活性炭除浊对低度白酒香气的影响

活性炭吸附法是低度白酒除浊的主要方法之一。从酒的理化指标、香气物质组成和感官评定3个方面,对活性炭处理的用量和处理时间对低度白酒香气的影响进行了研究评价。利用顶空固相微萃取与气质联用相结合的方法对酒样中的香气物质组成进行了分析。结果表明,活性炭处理用量为3 g/L,处理36 h的低度白酒可以达到很好的除浊效果,白酒的香气物质如己酸乙酯、乙酸乙酯、丁酸乙酯等损失小,而且棕榈酸乙酯和油酸乙酯的量明显减少。酒的感官评定为清澈透明,香气宜人,醇和爽口,入口甘洌。

血浆高分子量激肽原在内毒素血症中的作用

目的研究高分子量激肽原(HK)在内毒素血症中的作用。方法将内毒素(LPS)经腹腔内注射于小鼠,观察和比较野生型小鼠和血浆HK缺陷小鼠生存率的表型,应用ELISA检测和比较二者血浆中缓激肽(BK)和炎症因子浓度,应用实时PCR检测和比较二者白细胞炎症因子mRNA水平,制作肺组织石蜡病理切片,通过HE染色观察肺组织的病理变化。结果野生型小鼠在注射LPS后3 h,血浆缓激肽含量明显增高,说明LPS在体内可导致高分子量激肽原的裂解。在LPS注射4 h后,HK缺陷小鼠血浆炎症因子水平较野生型小鼠显著降低,HK缺陷小鼠白细胞炎症因子mRNA水平明显降低。野生型小鼠的肺组织间质增生明显,纤维细胞增多,炎性细胞浸润明显,血管扩张,提示炎性较强,而HK缺陷小鼠无明显病理变化。结论血浆高分子量激肽原在内毒素介导的炎症反应中具有重要的调控作用。

肺泡上皮细胞平足蛋白参与调控内毒素介导的急性肺损伤

目的:研究肺泡上皮细胞的平足蛋白(podoplanin, PDPN)在急性肺损伤中的作用。方法:将内毒素(lipopolysaccharide, LPS)经气管内滴注于小鼠肺部造成急性肺损伤,观察并比较野生型小鼠和上皮细胞PDPN敲除小鼠肺组织的病理变化及肺泡灌洗液中的炎性指标。结果:野生型小鼠在滴注LPS 6 h 后,肺泡上皮细胞PDPN含量明显增高,说明LPS 在体内可诱导PDPN的表达。在LPS 滴注24 h 后,PDPN 敲除小鼠的肺组织炎症反应明显,肺微血管充血扩张,肺间质增生严重,肺间质和肺泡内有大量炎症细胞浸润,而野生型小鼠则无明显病理变化。与野生型小鼠相比,PDPN敲除小鼠支气管肺泡灌洗液中的蛋白含量及总细胞数明显升高,肺组织髓过氧化物酶活性也显著增高。提示肺泡上皮细胞PDPN基因的缺陷加剧内毒素所致的急性肺损伤。结论:肺泡上皮细胞PDPN在内毒素介导的急性肺损伤中具有重要的调控作用。

CRISPR/Cas9技术构建的ITGA2B c.2659C>T(p.Q887X)无义突变的血小板无力症小鼠模型对血小板功能的影响

目的:用CRISPR/Cas9技术构建稳定表达的ITGA2B c.2659C>T (p.Q887X)无义突变的血小板无力症小鼠模型,并对其血小板膜表面糖蛋白αIIbβ3的功能做进一步研究。方法:根据ITGA2B基因信息设计并合成针对c.2659C位置的供体寡核苷酸和g RNA载体并进行体外转录。将g RNA和Cas9 m RNA与供体寡核苷酸共注射到受精卵,并送回到代孕鼠输卵管中。鼠出生后进行PCR基因分型和序列分析,获得阳性F0鼠。阳性F0鼠分别与野生型鼠配繁一代,获得经PCR和测序验证的F1代杂合型点突变GT小鼠,而后F1代小鼠通过彼此交配得到纯合型点突变GT小鼠以及对照组WT小鼠。通过检测小鼠鼠尾出血时间和隐静脉出血时间、血小板聚集功能、血小板表面αIIbβ3的表达和功能,对该小鼠模型的表型进一步验证。结果:小鼠鼠尾出血实验表明,GT小鼠割尾后的出血时间较WT小鼠明显延长(P<0.01)。小鼠隐静脉出血实验与鼠尾出血实验结果一致,即割断隐静脉后,GT小鼠的出血时间较WT小鼠明显延长(P<0.01)。在胶原、凝血酶、二磷酸腺苷诱导的血小板聚集实验中,GT小鼠血小板聚集率较WT小鼠有明显降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05),表明GT小鼠血小板聚集功能受到明显抑制。流式结果显示,GT小鼠血小板表面αIIbβ3的表达量较WT小鼠明显下降(P<0.01),在凝血酶刺激后,诱导活化的血小板与纤维蛋白原的结合量较WT小鼠明显减少(P<0.01)。纤维蛋白原铺展实验结果显示,GT小鼠的血小板在纤维蛋白原上的铺展面积较WT小鼠显著缩小(P<0.05)。结论:应用CRISPR/Cas9技术成功建立了ITGA2B c.2659C>T (p.Q887X)无义突变的GT小鼠模型。该小鼠模型血小板聚集功能缺陷,符合血小板无力症的表现。

雌激素与铁在骨吸收中的拮抗效应及其机制

目的 了解骨代谢过程中雌激素与铁对于骨吸收的拮抗效应及氧化应激在其中的作用.方法 建立高铁小鼠模型,随机分为去势组（OVX）、高铁去势组（F＋OVX）和高铁组（F）.检测血清铁蛋白及氧化应激水平,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测胫骨骨吸收相关基因表达,股骨远端Micro-CT分析.离体实验中用铁剂和雌二醇（E2）干预RAW264.7细胞,观察破骨细胞分化及胞内活性氧物质（ROS）水平.结果 F组与F＋OVX组铁蛋白含量明显升高,分别为（335.3±44.1）μg/L比（41.4±5.6）μg/L,（324.8±38.6） μg/L比（41.4±5.6） μg/L,均P＜0.01;血清丙二醛（MDA）趋势：F＋ OVX组＞OVX组＞F组,超氧化物歧化酶（SOD）趋势与之相反.Micro-CT分析,较之OVX组,F＋ OVX组骨量下降（0.11 ±0.01）mg/mm3比（0.19±0.03）mg/mm^3;F组较F＋OVX组骨量上升（0.90±0.06） mg/mm^3比（0.11±0.01）mg/mm^3,均P ＜0.05;PCR结果,F＋OVX组酒石酸抗酸性磷酸酶（TRAP）及细胞分裂素（CTK）表达较OVX组升高,F组TRAP、转运蛋白（CTR）及CTK表达较F＋ OVX组下降;TRAP染色显示铁剂干预后破骨细胞数量增加（41.7±5.5）比（20.0 ±4.0）,P＜0.05,ROS水平升高（160％±8％）比（100％±9％）,P＜0.05,在此基础上以E2干预后破骨细胞数量下降（14.8±5.1）比（41.7±5.5）,P＜0.05,ROS水平下降（53％±13％）比（160％±8％）,P＜0.05.结论 雌激素与铁对骨吸收存在一定的拮抗效应,该效应可能是通过两者对ROS的调控实现的.