清胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠肾脏AQP4蛋白表达及肾功能的影响

目的 探讨清胰颗粒(QYG)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾脏中水通道蛋白4(AQP4)的表达及肾功能的影响。方法 64只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组、QYG组和地塞米松(DXMS)组;用5%STC逆行胰胆管注射诱导大鼠SAP肾损伤模型;观察肾脏病理变化,比较各组大鼠肾干湿质量比、肾脏系数、血清淀粉酶(AMS)、BUN、Scr、IL-6、TNF-α水平和肾脏中AQP4蛋白表达量。结果 SAP组大鼠肾脏病理评分、血清AMS、BUN、Scr、IL-6、TNF-α水平均较SO组明显升高(P均<0.05),QYG和DXMS治疗能降低SAP大鼠血清BUN、Scr、IL-6和TNF-α表达,肾脏病理损伤减轻,72 h疗效显著,呈时效依赖性。SAP大鼠肾脏中AQP4蛋白表达均较SO组明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);QYG和DXMS治疗下调AQP4蛋白表达,治疗72 h后与SAP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AQP4参与SAP并发肾损伤过程,QYG抑制炎症反应下调AQP4表达对肾脏具有保护作用。

核因子-κB在急性胰腺炎中的激活及NBD多肽的干预作用

目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)及活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)在大鼠SAP发病过程中的作用;并观察NF-κB必需调节蛋白结合域(NF-κB essentiamodifier binding domain,NBD)多肽对大鼠SAP的干预作用.方法:逆行胰胆管内注射50g/L牛磺胆酸钠(1mL/kg)制备大鼠SAP模型.大鼠64只,随机分成4组:假手术组,SAP组,TAT-NBD(WT)多肽组和TAT-NBD(MT)多肽组.术后6,12h处死大鼠,观察胰腺组织病理、血清淀粉酶和胰腺组织NF-κBP65蛋白的变化,检测胰腺组织MDA含量及T-SOD活力.结果:与假手术组比较,SAP模型组6,12h大鼠NF-κBP65蛋白表达显著升高(49.3±2.2 vs 4.3±1.4,65.8±1.8 vs 5.0±1.3,均P<0.05)MDA生成增加(212.7±12.5 vs 87.7±7.5296.8±13.3 vs 96.2±8.3,均P<0.05),T-SOD活力下降(88±10 vs 183±10,65±7 vs 194±10均P<0.05);与SAP模型组比较,TAT-NBD(WT多肽预处理6,12h后,NF-κBP65蛋白表达(25.9±2.3,38.9±2.6)显著降低(P<0.05),MDA生成(102.5±10.4,164.5±12.2)降低(P<0.05)T-SOD活力(153±11,168±12)增加(P<0.05)胰腺病理学评分下降(5.04±0.41 vs 8.71±0.45,5.45±0.34 vs 10.31±1.23,均P<0.05),淀粉酶无明显变化.TAT-NBD(MT)多肽组上述指标均无明显变化.结论:SAP时大鼠胰腺组织的NF-κB过度激活,活性氧簇生成增加;NBD多肽预处理可以抑制NF-κB过度活化,减少活性氧簇生成,减轻胰腺局部炎症损伤.

