从“气凝血泣”探析芍药汤治疗溃疡性结肠炎的机制与思路

“气凝血泣”理论首见于《症因脉治》,意为毒邪聚于大肠,气机凝滞,血行不畅,积滞与损伤之血相互搏结,胶着难解。溃疡性结肠炎的关键病机是湿热毒邪胶着肠壁,肠脂膜血络损伤。芍药汤具有调气和血,清热燥湿的功效,对于溃疡性结肠炎有显著疗效。文章从“气凝血泣”角度出发,探析芍药汤治疗溃疡性结肠炎的机制与思路,以期为芍药汤治疗溃疡性结肠炎的临床治疗及基础研究提供基础伦理支撑。

1030例结直肠癌流行病学及中医证型特征分析

目的:探究湖南省局部地区结直肠癌患者流行病学及中医证型特征。方法:以2012年01月01日—2022年12月31日于湖南中医药大学第一附属医院就诊且经组织病理学确诊为结直肠癌的患者为研究对象,对患者基本信息、初次就诊主诉、临床病理结果以及中医证型进行统计学分析。结果:结直肠癌患者男616例,女414例,男发病率大于女;患病率高的年龄50~69岁,不同年龄段结直肠癌患者就诊率差异有统计学意义;首发症状以腹痛、排便习惯改变、便血常见;直肠癌462例,结肠癌568例;组织学分型以管状腺癌为主,病变分化程度以中分化为主;血清癌胚抗原(CEA)联合糖类抗原199(CA199)检测阳性检出率大于单项阳性检出率;中医证型以瘀毒内阻证最为多见,各证型分布差异具有统计学意义,且证型分布与患者年龄相关。结论:近年来,结直肠癌发病就诊人数整体呈现上升趋势,且男性多于女性,发病人群年龄以50~60岁以上多见,以管状腺癌、中分化为主,中医证型以瘀毒内阻证多见。因此,应逐步完善结直肠癌三级预防措施,采取联合筛查方式,提高早诊率,降低病死率。

芍药汤通过PPARγ调控TGF-β1/Smads信号通路对溃疡性结肠炎湿热内蕴证肠纤维化上皮间质转化的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ介导TGF-β1/Smads信号通路调控上皮间质转化在溃疡性结肠炎肠纤维化中的作用及芍药汤的干预机制。方法采用复合病因造模建立溃疡性结肠炎湿热内蕴证大鼠模型。将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组(美沙拉嗪0.42 g/kg)和芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g/kg),给药组分别予相应药物灌胃14 d。末次给药后24 h观察大鼠一般状况及结肠损伤情况,免疫组化染色检测结肠组织白细胞介素(IL)-6、IL-10、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白表达,Western blot检测结肠组织PPARγ、转化生长因子(TGF)-β1、p-Smad蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜损伤严重,结肠组织IL-6、α-SMA、TGF-β1、p-Smad蛋白表达明显升高(P<0.01),IL-10、E-钙黏蛋白、PPARγ蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组结肠黏膜损伤明显减轻,结肠组织IL-6、α-SMA、TGF-β1、p-Smad蛋白表达明显降低(P<0.01),IL-10、E-钙黏蛋白、PPARγ蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),以芍药汤高剂量组作用最明显。结论芍药汤可减轻溃疡性结肠炎湿热内蕴证大鼠肠纤维化程度,其机制可能与上调结肠组织PPARγ表达,抑制TGF-β1/Smads信号通路,抑制上皮间质转化有关。

基于网络药理学和实验验证探究芍药汤干预溃疡性结肠炎湿热内蕴证作用机制

目的基于网络药理学预测并通过动物实验验证探究芍药汤治疗溃疡性结肠炎(UC)湿热内蕴证的潜在作用机制。方法运用TCMSP、UniProt数据库筛选芍药汤活性成分及相关靶点,利用GEO数据库筛选UC疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点匹配所得交集靶点导入STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,借助Cytoscape3.7.0软件构建药物-化合物-疾病靶点网络。使用R语言对交集基因进行GO及KEGG通路富集分析。建立UC湿热内蕴证大鼠模型并用芍药汤进行干预,对核心靶点及相关通路进行初步验证。对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理学改变,ELISA检测血清炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β含量,Western blot检测结肠组织NF-κBp65、MMP9、STAT3表达,免疫组化法检测结肠组织NF-κBp65表达。结果筛选出芍药汤治疗UC的有效成分141种,作用靶点69个,PPI网络拓扑分析获得10个核心基因,通过GO及KEGG富集分析得到芍药汤干预UC的关键信号通路。动物实验结果表明,芍药汤可降低模型大鼠血清炎症因子IL-6、IL-1β含量,抑制NF-κBp65、MMP9、STAT3表达。结论芍药汤可能通过调控IL-6、IL-1β、MMP9、STAT3等靶点,及干预NF-κB信号通路,治疗UC湿热内蕴证。

