腹膜后脂肪肉瘤研究现状和困境

肉瘤是一类间叶组织来源的高度异质性罕见恶性肿瘤,可发生于任何组织学部位,占比在所有恶性肿瘤中不到1%[1]。腹膜后肉瘤是指原发于腹膜后间隙的间叶组织来源肉瘤,主要包括脂肪肉瘤(liposarcoma,LPS)、平滑肌肉瘤、多形性未分化肉瘤和恶性外周神经鞘瘤等。最常见的腹膜后肉瘤为高分化脂肪肉瘤(well-differentiated liposarcoma,WDLPS)/去分化脂肪肉瘤(de-differentiated liposarcoma,DDLPS)[2]。腹膜后有一个很大的潜在空间,腹膜后脂肪肉瘤(retroperitoneal liposarcoma,RLPS)更易形成巨大肿瘤,侵犯多个器官。

靶向人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶多肽药物表达载体的构建

目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶(IN)表达载体用于双分子荧光互补技术筛选多肽药物。方法PCR扩增HIV-1 IN的全长基因序列,将目的片段插入至pBiFc-VN173载体中,并对重组质粒pBiFc-VN173-IN进行双酶切及测序鉴定。将重组质粒pBiFc-VN173-IN和对照组质粒pBiFc-VN173分别转染HEK293T细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法检测IN的表达。结果通过高保真PCR、载体构建和鉴定,成功获得IN表达载体pBiFc-VN173-IN。与对照组相比,通过Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法证实转染质粒pBiFc-VN173-IN载体的HEK293T细胞表达IN。结论成功构建了IN表达载体,该载体可用于和IN相互作用的多肽药物的双分子荧光互补技术筛选。

稳定过表达幼虫巨大致死基因2(LLGL2)的食管鳞癌细胞系的建立

目的构建人幼虫巨大致死基因2(LLGL2)慢病毒表达载体,并建立稳定表达的人食管鳞癌KYSE450细胞系和TE-1细胞系。方法 PCR扩增人LLGL2全长基因序列,连接插入至pCDH-CMV-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒载体中,并对重组质粒进行双酶切及测序验证。将重组质粒pCDH-CMV-LLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro和PHR、水疱性口炎病毒G蛋白(VSVG)共转染HEK293T细胞进行病毒包装,利用该病毒液感染KYSE450细胞和TE-1细胞。经嘌呤霉素筛选建立LLGL2稳定过表达的KYSE450细胞系和TE-1细胞系,用Western blot法检测LLGL2的表达情况。结果双酶切和测序分析,成功构建pCDH-CMVLLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒表达载体质粒。Western blot法检测结果显示,与对照组相比,感染病毒液的细胞LLGL2蛋白水平明显增高。结论成功建立了稳定过表达LLGL2基因的KYSE450细胞系和TE-1细胞系。

上皮干细胞参与肿瘤恶变的机制

上皮干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,在维持上皮稳定中起到关键作用。随着研究不断深入,发现上皮干细胞可作为上皮肿瘤发生的起始细胞,上皮干细胞恶变不仅受干细胞微环境影响,它还与多条信号通路失调及基因突变相关。但上皮干细胞如何恶变为肿瘤的具体机制依旧不清楚。本文就上皮干细胞和肿瘤干细胞两者的联系以及上皮干细胞恶变为肿瘤的作用机制进行阐述。