EGTA对‘秦冠’苹果花粉管Ca^(2+)、微丝分布以及囊泡运输的影响

【目的】研究Ca^(2+)螯合剂EGTA对花粉萌发和生长过程中花粉管形态、Ca^(2+)分布、细胞骨架和胞内运输的影响。【方法】以Ca^(2+)螯合剂EGTA处理‘秦冠’苹果成熟花粉,显微镜观察其对花粉萌发、花粉管生长的影响。运用免疫荧光标记技术结合荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察花粉管内Ca^(2+)分布、微丝分布和囊泡运输模式。【结果】发现低浓度的EGTA对花粉萌发和花粉管生长影响很小,甚至有促进作用。用较高浓度的EGTA处理花粉后,花粉萌发和花粉管生长均受到明显抑制,花粉粒甚至不萌发,花粉管有扭曲膨大短小等现象。用400μmol/L EGTA处理花粉后,花粉管顶端钙离子内流稍有增加,用2mmol/L EGTA处理后,花粉管顶端钙离子交换被抑制。用400μmol/L EGTA处理后,花粉管内游离Ca^(2+)在花粉管顶端聚集并呈现浓度梯度分布,与对照的分布模式一致,而用2mmol/L EGTA处理后顶端聚集模式消失。对照和400μmol/L EGTA处理后花粉管内微丝与花粉管生长方向平行排列,而用2 mmol/L EGTA处理后花粉管内微丝断裂、丝状结构不明显,无序分布在花粉管内。对照花粉管内囊泡运输在顶端以及近顶端区域聚集,用400μmol/L EGTA处理后分布模式变化不大,而用2mmol/L EGTA处理后,囊泡运输增加,布满整个花粉管内。【结论】钙可能作为一种信号因子,通过影响细胞骨架的构成和胞内囊泡的运输模式,从而调节苹果花粉的萌发及花粉管生长。

板栗花粉液体培养方法的建立

【目的】为了优化板栗花粉的液体培养体系,研究蔗糖、硼酸和氯化钙的浓度等因素对花粉萌发率的影响。【方法】以‘燕红’为材料,在蔗糖、硼酸、氯化钙单因子试验的基础上,采用正交试验设计筛选板栗花粉液体培养的最适条件。【结果】研究结果表明:最终筛选的板栗花粉最适液体培养条件为:15%蔗糖、0.005%硼酸和0.04%氯化钙,最适pH值为6.5,培养温度为34℃,转速为175r/min。在此条件下,保存一年的花粉萌发率仍可达到28.86%。【结论】说明板栗花粉的萌发率受培养基组分、pH、转速和培养温度等条件影响。