miR-149-3p通过调控NIS促进甲状腺乳头状癌增殖和迁移

目的探讨miR-149通过调控钠/碘共同转运体(Sodium/Iodide Sympoter,NIS)调控甲状腺乳头状癌(Papillary Thyroid Carcinoma,PTC)细胞增殖和迁移能力。方法对选取的GSE113629转录组数据进行数据处理,筛选其中表达差异较为明显且在PTC组织中表达明显增高的MicroRNA(miRNA)作为研究分子。通过在线数据库预测目标miR-NA的下游靶基因,随后检测调控目标miRNA表达后靶基因变化情况并观察靶基因水平改变对甲状腺癌细胞生物学行为的影响。结果在GSE112629数据集中,研究发现miR-149-3p在PTC组织中高表达。通过对miR-149-3p预测靶基因进行维恩分析,我们发现NIS是miR-149-3p的重要靶基因。通过分析GEPIA和UALCAN数据库,我们发现NIS在PTC样本中明显低表达,同时发现PTC的淋巴结转移率越高、分期级别越高则NIS表达量越低,并且NIS表达量与患者无病生存期(Disease Free Survival,DFS)呈正相关。在多种PTC细胞系中miR-149-3p表达水平均高于正常甲状腺细胞系,抑制PTC细胞内miR-149-3p表达后细胞内NIS表达水平明显升高。当敲低miR-149-3p时,细胞的增殖活性和迁移能力受到明显抑制。结论PTC中miR-149-3p高表达,并且miR-149-3p能够通过抑制NIS表达明显增强PTC的增殖活性和迁移能力。

巴弗洛霉素A1抑制胃癌MGC-803细胞增殖及增强奥沙利铂的敏感性

目的探讨巴弗洛霉素A1对抑制胃癌细胞自噬、增殖、侵袭、凋亡和奥沙利铂敏感性的影响。方法将胃癌MGC-803细胞分为空白对照组(Control组)、巴弗洛霉素A1组(BAF组)、奥沙利铂组(OXA组)及巴弗洛霉素A1+奥沙利铂(O+B组)。分别采用MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖活力;Elisa法检测细胞核小体表达水平;Transwell法检测细胞运动能力;扫描电镜、免疫组化及Western blot检测自噬水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果 BAF组与Control组相比自噬水平显著降低,BAF组增殖活力、迁移细胞数及侵袭细胞数显著低于Control组(P=0.000),核小体和Bax表达显著高于Control组(P=0.000),Bcl-2表达低于Control组(P=0.046)。O+B组与OXA组相比自噬水平显著降低,此时O+B组细胞增殖活力、迁移细胞数及侵袭细胞数显著低于OXA组(P=0.000),凋亡率显著高于OXA组(P=0.000),Bcl-2相对表达量显著低于OXA组(P=0.001),Bax相对表达量显著高于OXA组(P=0.000)。结论巴弗洛霉素A1通过抑制自噬能够显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖和运动能力,促进凋亡,而且能增强奥沙利铂的药物敏感性。

桥本氏甲状腺炎差异基因筛选、分析及潜在治疗药物预测

目的通过生物信息学技术筛选出桥本氏甲状腺炎(HT)差异表达基因,对差异基因进行分析得出与HT发生及发展密切相关的基因,并通过核心基因预测潜在的HT治疗药物。方法采用GEO2R在线工具分析HT数据集GSE6339和GSE138198,获取HT差异表达基因。通过Webgestalt数据库分析差异表达基因的生物学过程、细胞成分、分子功能及富集的信号通路,通过String数据库构建HT差异表达基因蛋白互作相关作用(PPI)网络,通过Cytosccape软件MCC算法计算出差异基因中的10个核心基因,通过Genemania数据库构建核心基因分子互作网络并通过药物-基因相互作用数据库(DGIdb)预测HT潜在治疗药物。结果共筛选出74个HT差异表达基因,其中上调基因67个,下调基因7个,生物学功能和信号通路富集分析显示差异表达基因主要富集于T细胞受体复合物中参与免疫相关信号通路。通过String数据库最终得到具58个节点、342条边的PPI网络,检测发现的核心基因间具有共表达、共定位区域,核心基因主要功能为活化免疫细胞。在药物-基因相互作用数据库中发现了3个潜在治疗药物,分别是希普利珠单抗、阿法赛特、依伐利珠单抗。结论HT样本中共有74个差异表达基因;差异表达基因的功能与机体免疫功能相关;核心基因主要功能为活化免疫细胞;希普利珠单抗、阿法赛特、依伐利珠单抗是HT潜在的治疗药物。

