salusin-β在麻醉大鼠头端延髓腹外侧区的心血管效应

目的在SD大鼠头端延髓腹外侧区(rostral ventrolateral medulla,RVLM)内给予salusin-β,探究其对大鼠心率(heart rate,HR)和血压(blood pressure,BP)的影响。方法雄性SD大鼠32只,随机分为5组,单侧RVLM微量给予谷氨酸(L-glutamic acid,Glu)、人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,a CSF)或不同剂量的salusin-β(0.04、0.4、4pmol),监测salusin-β对SD大鼠HR和BP的影响。结果大鼠RVLM微量给予a CSF不影响麻醉大鼠的BP 1±1mm Hg,给予Glu血压升高显著10±1mm Hg(P<0.05)。RVLM微量给予salusin-β(0.04、0.4、4pmol)均产生升高血压的作用,且呈剂量依赖性(0.04pmol:6±1mm Hg,P>0.05;0.4pmol:12±1mm Hg,P<0.05;4pmol:29±3mm Hg,P<0.05),且4pmol组与Glu组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。但salusin-β对心率无明显影响。结论 salusin-β在SD大鼠RVLM产生剂量依赖性升高BP的作用,但对HR无明显影响。

结核分枝杆菌培养滤液蛋白21(CFP21)的基因克隆、表达及纯化

目的构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白21(Culture filtrate protein 21,CFP21)原核表达载体,获得CFP21蛋白。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,PCR扩增cfp21基因,质粒PET28a(+)为表达载体,构建PET28a(+)/cfp21质粒,转化入大肠埃希菌DH5α中,抽提质粒,PCR扩增,测序,转化到大肠埃希菌BL21中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,并用His Bind蛋白纯化试剂盒纯化CFP21。结果构建、表达和纯化了CFP21,分子量约为24kD,主要以包涵体形式存在。结论目的基因克隆入宿主菌中并表达成功,纯化得到CFP21蛋白,为CFP21的进一步研究奠定基础。

化学发光法与放射免疫法测定甲状腺激素的相关性研究

目的:比较化学发光法(CLIA)与放射免疫法(RIA)测定甲状腺激素结果的相关性。方法:收集甲亢、甲减患者和正常健康人标本共224份,每份标本同时用RIA和CLIA测定三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH),检测结果进行统计学分析。结果:T3及TSH呈偏态分布,CLIA检测FT4水平明显高于RIA法检测(P<0.05),但两者在诊断患者高、中、低水平上的阳性率间无明显差异(P>0.05)。两种检测方法明显相关(P<0.05),且检测结果异常率之间无统计学意义(P>0.05)。结论:RIA和CLIA方法高度相关,建议采用CLIA检测甲状腺激素。

Centaur CP检测前列腺特异性抗原的临床应用研究

目的探讨总前列腺特异性抗原(tPSA)、复合前列腺特异性抗原(cPSA)及cPSA/tPSA比值在前列腺癌(PCa)诊断中的应用价值。方法选取中国人民解放军第一医院确诊的PCa患者73例、前列腺良性增生(BPH)患者76例及健康对照70例。采用西门子化学发光Advia Centaur CP检测各组tPSA、cPSA及c/t比值。结果 PCa组的tPSA、cPSA及c/t比值显著高于BPH组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示tPSA截断值为19.89μg/L,cPSA截断值为13.14μg/L时,区分PCa和BPH的灵敏度分别可达94.5%、95.9%,特异度分别为97.9%、91.8%,曲线下最大面积为0.96、0.98,尤登指数为0.924、0.877;χ2检验显示tPSA、cPSA与病理诊断结果无相关性(χ2分别为102.036、151.409,P<0.05)。结论 tPSA、cPSA的水平分别达到19.89μg/L和13.14μg/L时应高度怀疑患者为PCa或PCa治疗后复发,应及时进行治疗。

