SnO_(2)纳米颗粒的制备及对甲醛气敏性能的研究

采用溶胶-凝胶法制备了SnO_(2)纳米颗粒,并用X射线衍射仪(XRD)和扫描电镜(SEM)对制备的材料进行结构及形貌表征,测试了纳米颗粒对甲醛的敏感特性,讨论了锡盐与柠檬酸用量对SnO_(2)纳米颗粒尺寸和气敏性能的影响。结果表明:当锡盐与柠檬酸的用量配比(摩尔比)为1∶2.5时,可以制备分散度良好并且具有最佳气敏性能的纳米颗粒结构,展现了SnO_(2)纳米颗粒在甲醛气体检测方面的良好应用前景。

斑点叉尾鮰柱形病病原的分离鉴定及药敏试验

从网箱患柱形病的斑点叉尾鮰病灶中分离到一株细菌(YZ130310),经回归感染试验证实其具有高度致死性。经形态学观察、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析鉴定,其主要特征为:革兰氏阴性,菌体细长、两端钝圆、弯曲或直的杆状,菌落浅黄色,边缘不整齐呈根须状;氧化酶、过氧化氢酶阳性,分解酪素和明胶,不分解纤维素、几丁质、酪氨酸、七叶灵和淀粉,硝酸盐还原阳性,吲哚和葡萄糖产气阴性。菌株的16S rRNA基因序列分析结果表明,菌株YZ130310与GenBank上登录的柱状黄杆菌(Flavobacterium Columnare)ATCC 49512株的16S rRNA序列同源性最高,其相似性达99.6%;在基于16S rRNA基因序列构建的系统发育树中,菌株YZ130310与柱状黄杆菌(AY095342)聚为一支。综合形态及生理生化特点和分子生物学的分类鉴定结果,菌株YZ130310可鉴定为柱状黄杆菌(F.Columnare)。16种抗菌药物的敏感性试验结果表明,菌株YZ130310对头孢哌酮等7种药物敏感,对阿米卡星和氧氟沙星2种药物中度敏感,对头孢氨苄等7种药物存在不同程度的耐药性。

渔业检测实验室样品管理质量控制

[目的]为了对渔业检测实验室样品管理进行有效的质量控制。[方法]运用要素控制的方法,对样品管理过程中样品管理员和样品的采集、运输、接收、制作、贮存、流转、处置及样品的安全和保密等要素和环节进行质量控制研究。[结果]通过对各要素、环节进行严格的质量控制,实现了样品的有效管理。[结论]该研究为实现检测结果的合法性、准确性、有效性奠定了坚实基础,确保了渔业检测实验室质量管理体系的有效运行。

水产品产地监督抽查抽样质量控制

[目的]确保水产品产地监督抽查样品具有合法性和代表性。[方法]运用要素控制的方法,对抽样工作实施过程中的工作人员、材料工具、抽样过程、保存和运输及样品交接等各要素进行有效的质量控制。[结果]通过对各要素进行质量控制,确保了实验室质量管理体系现场抽样环节受控。[结论]该研究为实验室检测结果的公正性、有效性和准确性奠定了坚实基础,可为渔业管理部门和渔业执法工作提供可靠的科学依据。

TaqMan-LNA探针荧光定量PCR快速检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒

【目的】建立快速、特异、灵敏检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的TaqMan-LNA探针荧光定量PCR方法,为IHHNV的临床诊断和疫情监测提供更简便的检测技术。【方法】根据GenBank已发表的IHHNV毒株序列,在IHHNV保守区序列设计特异性引物和TaqMan-LNA探针;对荧光定量PCR反应条件进行优化以缩短检测时间,提高特异性和灵敏度;应用TaqMan-LNA探针荧光定量PCR对广西地区的300份凡纳滨对虾样品进行检测,验证方法的实用性。【结果】TaqMan-LNA探针荧光定量PCR检测IHHNV的灵敏度高,约为10个病毒粒子/反应,定量范围宽,在1.6×101～1.6×108拷贝/μL的范围内具良好的线性关系;与SPF凡纳滨对虾组织、WSSV、副溶血弧菌的DNA和TSV的RNA均无反应,特异性好;组内变异系数为0.53%～1.75%,组间变异系数为0.81%～1.14%,重复性和重现性均较好,结果稳定可靠;临床应用结果表明,300份凡纳滨对虾样品检出193份阳性,阳性率为64.3%,表明广西沿海地区养殖的凡纳滨对虾IHHNV感染率较高。【结论】利用TaqMan-LNA探针建立检测IHHNV的荧光定量PCR方法具有快速、特异、灵敏、重复性好、能定量等优点,可用于对虾IHHNV的检测。