基于数据挖掘及网络药理学探究中药复方治疗溃疡性结肠炎的用药规律及机制

目的收集中国知网(CNKI)中2016年1月1日—2021年1月1日有关中药复方治疗溃疡性结肠炎的临床随机对照研究,研究其用药规律,并运用网络药理学方法研究核心药对的作用机制。方法运用统计学方法对符合纳入标准的中药复方进行频数分析、关联规则分析、聚类分析,并应用网络药理学方法研究核心药对黄连-白头翁的干预靶点以及交集基因的基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共纳入中药复方279个,涉及中药208味,高频药物有黄连、白术等,归经以肝经居多;药物四气以寒、温为主;五味以苦辛为主;分类以清热、补虚药居多;得到黄连-白头翁等核心药对20个;潜在治疗成分包括槲皮素、巴马汀、金色草素、β-谷甾醇等,核心靶点为TP53、ESR1、RELA、FOS、JUN、RB1和MAPK1;涉及的生物学过程包括药物反应、金属离子反应、氧化应激反应等;分子信号通路包括脂质代谢、TNF信号通路、IL-17信号通路、Th17细胞分化等。结论中医药治疗溃疡性结肠炎以苦寒降泄为主,并辅以理气、化湿、活血、补虚为法;核心药对黄连-白头翁治疗溃疡性结肠炎可能是通过槲皮素、巴马汀、金色草素、β-谷甾醇等多个成分靶向多个核心靶点,经由多条信号通路介导产生效应。

基于IL-6/STAT3通路探讨芍药汤对溃疡性结肠炎Th17/Treg平衡的调节机制

目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)通路在湿热内蕴证溃疡性结肠炎(UC)辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡中的作用及芍药汤的干预机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.42 g·kg^(-1))、芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g·kg^(-1)),除空白组外,其他各组采用复合病因造模建立湿热内蕴证溃疡性结肠炎模型,各组分别给予生理盐水、美沙拉嗪组、芍药汤低、中、高剂量治疗14 d。末次给药24 h后处死大鼠提取脾脏、结肠组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化(IHC)法检测结肠组织白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;流式细胞术检测脾脏Th17/Treg细胞水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织IL-6、STAT3蛋白水平。结果:与空白组比较,模型组结肠出现充血、糜烂等病变,脾Treg细胞百分比显著降低(P<0.01),Th17细胞百分比显著升高(P<0.01),结肠组织IL-6、STAT3蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组结肠损伤减轻,脾Treg细胞百分比显著升高(P<0.01),Th17细胞百分比显著降低(P<0.01),结肠组织中IL-6、STAT3蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论:芍药汤通过抑制IL-6/STAT3信号通路调节Th17/Treg平衡,进而改善湿热内蕴证UC大鼠的病理损伤,影响其免疫功能。

芍药汤及其加减方治疗溃疡性结肠炎的研究进展

芍药汤由黄连、黄芩、大黄、白芍、当归、木香、槟榔、肉桂,甘草构成。因其具有清热利湿、调气活血功效,后世医家皆推此方为治疗湿热泄痢之主方。现代临床应用中,除芍药汤原方,其加减方亦用于溃疡性结肠炎治疗,并可与其他方剂(痛泄要方、白头翁汤、参苓白术散等)、西药(美沙拉嗪、柳氮磺吡啶、英夫利昔单抗等)、中医针刺或艾灸等特色疗法联用。临床疗效结果显示芍药汤及其加减方能明显降低梅奥内镜(Mayo)评分、结肠黏膜病变(Baron)评分、中医证候积分等疾病评分,改善患者肠道症状效果显著且不良反应少。实验药理学研究显示芍药汤可通过抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)等促炎因子表达,上调白细胞介素-10(IL-10)等抑炎因子来减轻炎症反应;可通过调节炎症信号通路,阻断连环反应,减少细胞凋亡;可通过调节免疫轴平衡、调节免疫蛋白修复异常免疫屏障;可调节肠道菌群平衡、促进肠上皮细胞再生、改善黏膜通透性,从而恢复肠道内环境平衡以达到治疗溃疡性结肠炎的效果;其药物单体黄芩苷、芍药苷、黄连素等可起到抗炎、抗菌、调节代谢等作用。该文就芍药汤治疗溃疡性结肠炎的临床和基础研究进展进行系统综述。