时间分辨免疫分析检测乙型肝炎病毒的临床评价

目的与酶联免疫吸附试验(ELISA)法比较,对时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)定量检测乙型肝炎病毒标志物血清学指标[表面抗原(HBSAg)、表面抗体(HBSAb)、e抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)]进行临床评价。方法采用TRFIA法和ELISA对56份临床标本同时测定,比较2种方法测定结果的差异和相关性。结果 TRFIA检测HBSAg、HBSAb、HBeAb和HBcAb的结果分别为0.80、4.80、0.20、0.90mIU/mL,ELISA检测结果分别为0.20、0.27、1.00±0.72、0.83。TRFIA检测乙型肝炎病毒(HBV)4项血清学指标的阳性率均为100.0%,ELISA检测HBV相应指标的阳性率分别为96.2%、93.3%、100.0%、100.0%,经配对资料χ2检验,2种测定方法测定HBsAb时差异有统计学意义(P<0.05)。2种方法检测结果有相关性,Kappa一致性检验表明2种检测方法检测结果具有一致性(P<0.05)。结论 TRFIA对乙肝的临床诊断和疗效观察提供了可靠的实验依据,是一种理想的定量检测方法。

儿童过敏性紫癜消化道出血相关血清标志物分析

目的分析儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发生消化道出血的血清学相关危险因素。方法纳入148例HSP患儿,77例腹痛患儿。以白细胞计数(WBC)、中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值、中性粒细胞与淋巴细胞的比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及血沉为研究指标,应用SPSS21.0统计分析软件进行数据处理,采用Logistic回归及受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,简称ROC曲线)分析血清学标志物与过敏性紫癜消化道出血的相关性。结果 (1)HSP组白细胞计数、中性粒细胞绝对值、血小板、NLR较对照组升高,淋巴细胞绝对值较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);(2)HSP消化道出血组白细胞计数、中性粒细胞绝对值、NLR和CRP较非消化道出血组明显升高,淋巴细胞绝对值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)HSP患儿临床评分与血清标志物白细胞计数(r=0.344,P<0.001)、中性粒细胞绝对计数(r=0.405,P<0.001)、NLR(r=0.364,P<0.001)、血小板计数(r=0.185,P=0.024)及CRP(r=0.258,P=0.002)呈显著正相关;(4)经Logistic逐步回归分析仅CRP及NLR为过敏性紫癜消化道出血的独立相关因素;(5)根据ROC曲线下面积结果,与NLR相比,CRP是过敏性紫癜消化道出血的潜在的更有效的预测指标。结论 CRP>7.25 mg/L及NLR>3.43可作为预测儿童过敏性紫癜消化道出血的简易血清标志物,临床工作中应受到重视。

胃癌相关血浆环状RNA的筛选及其母基因在胃癌组织中表达的生物信息学研究

目的筛选胃癌相关血浆差异表达的环状RNA(circRNA)基因,验证初筛circRNA在胃癌患者血浆中的表达,并通过生物信息学方法分析其母基因在胃癌组织中的表达和临床意义。方法采用circRNA基因芯片技术,获取circRNA在胃癌患者和正常体检者血浆中的表达谱,筛选出胃癌患者与正常体检者之间差异表达2倍以上的circRNA;通过生物信息学方法,筛选候选circRNA基因,分析前10个circRNA对应母基因中在胃癌组织和癌旁组织之间差异表达倍数大于2倍的母基因[睾丸表达10基因(TEX10)、硫酸肝素蛋白多糖2(HSPG2)、微管蛋白ε和δ复合物1(TEDC1)、整合素亚单位β4(ITGB4)、ADP核糖基化因子GTPase激活蛋白1(ARFGAP1)]在胃癌组织中的表达,以及在不同增殖阶段、不同分化程度、有无幽门螺杆菌(Hp)感染、不同淋巴结转移、不同临床病理组织亚型患者胃癌组织与癌旁正常组织间的差异表达。结果通过分析胃癌患者血浆相关circRNA表达谱,共发现566种circRNA在胃癌患者和正常体检者血浆中的表达水平存在显著性差异(P<0.05),其中68种circRNA表达水平差异超过2倍。通过生物信息学分析,最终筛选得到20个候选circRNA基因。母基因TEX10、HSPG2、TEDC1、ITGB4、ARFGAP1在胃癌组织中明显上调表达(P<0.001),在不同增殖阶段、不同分化程度、有无Hp感染、不同淋巴结转移、不同临床病理组织亚型患者胃癌组织与癌旁正常组织中的表达均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论成功构建了胃癌相关血浆circRNA表达谱,并初步筛选出在胃癌患者血浆中差异表达的20个circRNA基因;血浆中升高的hsa_circ_0087773、hsa_circ_0010697、hsa_circ_0033634、hsa_circ_0045686、hsa_circ_0061150所对应的母基因TEX10、HSPG2、TEDC1、ITGB4、ARFGAP1在胃癌组织中亦上调表达,这对胃癌的诊断和预后评估具有一定的临床价值。

