越小靶区药物浓度越高,其在神经元内的分布越均一。本研究将有助于治疗脑部疾病药物的合理设计、选择和应用。展开更多
文摘目的:探讨应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术分离脑微血管及双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)研究微血管蛋白质的方法及可行性。方法:将新鲜大鼠脑皮质常规制备冰冻切片,采用快速免疫组织化学染色,应用LCM技术分离脑微血管,提取微血管蛋白质,建立双向凝胶电泳图谱。结果:通过LCM技术可以准确、快速地分离微血管。通过优化2-DE各参数,2-DE能充分分离微血管蛋白质,并获得了分辨率和重复性较好的2-DE图谱。结论:LCM技术可以成功解决组织异质性问题,获取纯度较高的脑微血管,2-DE技术能应用于微血管蛋白质组研究。这些结果表明2-DE联合免疫染色法-LCM技术运用于脑微血管蛋白质组学研究的可行性。
文摘探讨MRI引导聚焦超声开放兔血脑屏障(BBB)后药物在脑内的摄入量与药物分子量之间的关系及药物在靶区空间分布情况。25只新西兰大白兔被随机平均分为5组,在MRI引导聚焦超声开放BBB后,分别静脉注入荧光标记的不同分子数量级的右旋糖酐(10,150 and 2000 k Da),采用激光共聚焦显微镜检测其在靶区的荧光强度,并将切片行免疫荧光染色观察右旋糖酐与神经元标志物共区域化现象。10k Da的右旋糖酐以最高浓度呈片状分布在整个超声照射区域,而150 k Da和2000 k Da的右旋糖酐以较低的浓度在靶区呈点状分布(P<0.01);通过与神经元标志物共区域化,10k Da的右旋糖酐更为均一的分布在整个神经元胞浆和胞核内,而150 k Da和2000 k Da的右旋糖酐在神经元胞浆内主要以囊泡样结构分布,且后者该结构的数量较少。MRI引导聚焦超声开放BBB后,药物在脑内的摄入量与药物分子量有关,分子量越小靶区药物浓度越高,其在神经元内的分布越均一。本研究将有助于治疗脑部疾病药物的合理设计、选择和应用。