自噬水平改变对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨改变胃癌细胞自噬水平对其侵袭转移能力的影响。方法将胃癌SGC-7901细胞分为空白对照组(CON组)、乏氧组(HPX组)及乏氧联合巴弗洛霉素A1(BAF-A1)组(H+B组)。分别采取吖啶橙染色及Western blot检测胃癌细胞自噬水平;Transwell法检测细胞侵袭转移能力;Western blot检测侵袭转移相关蛋白表达情况。结果与CON组相比,HPX组红色荧光量显著增多,Beclin1相对表达量显著增高(P=0.000),侵袭转移细胞数显著增多(P=0.001),E-Cadherin蛋白相对表达量显著降低(P=0.021),MMP-9蛋白相对表达量显著增高(P=0.013);与HPX组相比,H+B组红色荧光量显著减少,Beclin1相对表达量显著降低(P=0.000),侵袭转移细胞数显著减少(P=0.000),ECadherin蛋白相对表达量显著增高(P=0.001),MMP-9蛋白相对表达量显著降低(P=0.001)。结论乏氧状态提高胃癌细胞自噬水平后其侵袭转移能力显著增强,而当其自噬水平被BAF-A1抑制后胃癌细胞的侵袭转移能力显著降低。

甲状腺乳头状癌组织高尔基体磷蛋白3表达的临床病理意义

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)的表达及其与PTC临床病理特征和美国甲状腺协会(ATA)复发风险分级的相关性.方法采用反转录荧光定量PCR(RT-qPCR)检测福建省立医院2017年3月至2018年4月期间手术的30例PTC患者癌组织及相应癌旁组织GOLPH3 mRNA的表达水平.采用免疫组化方法,检测福建省立医院2013年1月至2018年4月期间收治的135例PTC患者癌组织及相应癌旁组织中GOLPH3蛋白的表达,并分析其与临床病理特征及ATA复发风险分级的关系.结果PTC组织GOLPH3的mRNA表达水平高于癌旁组织(7.53±1.32比3.64±1.44,P<0.001).免疫组化结果显示,GOLPH3蛋白在PTC组织中的表达水平高于癌旁组织[66(30,95)比34(20,72),P<0.001].单因素分析结果显示,GOLPH3蛋白表达水平与PTC肿瘤大小(P=0.026)、腺外侵犯(P=0.016)、淋巴结转移(P=0.001)、TNM分期(P=0.027)相关.多因素logistic回归分析结果显示,肿瘤大小(OR=3.58,95%CI:1.19~15.46,P=0.017)和淋巴结转移(OR=7.28,95%CI:2.43~10.08,P=0.002)与GOLPH3表达水平具有独立相关性.GOLPH3表达水平与ATA复发风险分级呈正相关(P=0.041).结论GOLPH3过表达与PTC不良预后相关,检测GOLPH3表达水平有助于判断PTC增殖转移潜能及评估PTC患者的术后复发风险.

Rab23在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨Rab23基因在胃癌组织中的表达水平及其与临床病理、患者预后之间的关系.方法 实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法和Western blot法检测60例新鲜胃癌组织及相应癌旁组织中Rab23 mRNA及蛋白的表达.免疫组织化学检测120例胃癌和正常胃黏膜石蜡组织中Rab23蛋白的表达水平.结果 胃癌组织中RAb23 mRNA（ACt：1.66 ±0.84）及蛋白（0.708 5 ±0.182 2）的表达水平较癌旁组织（ACt：0.59±0.34;0.297 4±0.1297）显著升高（t=9.07、14.24,P＜0.01）.胃癌石蜡组织Rab23蛋白表达阳性率（41.7％,50/120）较正常胃黏膜石蜡组织（18.3％,11/60）显著升高（x2=9.72,P＜0.05）.Rab23蛋白的表达与胃癌患者性别、肿瘤部位等无关（P＞0.05）,而与年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、临床分期有关（P＜0.05）.Rab23蛋白阴性、阳性和强阳性的5年生存率分别是48.6％、12.9％和5.3％（x2=35.49,P＜0.05）.结论 Rab23基因的表达与胃癌的生物学行为密切相关.

经颏颈角入路单孔腔镜甲状腺手术的临床分析

对100例甲状腺肿瘤患者实施经颏颈角入路单孔腔镜甲状腺切除术,所有手术均顺利完成,单侧甲状腺切除术平均手术时间(63±23)min,双侧甲状腺切除术平均手术时间(75±16)min,平均术中出血(30±11)ml,患者恢复良好,无长期手术并发症。