PTD-NBD多肽对大鼠胰腺腺泡细胞炎症损伤中NF-κB表达的影响

目的:探讨PTD-NBD多肽对体外大鼠胰腺腺泡细胞核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)p65的表达影响.方法:分离培养大鼠胰腺腺泡细胞,分为正常对照组、急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)组和PTD-NBD多肽组,用脂多糖(10mg/L)诱导体外细胞AP模型,分别于建模6和12h观察细胞形态学变化,培养液中淀粉酶(amylase,AMY)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和白介素(interleukin,IL)-1β含量,RT-PCR和免疫印迹法检测细胞中NF-κB p65RNA及其蛋白表达.结果:与对照组相比,AP组各时间点腺泡细胞发生肿胀和死亡增多(细胞形态学评分:6h:8.90±0.34vs1.10±0.13;12h:9.40±0.26vs1.20±0.15,P<0.05),培养液中AMY升高(6h:2135.8±347.2vs873.5±91.6;12h:3299.6±217.7vs917.7±101.9,P<0.05),IL-1β含量升高(6h:84.9±15.7vs39.3±7.9;12h:95.6±17.1vs38.9±5.2,P<0.05),SOD含量降低(6h:116.3±30.3vs176.2±21.6;12h:101.5±25.6vs173.6±27.9,P<0.05),细胞中NF-κB p65RNA及其蛋白表达量增多(P<0.05);与AP组比较,经PAT-NBD多肽预处理后腺泡细胞出现肿胀和死亡减少(细胞形态学评分:6h:6.80±0.23vs8.90±0.34;12h:7.50±0.19vs9.40±0.26,P<0.05),培养液中SOD上升(6h:137.6±27.4vs116.3±30.3;12h:144.3±23.6vs101.5±25.6,P<0.05),AMY下降(6h:1951.5±211.7vs2135.8±347.2;12h:1761.3±231.5vs3299.6±217.7,P<0.05),IL-1β含量明显下降(6h:66.8±11.6vs84.9±15.7;12h:54.8±21.2vs95.6±17.1,P<0.05),NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05).结论:PTD-NBD多肽透过大鼠胰腺腺泡细胞膜抑制脂多糖刺激的NF-κB p65活化及其活性,下调IL-1β表达,上调SOD含量,从而减轻胰腺腺泡细胞的炎症损伤.

粪菌移植与慢性肝脏疾病

成人胃肠道粘膜表面积达到300m2,是人体与外界环境发生相互作用最大的区域.在成人胃肠道中定殖着超过1×1014个微生物.各种不同的环境信号和不同的饮食习惯使肠道微生物群产生大量的代谢产物以及脂多糖/内毒素、胆汁酸、短链脂肪酸、三甲胺等物质.肝脏作为肠道营养物质、

核转录因子检测方法研究进展

基因的转录调控已经成为近年来研究的热点,转录因子在转录调控中扮演着关键的角色,而转录因子的检测是研究其功能的重要前提基础,高效、特异、灵敏、简便的检测方法对于研究转录因子及其调控功能具有重要的作用。针对转录因子的不同水平状况,其检测方法也各有不同。现就转录因子不同状态下的检测方法作一综述。

达克罗宁胶浆联合丙泊酚在胃镜检查中的应用

目的评价达克罗宁胶浆在丙泊酚诱导的无痛胃镜检查过程的作用。方法将我院内镜中心自愿接受无痛胃镜检查的600例患者随机分为A组、B组、C组,评价患者检查的舒适性、胃镜下视野清晰度、检查时间、丙泊酚用量及患者平均动脉压、心率及血氧饱和度等指标。结果 C组舒适性较B组高(P<0.05);B组与C组的胃镜下视野清晰度高于A组(P<0.05),C组高于B组(P<0.05);与A组及B组比较,C组丙泊酚使用量少(P<0.05),检查时间缩短(P<0.05),低氧血症发生率低。结论达克罗宁胶浆能提高无痛胃镜受检者的舒适性,提高胃镜下视野的清晰度,减少丙泊酚的用量,缩短检查时间,降低低氧血症发生风险,值得临床推广使用。

L-精氨酸诱导大鼠急性坏死性胰腺炎模型的建立

目的建立一种简便、典型的大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。方法大鼠腹腔内分两次注射大剂量0.574mmol.L-1(10%)L-精氨酸,注射后3、12、24和36h观察胰腺病理变化、血清淀粉酶和丙二醛水平。结果胰腺病理评分、血清淀粉酶、丙二醛水平在3h开始升高,随后维持在较高的水平。结论腹腔内注射大剂量10%的L-精氨酸能诱导典型的大鼠ANP模型,是值得推广的造模方法。

