类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Sonic Hedgehog信号通路表达的初步研究

目的:初步探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和滑膜组织中SonicHedge-hog(Shh)信号通路相关因子表达及意义。方法:收集符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准、28个关节疾病活动度评分(DAS28)≥3.2,病情活动RA患者(35例)及年龄、性别相匹配的健康志愿者(35例)外周血2 mL,分离PBMCs,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Shh信号通路中信号肽Shh、膜受体Ptch1和核转录因子Gli1 mRNA的表达。收集10例病情中度活动(DAS28≥3.2)RA患者的滑膜组织,同时收集5例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达情况。结果:RA患者PBMCs中Shh和Gli1 mRNA的相对表达量分别为1.36±1.48和1.15±0.68,对照组上述信号分子的mRNA表达量分别为0.47±0.25和0.49±0.05,2组差异有统计学意义(P<0.05),Ptch1 mRNA表达在2组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化示Shh和Gli1蛋白表达的阳性细胞百分率均高于对照组(P<0.05),Ptch1蛋白表达阳性细胞百分率2组无显著差异(P>0.05)。结论:RA患者PBMCs与滑膜组织中检测到Shh通路相关信号分子Shh和Gli1的表达上调,提示RA患者中可能存在Shh信号通路的激活,其在RA发病机制中的作用值得进一步研究。

A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响

目的观察来氟米特活性代谢产物A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响。方法 THP-1细胞悬浮生长于含10%胎牛血清的RPM I 1640培养液中。细胞密度达5×105.mL-1时用于实验。THP-1细胞经PMA刺激24 h(诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞)后,细胞进行无血清化处理12 h,继而加入不同剂量的A771726(5、15、45μg/mL),干预24 h。实时荧光定量PCR检测细胞MMP-2、MMP-9mRNA的表达,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的活性。结果细胞经不同浓度的A771726处理后,MMP-2、MMP-9 mRNA表达量均有下降(P<0.01)。中、高剂量的A771726(15、45μg/mL)可降低PMA活化的THP-1细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性(P<0.01)。结论来氟米特活性代谢产物A771726可以降低经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9的表达。

原发性干燥综合征并间质性肺疾病患者细胞因子表达水平及其临床意义

目的观察原发性干燥综合征(pSS)并间质性肺病(ILD)患者细胞因子表达水平,并分析其临床意义。方法选取2017年1月至2019年12月在我院接受治疗的50例pSS患者作为研究对象,并计为pSS组,根据是否合并ILD分为pSS-ILD组(15例)和pSS-n-ILD组(35例),另选择同期在我院进行体检的健康人群作为对照组。分别比较pSS组与对照组,pSS-ILD组与pSS-n-ILD组之间的IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α水平,通过ROC曲线分析IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α水平预测pSS患者并发ILD的效能。结果pSS组患者IL-6、IL-8、TNF-α表达水平显著高于对照组,IL-10表达水平显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。pSS-ILD组患者IL-6、IL-8、TNF-α表达水平显著高于pSS-n-ILD组,IL-10表达水平显著低于pSS-n-ILD组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析得出,IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α的AUC分别为0.667、0.712、0.894、0.733,其中IL-10的AUC最大(0.894),灵敏度为87.54%,特异度为78.63%,截断值为5.162 pg/mL。结论血清IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α细胞因子与pSS患者并发ILD关系密切,可能参与了pSS的患者ILD的发生与发展过程,临床上需引起重视。