四重PCR检测致病性嗜水气单胞菌

目的建立一种能够快速准确地检测致病性嗜水气单胞菌的四重PCR方法。方法根据致病性嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶(ahpA)基因、气溶素(aerA)基因和溶血素(hlyA)基因的保守序列以及嗜水气单胞菌的16SrRNA基因种属特异性序列分别设计4对特异性引物,通过优化各引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,确定了四重PCR的最佳反应条件;然后进行特异性和敏感性试验,并比较其与常规微生物学方法对不同菌株和临床样本的检出率。结果该方法特异性好,能特异性检测并鉴别出嗜水气单胞菌致病性菌株;检测灵敏度高,最低可检测到约100fg的嗜水气单胞菌基因组DNA;对9株嗜水气单胞菌的检测结果与常规微生物学方法一致,对56份送检的水产动物样品的检出率为21.4%,高于常规微生物学方法的16.1%,两者检测结果符合率为94.6%。结论成功建立了能同时检测嗜水气单胞菌16SrRNA、aerA、ahpA和hlyA基因的四重PCR方法,能快速、准确地对嗜水气单胞菌进行检测并区分致病性与非致病性菌株。

农业部渔业产品质量监督检验测试中心(南宁)通过部级质检机构考核、审查认可和国家计量认证复查评审

根据农业部农产品质量安全监管局安排，以农业部渔业产品质量监督检验测试中心（厦门）主任吴成业为组长的国家计量认证农业评审组于2012年1月5日至7日对“农业部渔业产品质量监督检验测试中心（南宁）”进行农产品质量安全检测机构考核、机构审查认可和国家计量认证复查现场评审。

文蛤生物体及内脏中弧菌的研究

[目的]鉴定文蛤体内弧菌的类型及致病性强度,并筛选治疗这些病原菌的最佳药物。[方法]用TCBS培养基从文蛤生物体内分离出12株弧菌,对其进行致病性试验,对致病性较强的3株弧菌进行鉴定及药物敏感试验。[结果]该3株菌分别为河流弧菌H04(Vibrio fluvialis),H06副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),H11创伤弧菌(Vibrio vulnificus),其对环丙沙星、先锋赛高度敏感,对青霉素G、先锋霉素V有耐药性,临床上可以首选环丙沙星、先锋赛作为治疗这些病原菌的药物,其次是头孢曲松、氟哌酸、丁胺卡那、四环素、庆大霉素等。[结论]结果为文蛤疾病的防治提供了理论依据。

水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测

介绍了美国ABRAXIS麻痹性贝类毒素试剂盒的测定原理和测定方法,应用该试剂盒对广西钦州和防城港海域近江牡蛎样品各20个、北海海域文蛤样品20个,进行麻痹性贝类毒素检测。应用酶联免疫试剂盒检测麻痹性贝类毒素,全部试验过程在2 h内完成,检测限0.02 ng/g,灵敏度为0.015 ng/g。应用ELISA法检测麻痹性贝类毒素,具有简便、快捷、灵敏、成本低廉等特点,非常适于快速检测的实际需求,有望作为理想的筛选分析方法之一,在水产品质量快速检测、养殖区染毒情况调查以及上市贝类质量监控方面发挥重要作用。

高效液相色谱法测定水产品中的斑蝥黄

建立了一种高效液相色谱测定水产品中斑蝥黄的方法。样品经乙腈萃取,用乙腈和水为流动相,用液相色谱-紫外检测器检测,采用外标法定量。该方法检出限为10μg/kg;斑蝥黄质量浓度在0.02~10μg/mL时线性良好,相关系数0.999 4;不同浓度的加标回收率为90.1%~96.5%,相对标准偏差（RSD）为2.0%~4.2%（n=6）。该方法简便、准确,精密度良好,消耗少,适用于水产品中斑蝥黄残留量的测定。

高效液相色谱法对水产品中虾青素的测定

建立水产品中虾青素含量的高效液相色谱测定方法.样品经乙腈萃取、超声提取、离心后,将上清液旋转蒸发、定容,用液相色谱-紫外检测器检测,外标法定量.虾青素浓度在0.02- 10.00 μg/mL范围内线性关系好,相关系数0.999 5;加标回收率为91.9％-95.8％,检出限为10.00 μg/kg.该方法准确度高,重现性好,易操作,适用于水产品中虾青素含量的测定.

TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura综合征病毒的研究

为建立Taura综合征病毒(Taura syndrome virus,简称TSV)的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PC方法,根据TSV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和TaqMan-MGB探针,扩增产物长度为118bp。将PCR产物克隆到pGM-T载体,重组质粒经筛选鉴定、SalⅠ单酶切,得到线性化转录模板DNA,经体外转录获得标准品RNA。以体外转录的RNA作为模板,进行一步法荧光定量RT-PCR反应,根据RNA模板拷贝数与Ct(Cycle threshold,Ct)值制备了标准曲线,制作的标准曲线在2×101拷贝/μL≤TSV RNA≤2×107拷贝/μL的范围内具良好的线性关系,可以用于TSV的定量分析,检测灵敏度为20个拷贝数。特异性、重复性试验结果表明,该方法对SPF对虾组织RNA没有扩增反应,表现出良好的特异性;组内和组间实验变异系数分别为0.32%～1.84%和0.79%～2.71%。利用TaqMan-MGB探针建立检测TSV的一步法荧光定量RT-PCR方法可用于对虾TSV的检测。

来宾红水河珍稀鱼类保护区水质指标相关性研究

借助SPSS统计分析软件,选择来宾红水河珍稀鱼类保护区水质指标中水温、pH、DO、COD_(Mn)、NH_3-N、NH_3、TN、TP、Chl-a进行Pearson相关分析。为水质监测人员和数据审核提供参考,提高数据质量,同时便于通过相关关系的改变及时了解水质的变化。结果表明,Chl-a与环境因子具有较密切的相关关系,其中,Chl-a与TN、TP表现为负相关关系,Chl-a与NH_3-N、NH_3为显著正相关,相关系数分别为0.30、0.41;Chl-a与水温、pH、DO均存在不同程度的正相关;Chl-a与COD_(Mn)呈极显著正相关,相关系数为0.44。N/P变化范围是7.4~166.1,属于磷限制性水域。营养盐与其他环境因子之间也存在某些较稳定的相关关系,其中,TP和pH极显著负相关,相关系数为-0.52;NH和3pH、NH_3和DO、NH_3-N和DO极显著正相关,相关系数分别为0.51、0.77、0.75。NH_3和NH_3-N相关系数达到0.72。DO和水温极显著负相关,相关系数为-0.44,和pH极显著正相关,相关系数为0.33,和COD_(Mn)呈负相关趋势。

产酶真菌F9的分离及其发酵蛋白饲料研究

从近江牡蛎肠道中分离出产酶真菌F9,初步鉴定为霉菌。通过正交试验确定其发酵蛋白饲料的最佳培养条件,并研究真菌F9孢子、发酵液对小鼠的安全性。研究结果表明:(1)F9发酵蛋白饲料最佳培养条件为接种量20%、发酵温度30℃、发酵时间72 h、料水比1∶1.0～1∶2.0;(2)该株真菌对小鼠安全,可用于发酵生物蛋白饲料。

液相色谱-串联质谱法测定小龙虾中硝基呋喃类代谢物残留量的不确定度评定

文章根据《测量不确定度评定与表示》(JJF 1059.1—2012),探讨采用《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》(GB 31656.13—2021)测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度,建立相应数学模型,评估不确定度的测定结果。检测结果为c_(AOZ)=2.29μg/kg,U=0.33,k=2;c_(AMOZ)=2.41μg/kg,U=0.27,k=2;c_(AHD)=2.45μg/kg,U=0.31,k=2;c_(SEM)=2.37μg/kg,U=0.27,k=2。

实验室信息管理系统(LIMS)在渔业检测实验室中的应用

结合实验室管理要素,从模块功能的角度对LIMS在渔业检测实验室中的应用进行探讨。LIMS在渔业检测实验室中的应用完善了检测流程,集资源管理、质量控制、环境控制和系统管理于一体,涉及实验室所有管理要素,组成完整的实验室综合管理体系。LIMS的应用使工作效率、结果准确性、数据安全性、资源利用率均大大提高,进而提高了实验室整体管理水平,提升实验室在渔业检测机构的地位和竞争力。