不同浓度的脂多糖刺激AR42J细胞对NF-κB及ICAM-1表达的影响

目的探讨NF-κB在AP发病过程中对ICAM-1基因的转录调节作用,有助于从基因转录调节的水平寻找AP治疗的新靶点。方法分别设脂多糖(LPS)浓度0.01,0.1,1,10,100 mg/L和空白对照6个组的脂多糖刺激AR42J细胞构建急性胰腺炎的体外模型,每组设3个复孔。逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量法观察细胞间黏附分子(ICAM-1)和p65亚单位mRNA表达的变化;链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(SABC)检测p65蛋白在AR42J细胞中的表达;人工碘比色法观察培养液上清中淀粉酶的活性改变。结果脂多糖刺激后,AR42J细胞以剂量依赖方式上调ICAM-1和p65 mRNA的表达,100 mg/L时达到高峰;ICAM-1与p65表达具有直线相关性(P<0.01)。而p65蛋白亦呈时间依赖方式表达增强,LPS浓度为100 mg/L时表达最强。各组淀粉酶无明显改变(P>0.05)。结论在脂多糖诱导的胰腺腺泡细胞AR42J炎性效应中,NF-κB表达且活性增强,调控着致炎细胞因子ICAM-1表达,与脂多糖的剂量有关,呈剂量依赖性。关键词:脂多糖;急性胰腺炎;细胞间黏附分子;

NBD多肽治疗实验性溃疡性结肠炎的实验研究

目的观察核因子κB必需分子(NF-κB essential modulator,NEMO)结合的小分子多肽(micromolecule polypeptide combining with NEMO-binding domain,NBD多肽)对实验性大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。方法60只SD大鼠随机分成治疗组、对照组各30只,采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法制作溃疡性结肠炎大鼠模型,治疗组予腹腔注射1.3 mg/100 g体质量的NBD多肽,对照组予等量生理盐水,评估炎症活动指数(IAI),给药后7 d处死相应组的动物取结肠,肉眼观察结肠黏膜病变且按损伤情况积分,行病理切片、苏木素伊红(hematoxylin eosin,HE)染色,光镜下评估组织损伤;取病变结肠组织切片行免疫组化检测核因子κB(NF-κB)表达,检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)。结果治疗组大体形态损伤、组织学损伤评分、IAI评分分别为2.41±0.43、4.80±0.82、6.02±0.59,明显低于对照组(3.50±0.51、6.90±1.13、3.05±0.51)(P<0.05);治疗组MDA、MPO及NF-κB表达均低于对照组(P<0.05)。结论NBD多肽对于溃疡性结肠炎大鼠模型有较好的治疗作用,其作用与其抑制NF-κB表达有关。

代谢综合征与大肠腺瘤相关性研究

目的:研究代谢综合征(MS)及炎症因子hsCRP水平与大肠腺瘤的相关性。方法:选取2010-01-01—2010-06-01所有接受肠镜检查的住院患者。排除既往有肠切除、息肉切除、5年内有接受肠镜检查史、恶性肿瘤史、慢性炎症性肠病史的患者,选取肠镜检查结果为大肠腺瘤及正常者为入选病例,所有研究对象均检查其FBS、TG、HDL、收缩压/舒张压、腰围、hs-CRP,进行大肠腺瘤组及正常对照组组间各临床参数的比较;对检测指标进行大肠腺瘤发病的多因素Logistic回归分析。结果:年龄≥50岁及hsCRP水平增高与大肠腺瘤发病相关(OR(95%CI)分别为1.943(1.009-3.742);18.373(3.674-91.866)),而MS及其组分与大肠腺瘤发病不相关。结论:我们的观察发现MS及其组分与大肠腺瘤发病不相关;年龄≥50岁及hsCRP水平增高增加了大肠腺瘤风险,我们需要对这些患者进行大肠镜检查以发现大肠腺瘤。