广东汉族类风湿关节炎患者肿瘤坏死因子α启动子区单核苷酸多态性与肿瘤坏死因子α拮抗剂疗效的关系

目的探讨广东汉族类风湿关节炎(RA)患者肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因启动子区单核苷酸多态性(SNPs)与TNF-α拮抗剂疗效的关系。方法以100例健康志愿者为对照组,以54倒RA患者为RA组。RA组中24列接受英夫利西单抗3 mg·kg^(-1),分别于wk 0、2、6给药;30例接受阿达木单抗40 mg或80 mg,每2 wk皮下注射1次,疗程12 wk,所有患者继续服用原剂量的甲氯蝶呤(MTX)。记录治疗前和治疗后wk 10(英夫利西单抗)或wk 12(阿达木单抗)的相关临床指标,疾病的活动度用28关节计数的疾病活动评分(DAS28)进行评价,DAS28的变化作为主要临床疗效指标。对TNF-α启动子区约1 300 bp的片段进行直接基因测序,分析RA患者TNF-α基因的基因型与TNF-α拮抗剂临床疗效之间的关系。结果与对照组相比,RA组SNPs位点rs1799724(-857C/T)等位基因T频率较高,差异有显著意义(P<0.05),而rs 1799964(-1031C/T)和rs 1800630(-863A/C)位点在RA组和对照组之间的基因型频率分布未发现显著差异。RA组中,rs 1799724(-857C/T)携带T等位基因的患者较携带C等位基因的患者在接受TNF-α抑制剂治疗后DAS28改善更显著(P<0.05)。结论在广东汉族人群中,TNFα的启动子区的rs 1799724.(-857C/T)可能是RA的一种遗传易感标记;携带-857T的RA患者对TNF-α拮抗剂临床治疗效果优于携带-857C者。

英夫利西单抗对类风湿关节炎患者外周血单核细胞CD147表达的影响

目的探讨抗肿瘤坏死因子-α人鼠嵌合单克隆抗体英夫利西单抗（infliximab）治疗前后类风湿关节炎（RA）患者外周血单核细胞CD147表达的变化。方法30例经甲氨蝶呤（MTX）治疗至少3个月病情仍处于活动期的RA患者按3：1：1比例由计算机程序产生随机分配方案分为A、B、C3组，A组接受为期14周的英夫利西单抗（3mg／kg）治疗；B组接受为期6周的英夫利西单抗（3mg／kg）治疗；C组接受为期14周的安慰剂治疗。治疗期间继续口服原剂量的MTX。流式细胞术检测RA患者外周血CD14^＋核细胞CD147平均荧光强度水平（MFI）变化，并观察其与临床相关指标的关系。数据采用SPSS13．0软件进行单因素方差分析、Spearman相关分析和Kruskal—Wallis秩和检验。结果①治疗前RA患者外周血CD14^＋核细胞CD147MFI为（101±25），健康志愿者为（78±18），差异有统计学意义（P=0．019）。RA患者外周血CD147MFI与病情活动指标DAS28（r=0．471，P=-0．000）、红细胞沉降率（ESR）（r=0．371，P=0．000）、C反应蛋白（CRP）（r=0．249，P=0．010）、晨僵持续时间（r=0．279，P=0．010）呈正相关。②3组患者治疗后外周血CD14^＋核细胞CD147MFI均有下降，第18周与基线相比，A组平均改变差值（-26．9±21．7）、B组平均改变差值（-35．4±15．5）与C组平均改变差值（-10．0±6．0）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论活动期RA患者外周血CD14^＋．核细胞CD147表达增高；与单用MTX相比，英夫利西单抗联合MTX治疗CD147MFI表达下降更明显。

尼美舒利治疗类风湿关节炎和骨关节炎上市后安全性再评价

目的评价尼美舒利片治疗类风湿关节炎(RA)和骨关节炎(OA)的有效性和安全性。方法符合入组标准且不符合排除标准的RA和OA病人共140例(其中男性56人,女性84人),口服尼美舒利片0.1g,每日2次,疗程为30d。对RA病人,观察指标包括休息痛、晨僵、28个关节肿胀关节数及指数、28个关节压痛关节数及指数、健康状况问卷、病人及医师对目前疾病状况的评估;对OA病人膝关节活动痛、膝关节压痛指数、日常活动能力、病人及医师对目前疾病状况的评估。观察药物使用期间出现的临床和实验室不良反应。结果意向性(ITT)分析、符合方案(PP)分析的综合疗效评价总有效率分别为80.0%和86.2%。脱落10例,脱落率为7.1%。主要临床不良反应为消化道不良反应(15/140,10.7%),表现为恶心、腹胀和上腹痛。肝功能异常发生率为3.6%(5/140),4例转氨酶治疗前正常、治疗后异常,1例转氨酶治疗前异常、治疗后异常加重。其中原肝功能正常者中有2例病人用药后转氨酶异常超过正常的3倍以上,最高ALT达593U·L-1。结论尼美舒利治疗RA和OA有效,但在使用过程中应密切关注其所致肝损害可能性。