凡纳滨对虾WAP基因重组表达及抗病功能分析

【目的】针对凡纳滨对虾白便病的危害现状,克隆其WAP基因并分析其组织表达特性及抗病功能,为凡纳滨对虾抗病药物开发提供参考依据。【方法】设计WAP基因特异性引物,用RT-PCR检测WAP基因在凡纳滨对虾血细胞、眼柄、鳃、肝胰腺、心脏、胃、肌肉、神经、肠、后盲囊和表皮等11种组织的表达分布情况;采用实时荧光定量PCR检测患白便病凡纳滨对虾鳃和肠道组织的WAP基因表达量;重组表达WAP蛋白,使用ELISA分析其与细菌多糖LPS(脂多糖)、PGN(肽聚糖)和LTA(脂磷壁酸)的结合能力。【结果】WAP基因在11个凡纳滨对虾组织均有表达,其中,以在血细胞中的表达量最高,在表皮、眼柄和肝胰腺的表达量表达较低;WAP基因在感染白便病凡纳滨对虾鳃和肠道组织的表达量显著高于健康凡纳滨对虾(P<0.05),分别为健康凡纳滨对虾的5.9258和1.5147倍;WAP融合蛋白与细菌多糖LPS、PGN和LTA具有直接结合作用,细菌多糖的结合能力表现为PGN>LPS>LTA。【结论】WAP基因与凡纳滨对虾抗病免疫功能密切相关,WAP融合蛋白在开发凡纳滨对虾抗白便病药物方面具有潜在应用价值。

水产品中4种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立

【目的】建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持。【方法】以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因、志贺氏菌ipa H基因和金黄色葡萄球菌fem A基因的保守序列设计引物,对引物浓度配比、退火温度及反应体系等进行优化,并对建立的多重PCR进行特异性、敏感性及临床样品检验试验。【结果】4种目标致病菌在LB肉汤培养基中36℃培养18 h后,均表现出良好的生长趋势,增菌数量级均在108 CFU/m L以上。优化后的多重PCR能对4种目标菌的单一或混合基因组DNA进行特异性扩增,而对单增李斯特氏菌、肺炎克雷伯菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌等其他菌株的基因组DNA均未扩增出任何条带;对沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7和金黄色葡萄球菌的最低检出限为102 CFU/m L,对志贺氏菌最低检出限为10 CFU/m L。应用该多重PCR对56份水产品进行检测,其结果与按照GB/T 4789-2003、GB/T 4789-2010检测的结果一致。【结论】针对同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR具有快速、便捷、灵敏、准确等优点,可为水产品食源性致病菌检测及其安全控制行业提供一种快速、准确、高效、经济的检测手段。

浅谈LIMS在渔业检测实验室中的实施

[目的 ]提高渔业检测实验室整体管理水平.[方法 ]将LIMS与传统的实验室管理模式进行对比,进一步探讨引进和实施LIMS的方法.[结果 ]初步了解LIMS的基本性能和优势,正确引进并成功实施LIMS.[结论 ]LIMS的成功实施有助于规范实验室管理流程,提高工作效率,以帮助渔业检测实验室提高整体管理水平.

广西合浦廉州湾贝类养殖区表层沉积物重金属汞和砷污染评价

【目的】掌握广西合浦廉州湾贝类养殖区表层沉积物重金属的污染状况及发展趋势,为广西海水贝类养殖区重金属污染的治理提供科学依据。【方法】根据广西合浦廉州湾养殖区域地形结构特点及养殖生产情况,分别设党江浅水区（1#）、党江深水区（2#）、沙岗（3#）、西场（4#）4个监测点,于2008~2010年夏季、秋季对4个监测点进行6次采样,采用GB 18668-2002《海洋沉积物质量》标准和地积累指数（Igeo）评价其重金属汞（Hg）和砷（As）的污染程度。【结果】党江浅水区（1#）、党江深水区（2#）和沙岗（3#）3个监测点Hg的Igeo较小,无Hg污染;而西场监测点（4#）Hg的Igeo为1.91,地积累级别为2,Hg污染程度为中级。4个监测点均受到不同程度的As污染：沙岗（3#）、党江浅水区（1#）、西场（4#）和党江深水区（2#）的污染程度分别属无~中级、中级、中级和中~强级,地积累级别分别为1、2、2和3。【结论】广西合浦廉州湾贝类养殖区的水环境已开始受到重金属污染,应引起重视并加强监控力度。