猪捷申病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法的建立

为建立一种快速且灵敏的猪捷申病毒(PTV)的检测方法,本研究根据登录于GenBank数据库的所有PTV毒株基因组序列信息,在其5'端非编码区的保守区域设计引物,经过一系列的试验测试和验证建立了能够广泛用于检测PTV的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法。该方法特异性强,对除PTV外的其他常见猪病毒性病原的DNA或cDNA均无特异性的扩增。此外,该方法的敏感性高、重复性好,灵敏度能达到38.3 copiesμ/L,组内和组间变异系数均不超过2%。对临床样品的检测结果显示,本研究建立的荧光定量RT-PCR方法的PTV检出率为68.18%,远高于普通RT-PCR的PTV检出率(22.73%)。