来氟米特活性代谢产物抑制人单核细胞系细胞CD147基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9表达的研究

目的观察来氟米特活性代谢产物（A771726）对豆蔻佛波醇乙±（PMA）诱导的人单核细胞系（THP-1）细胞CDl47、基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9表达的影响。方法THP-1细胞悬浮生长于含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液中，细胞密度达5±107ml时用于实验。细胞无血清化处理12h后，加入PMA和（或）不同剂量的A771726（5、15、45±g／m1），培养24h，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞CDl47、MMP-2及MMP-9mRNA的表达，流式细胞术检测细胞表面CDl47的表达，明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的活性。多个样本均数比较采用单因素方差分析或Kmskal—wallis秩和检验。结果细胞经PMA刺激后CDl47、MMP-2及MMP-9三者表达量均较与空白组有增高（P〈0．01）。A771726干预后，细胞表面CDl47平均荧光强度（MFI）有不同程度的下降，对照组MFI为109．5±3．8，A771726干预组（5、15、45μg／m1）MFl分别为73．3±2．5、64．5±2．3、40．9±2．7（P〈0．01）；不同浓度A771726干预后MMP-2、MMP-9mRNA表达量及细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性与对照组比较均有不同程度的下降（心0．01）。各干预组CDl47mRNA表达量与对照组比较，未见下降（P〉0．05）。结论来氟米特活性代谢产物A771726可以抑制PMA诱导的THP-1细胞CDl47、MMP-2及MMP-9的表达。

系统性红斑狼疮合并妊娠继发重度血小板减少的危险因素分析

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并妊娠继发重度血小板减少(sever thrombocytopenia,STP)的危险因素。方法回顾性分析广西医科大学第七附属医院(梧州市工人医院)2014年1月至2019年12月收治的47例SLE合并妊娠患者的临床资料,应用多因素Logistic回归分析SLE合并妊娠继发STP的危险因素。结果入组的患者中有11例继发STP,其中两组患者在骨髓巨核细胞减少以及血清催乳素(prolactin,PRL)水平差异上有统计学意义(P<0.05),经多因素Logistic回归分析显示,骨髓巨核细胞减少(OR:9.600,95%CI:2.358-39.089)和PRL≥184.46 g/L(OR:5.200,95%CI:1.322-7.940)是SLE合并妊娠继发STP的独立危险因素。结论骨髓巨核细胞减少与血清PRL≥184.46 g/L为SLE合并妊娠患者继发STP的独立危险因素,对于这类患者临床上应给予重视,对于防治不良妊娠结局具有重要意义。

系统性红斑狼疮患者细菌感染与维生素D水平的相关性研究

探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者细菌感染与维生素D水平的相关性。方法 分析2020年7月至2022年1月期间在我院住院或门诊诊疗的120例SLE患者的临床数据,根据患者疾病活动度及是否合并细菌感染,将患者分为四组:A组(活动期并感染),B组(活动期非感染),C组(稳定期并感染),D组(稳定期非感染),每组各30例。分别于第0、4、8周注射维生素D2注射液40万u,对四组病例相关检测指标的变化进行纵向对比分析。结果 A组与B组比较, 25-OH-D,25-OH-D2、25-OH-D3、白细胞、中性粒细胞差异有显著性(P<0.01),hs-CRP有统计学意义(P<0.05)。C组与D组比较,25-OH-D,25-OH-D2、25-OH-D3有统计学差异(P<0.05)。通过Speaman 分析,活动期患者中,血清25(OH)D 与补体C3(r=0.325)、C4(r=0.287)有显著相关性(均P<0.01)。结论 SLE患者25-OH-D水平与病情活动、合并细菌感染相关,临床上可常规检测25-OH-D作为了解是否容易受感染的指标之一。