毛脉酸模无菌苗的制备及下胚轴愈伤组织诱导的研究

目的:建立制备毛脉酸模无菌苗及下胚轴愈伤组织诱导方法。方法:通过摩擦种皮、种子浸泡时间、消毒次数、消毒剂种类、消毒时间以及种子贮存时间等因素研究对种子发芽的影响,探讨建立无菌苗培养体系的最佳方法;以获得的无菌苗的下胚轴为外植体,通过在MS基本培养基中附加6-BA和2,4-D两种激素不同配比筛选诱导愈伤组织的最优培养基配方。结果:制备毛脉酸模无菌苗的方法为:挑选粒大饱满的新种子,120目砂纸摩擦种皮,蒸馏水浸泡24h,75%酒精中浸2min,无菌水冲洗3次,10%NaClO溶液处理10min,无菌水冲洗5次,将其放置在有两层湿润的无菌滤纸的培养皿中10h,再进行第2次消毒,10%NaClO溶液处理8min,无菌水冲洗5次,在无激素的MS培养基中培养即可获得大量无菌苗;下胚轴愈伤组织诱导的最优培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+1.7mg/L 2,4-D。结论:建立了毛脉酸模无菌苗培养体系,得到下胚轴愈伤组织诱导的最优培养基,为将来进一步研究奠定基础。

毛脉酸模的组织培养及植株再生

以毛脉酸模下胚轴和幼苗根茎为外植体,以MS为基本培养基,与不同浓度比例的6-BA和2,4-D等植物生长调节剂进行毛脉酸模组织培养的研究。结果表明,毛脉酸模幼苗根茎是诱导丛生芽的最佳材料,诱导丛生芽产生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1,诱导率为81.2%;生根培养基为无激素的MS培养基,生根率可达92%,在此条件下生根迅速,可获得完整植株;组培苗经过炼苗移栽后成活率可达80%。

毛脉酸模愈伤组织诱导及生物活性成分分析

目的:建立诱导毛脉酸模愈伤组织的培养方法。方法:比较不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导;采用高效液相色谱法,比较愈伤组织与幼苗中7种指标成分的含量差异。结果:子叶诱导产生的愈伤组织出愈早,量多,增殖快,颜色鲜艳,有生命活力,利于继代培养和进一步进行悬浮细胞的培养;子叶在2号培养基(MS+6-BA 3.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L)中诱导状况良好,愈伤组织诱导率高,并且愈伤组织生长速度快,愈伤组织为黄绿色,比较疏松,有利于愈伤组织进一步的悬浮细胞培养;愈伤组织中多数化学成分的峰面积较大,所测的7种生物活性成分中,愈伤组织中的白藜芦醇苷和白藜芦醇的含量低于幼苗根,其余5种成分含量均高于幼苗根,尤其是在愈伤组织中检测到了少量的酸模素成分。结论:子叶为诱导愈伤组织的外植体,2号培养基(MS+6-BA 3.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L)为诱导愈伤组织的最适培养基;愈伤组织含有幼苗根中的全部化学成分,有5种化学成分的含量高于幼苗根,而且还测得有少量酸模素的存在。