单孔腹腔镜与传统多孔腹腔镜胆囊切除术疗效比较的Meta分析

目的系统评价单孔腹腔镜与传统多孔腹腔镜胆囊切除术比较的有效性及安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、he Cochrane Library(2013年第1期)、CBM、CNKI、VIP及WanFang Data等数据库,查找比较单孔腹腔镜与传统多孔腹腔镜胆囊切除术的随机对照试验,检索时限均从建库至2013年1月1日。按Cochrane系统评价方法筛选文献、提取资料并评价质量后,采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。结果最终纳入17个研究,共1 233例患者。Meta分析结果显示:相比传统多孔腹腔镜,单孔腹腔镜组的术后24 h疼痛程度更轻[SMD=–0.40,95%CI(–0.76,–0.04),P=0.03],且具有更高的术后美容评分[SMD=1.56,95%CI(0.70,2.43),P=0.000 4],但手术时间较长[MD=13.11,95%CI(7.06,19.16),P<0.000 1]。两组患者术后6 h疼痛程度、术后并发症、术后切口疝发生率及留院时间无明显差异。结论单孔腹腔镜胆囊切除术应用于胆囊良性疾病治疗是安全有效的,且其较传统多孔腹腔镜胆囊切除术有一定优势,值得临床应用。

CFP21-ELISPOT方法的建立及其在结核分枝杆菌感染诊断中的应用

目的用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)评价检测CFP21蛋白在结核分枝杆菌感染中的诊断效果,同时,比较CFP21、CFP10和ESAT6的应用价值。方法取28例临床确诊结核患者和26例健康志愿者外周血,分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用CFP21、CFP10和ESAT6蛋白刺激,定量检测PBMC分泌的特异性γ干扰素(IFN-γ)水平,判断结核分枝杆菌感染情况。用ELISA检测血清抗结核抗体。结果 ELISA检测结核病患者血清结核抗体阳性率为57.1%;以CFP21、CFP10和ESAT6为抗原,用ELISPOT方法检测结核病患者IFN-γ阳性率分别为25.0%、39.3%和32.1%。结论应用CFP21蛋白作为抗原建立的ELISPOT方法有潜在的临床应用价值,但CFP21作为抗原用于结核分枝杆菌感染诊断的敏感性低于CFP10和ESAT6。

脓毒症大鼠血清肝肾功及心肌酶谱的变化及意义

目的观察脓毒症大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的变化特点并探讨其意义。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(n=9)和盲肠穿刺结扎(CLP)组(n=27),CLP组根据术后取材时间不同分为6、12和24 h 3个亚组(n=9)。假手术组仅翻动盲肠,CLP组以CLP术制作脓毒症模型,于造模后6 h、12 h及24 h处死大鼠,取血清标本,检测血清ALT、BUN、Cr、CK和LDH水平。结果与假手术组比较,大鼠血清ALT、BUN、Cr、CK及LDH水平变化均随时间延长逐渐升高,12 h时均达到最高水平,24 h时均开始下降,但仍高于假手术组(P<0.05)。结论脓毒症大鼠血清中ALT、BUN、Cr、CK和LDH随时间依赖性改变,与脓毒症的病情严重程度密切相关,提示CLP术后大鼠肝、心、肾功能逐渐受损,12 h功能障碍最显著,12 h后器官可能已发生不可逆病变。