基于LC-MS研究芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠粪便代谢产物的影响

目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)探究芍药汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠的粪便代谢产物的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、芍药汤组(11.1 g·kg^(-1)),除正常组外,采用TNBS诱导UC大鼠模型,除芍药汤组外,各组分别予以生理盐水,均治疗7 d,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数(DAI),采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化法(IHC)检测结肠组织中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-22(IL-22)蛋白表达,采用LC-MS技术检测大鼠粪便样本,并通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)分析数据,对筛人体代谢组数据库(HMDB)数据库及京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库,结合文献筛查,筛选差异代谢物,结合Metabo Analyst 5.0检索,得到通路富集分析。结果:UC大鼠灌胃芍药汤可使DAI评分降低,与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜结构破坏,黏膜下层炎性细胞浸润,结肠组织IL-8蛋白表达水平显著升高(P<0.01),IL-22蛋白表达水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,芍药汤组大鼠结肠损伤减轻,结肠组织IL-8蛋白表达水平显著降低(P<0.01),IL-22蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。经过筛选处理,与模型组比较,芍药汤组共鉴定出15个差异代谢物,代谢物主要涉及通路包括不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢、萜类骨架生物合成、卟啉和叶绿素代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成。结论:芍药汤对UC具有治疗作用,其抗炎作用可能与改善脂质代谢、调节辅因子和维生素代谢、碳水化合物代谢的异常状态有关。

芍药汤通过cAMP/PKA/CREB信号通路调控溃疡性结肠炎水液代谢及肠上皮通透性的作用机制

目的:基于“大肠主津”理论探讨环磷酸腺苷/蛋白激酶A/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)信号通路在溃疡性结肠炎(UC)水液代谢及肠上皮通透性中的作用及芍药汤的干预机制。方法:将60只雄性SD大鼠分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.42 g·kg^(-1))、芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g·kg^(-1)),每组10只。采用复合病因造模法建立UC湿热内蕴证大鼠模型,空白组和模型组分别给予生理盐水灌胃,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪灌胃,芍药汤低、中、高剂量给予对应剂量的芍药汤灌胃,灌胃周期为14 d。观察各组大鼠腹泻评分及粪便含水率变化,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量,免疫组化法检测各组大鼠结肠组织中水通道蛋白(AQP)8、AQP4及肠黏膜通透性相关蛋白ZO-1、Occludin的蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中cAMP、PKA、CREB蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠腹泻评分及粪便含水率显著增高(P<0.01),血浆二胺氧化酶(DAO)、血浆D-乳酸含量显著增高(P<0.01),结肠ZO-1、Occludin、AQP8、AQP4、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量显著降低(P<0.01),结肠ZO-1、Occludin、AQP8、AQP4、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:芍药汤减轻UC腹泻的机制可能是通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路,上调AQPs的表达,增强肠上皮间紧密连接,进而改善结肠水液代谢和肠黏膜通透性。

基于数据挖掘分析中医药治疗溃疡性结肠炎的用药规律

目的:基于数据挖掘技术分析中医药治疗脾虚湿热型溃疡性结肠炎(UC)的用药规律。方法:收集整理2017年6月1日至2022年6月1日在湖南中医药大学第一附属医院肛肠科门诊就诊的脾虚湿热型UC的病案资料,借助Microsoft Office Excel 2016、SPSS 26.0、SPSS Modeler 18软件对处方药物进行频次、关联规则及聚类分析。结果:共纳入处方159首,中药152味,用药频次总计2260次,其中高频药物共24味,排前10位的分别为黄连、党参、白术、蒲公英、陈皮、黄芪、当归、白芍、生地黄、木香。功效以清热、补虚为主,性味以寒、温、平性及甘、苦、辛味为主,多归脾、胃、肝、肺、大肠经。高频药物关联规则分析得到7对常用药对,其中党参-黄连支持度最高。聚类分析得到5组药物组合。结论:中医药治疗脾虚湿热型UC以脾胃为中心,注重调达肝经,畅通腑气。遣方用药以健脾清肠为大法,常以清热燥湿、益气健脾为主,注重气血皆调、通因通用,善用风药,体现出“虚实论治,标本兼顾,寒温并用,补泻兼施”的施治特点。