L-精氨酸制备大鼠急性轻症胰腺炎模型的研究

目的建立一种操作简单、病变典型、稳定性好的大鼠急性轻症胰腺炎模型。方法大鼠腹腔内分次剂量L-精氨酸注射（3×1g／kg）。注射后6、12、24、48、72h观察血清淀粉酶水平、胰腺病理学改变厦胰腺组织湿／干质量比值的变化。空白对照组以生理盐水代替，6h时处死。结果注射L-精氨酸6h后大鼠即出现典型的急性轻症胰腺炎病理改变，24h达高峰，48h出现少量胰腺细胞坏死，72h病变减轻；胰腺组织湿／干质量比值变化、病理评分呈时相性变化。血清淀粉酶6h时显著增高，24h达高峰，为对照组的3—4倍，72h接近正常水平。结论分次剂量L-精氨酸腹腔内注射诱导的大鼠胰腺炎症改变符合急性轻症胰腺炎病理学的改变，是值得推广的动物模型．

PTD-NBD多肽对大鼠胰腺腺泡细胞炎性反应的抑制作用

目的:探讨透细胞性PTD-NBD多肽对脂多糖诱导的炎性效应的干预与作用机制.方法:以脂多糖刺激大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,构建急性胰腺炎的体外模型.不同浓度免疫缺陷性病毒PTD多肽蛋白转导功能区与野生型NBD多肽融合成PTD-NBD多肽,对AR42J细胞进行预处理,突变型PTD-NBD(MT)多肽、PTD、NBD为对照.RT-PCR法观察ICAM-1及IL-1βmRNA的表达;定量酶联免疫吸附法检测培养液上清中IL-1β蛋白浓度的改变.结果:透细胞性PTD-NBD多肽可以抑制脂多糖诱导的AR42J炎症细胞因子ICAM-1和IL-1βmRNA及蛋白的表达,且呈剂量依赖方式.PTD-NBD(WT)多肽与单纯NBD多肽、突变型PTD-NBD(MT)多肽及PTD组比较(相对灰度值:0.449±0.088vs1.132±0.069,1.158±0.095,1.206±0.078),能够抑制ICAM-1mRNA表达.上述4组的IL-1βmRNA相对灰度值分别为0.526±0.077,0.993±0.065,1.143±0.086和1.128±0.117,IL-1β蛋白表达分别为278.82±61.80ng/L、898.08±74.65ng/L、945.25±42.49ng/L和947.86±38.66ng/L,结果显示后3组不能抑制IL-1βmRNA及其蛋白的表达.结论:PTD-NBD(WT)多肽可以呈剂量依赖方式抑制LPS诱导的AR42J促炎细胞因子IL-1β和ICAM-1的表达,其可直接影响胰腺腺泡细胞炎性反应.

网络环境下循证PBL教学法在内科学教学中的应用

探讨结合循证医学和网络的EN-PBL教学法在内科学教学中的应用。通过对临床医学专业两个本科班级作EN-PBL教学和LBL教学的比较,发现短期内两组成绩无统计学差异,而中远期的主客观比较则EN-PBL教学组明显优于后者。提示EN-PBL教学法可能更适合国内的教学环境。

胰性脑病大鼠血脑屏障通透性改变的机制研究

目的探讨胰性脑病(Pancreatic Encephalopathy,PE)大鼠血脑屏障(Blood brain Barrier,BBB)通透性变化及其意义。方法 40只Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分成假手术(Sham-operation,SO)组和PE组。逆行胰胆管注射5%的牛黄胆酸钠构建PE模型。伊文思蓝(Evans Blue,EB)测定血脑屏障通透性;HE染色观察胰腺和脑组织病理变化。Elisa法检测脑组织中TNF-α和LI-1含量,比色法检测血清SOD和MDA含量。结果 PE大鼠脑内EB含量及其胰腺和脑病理评分均升高,血清SOD下降而MDA则升高,脑组织中TNF-α和IL-1含量升高,与SO组比较有统计学意义;相关分析发现脑内EB含量与脑组织病理评分及TNF-α和IL-1含量均呈正相关。结论 PE大鼠的BBB通透性升高并与脑损伤正相关,我们推测氧化应激和炎症反应参与破坏BBB的完整性从而诱发PE发病。