结核分枝杆菌培养滤液蛋白免疫学特性及应用研究进展

结核分枝杆菌培养滤液蛋白(CFP)是结核分枝杆菌培养上清中的分泌蛋白,在结核感染动物模型中能促进保护性免疫的产生,能刺激免疫细胞高效分泌IFN-γ等细胞因子。本文就其组成、生物学和免疫学特性及其在临床诊断和疫苗研制的应用前景做一综述。

脓毒症大鼠体内内源性salusin-β的分布

目的探讨内源性salusin-β在脓毒症大鼠脾、胃、小肠、下丘脑组织及血清中的分布及含量变化。方法雄性SD大鼠36只,采用单纯随机抽样的方法随机分为假手术组(n=9)和脓毒症模型组(简称"模型组",n=27)。假手术组仅翻动盲肠,模型组以盲肠结扎穿刺术(CLP)制作脓毒症模型,于造模后6 h、12 h及24 h时分别处死9只大鼠,取脾、胃、小肠及下丘脑,并留取血清标本。采用酶联免疫吸附试验测定salusin-β含量。结果 1假手术组大鼠脾、胃、小肠、下丘脑及血清中均含有一定量salusin-β,且脾组织中的含量最高,明显高于其他组织(P<0.05)。2与假手术组比较,模型组CLP后6 h时大鼠脾、小肠、胃及血清中salusin-β水平开始升高且有统计学意义(P<0.05),其中脾组织和血清中在12 h时达最高,小肠组织中在24 h时达最高;胃组织中无明显变化;下丘脑组织中salusin-β水平虽在术后6 h时开始升高,仅在12 h时有统计学意义(P<0.05)。结论脓毒症大鼠体内salusin-β含量随时间依赖性改变,提示salusin-β可能与脓毒症有一定的关系。

腹腔镜胆囊切除术后可吸收生物夹排异致黄疸1例报道

病例资料 患者,男,39岁,因“发现胆囊结石6年余,偶伴右上腹疼痛”入院。入院时无皮肤、黏膜及巩膜黄染。查体：右上腹轻压痛,无反跳痛,肝脾肋下未触及,Murphy征阴性。入院后行各项相关检查未见明显异常,无手术禁忌,遂在全身麻醉下行腹腔镜胆囊切除术,手术顺利,术后给予抗炎、补液等对症支持治疗。术后病理报告：（胆囊）慢性炎症改变。患者于术后第3 d出院。

暴饮暴食致急性胃扩张并胃坏死破裂1例报道

病例资料患者,女,43岁,因＂突发上腹部剧烈疼痛2 d＂入院。患者于入院前48 h进食大量食物及碳酸饮料后出现上腹部饱胀,伴恶心、呕吐,呕吐物为胃内容物,当地医院给予对症治疗,症状无明显缓解。入院前24 h突然出现剧烈难以忍受的腹痛,并伴有严重的腹胀而来我院就诊。查体：体温40.3℃,心率128次/min,呼吸35次/min,血压85/50 mm Hg（1 mm Hg=0.133 k Pa）。

甲磺酸阿帕替尼治疗进展期胃癌1例并文献复习

胃癌是第四常见的恶性肿瘤,是癌症相关死亡的第二大原因,严重影响全球健康。我国是胃癌的高发国家,胃癌患者占全世界胃癌患者的40%左右,且大部分患者发现时就处于进展期[1-2]。甲磺酸阿帕替尼(Apatinib)是一种新的血管内皮生长因子受体(VEGFR)小分子抑制剂,可以选择性靶向VEGFR-2[3],作为晚期胃癌的三线治疗选择已经取得了可靠的结果。本院胃肠外科收治1例进展期胃癌患者,接受阿帕替尼联合放、化疗后预后良好,现报道如下。