网络机能虚拟实验室在生理学PBL教学中的应用研究

生理学是一门理论性较强的医学基础课程,知识抽象难懂。实践证明,将网络机能虚拟实验室应用于生理学PBL教学中可有效提高教学效果;对活跃课堂教学、知识掌握及能力培养方面均有不同程度的促进作用。

低钠血症在肝硬化腹水中的临床意义

目的探讨低钠血症对肝硬化肝功能失代偿期腹水患者的影响。方法 69例肝硬化肝腹水合并低钠血症患者,按低钠发生的不同程度进行分组：1轻度组：血清钠为130-135 mmol/L,41例;2中度组：血清钠为125-129 mmol/L,17例;3重度组,血清钠为〈125 mmol/L,11例。观察其与肝功能分级、腹水治疗效果以及预后的关系。结果在肝功能障碍程度分级（Child-Pugh分级）构成C级比例、肝性脑病发生率、肝肾综合征发生率及腹水疗效方面,中度组患者与轻度组患者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;重度组Child-Pugh分级构成C级比例高达63.64%,显著高于轻度组和中度组的34.15%与29.41%;重度组肝性脑病比例为45.45%显著高于轻度组和中度组的17.03%与17.65%;重度组肝肾综合征比例为36.36%显著高于轻度组和中度组的14.63%与11.76%;重度组腹水易消退比例为18.18%,显著低于轻度组和中度组的80.49%与64.71%;重度组死亡率为54.55%显著高于轻度组和中度组的2.44%与17.64%,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论低钠血症同肝硬化腹水患者本身的肝功能Child-Pugh分级、肝性脑病发生情况以及腹水治疗所产生的效果具有极为紧密的关系,尤其是针对重度低血钠症患者而言,具有较高的病死率。

亮蓝嵴联合血清胃蛋白酶原对胃粘膜肠上皮化生的诊断价值

目的探讨亮蓝嵴(light blue crest LBC)联合血清胃蛋白酶原(serum pepsinogen s PG)对胃粘膜肠上皮化生的诊断价值。方法采用回顾性研究方法对2015年6月—2016年9月在该院门诊及住院已行NBI-ME检查的142例并确诊为慢性胃炎的患者进行检查,根据窄带成像放大内镜(narrow band imaging-magnifying endoscopy NBI-ME)检查是否观察到LBC及血清胃蛋白酶原I(serum pepsinogen I s PGI)是否下降,分为4组,分别为LBC(+)-s PG(+),LBC(+)-s PG(-),LBC(-)-s PG(+),LBC(-)-s PG(-)。以病理标准评估上述4组肠上皮化生的活检预测率,比较LBC联合s PG与单独用LBC预测肠上皮化生阳性率的差异性。结果经LBC(+)-s PG(+)检出胃粘膜肠上皮化生率显著高于LBC(+)-s PG(-)组(96.36%vs 31.25%,P<0.05),LBC(+)-s PG(+)组肠上皮化生的检出率显著高于LBC(+)组(96.36%VS 81.69%,P<0.05);经LBC(+)-s PG(-)组检出胃粘膜肠上皮化率显著高于LBC(-)-s PG(+)组(31.25%vs 12.90%,P<0.05);LBC(-)-s PG(+)组与LBC(-)-s PG(-)组检出率差异无统计学意义(12.90%vs 7.50%,P>0.05)。结论亮蓝嵴联合血清胃蛋白酶原可提高胃粘膜肠上皮化生的检出率,可作为一种联合检查手段向临床推广。