西伯利亚鲟和鲫鱼脑型一氧化氮合酶cDNA片段克隆及序列分析

实验根据脑型一氧化氮合酶氨基酸高度保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR方法扩增并克隆了西伯利亚鲟(Acipenser baeri)和鲫鱼(Carassius auratus)的脑型一氧化氮合酶cDNA片段。西伯利亚鲟cD-NA片段为356 bp,鲫鱼cDNA片段为377 bp。氨基酸序列同源分析发现,西伯利亚鲟与斑马鱼(Brachydaniorerio)的脑型一氧化氮合酶同源性为70%,鲫鱼与斑马鱼的同源性为97.6%。

转生长激素基因中华倒刺鲃的构建及其检测

用从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)cDNA文库克隆到的生长激素基因,与鲤β肌蛋白启动子、大麻哈鱼生长激素基因的poly(A)终止信号序列等调控元件共同构建了表达重组质粒pFV2 cfGH。提取重组质粒,用精子载体法导入中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)的受精卵中,经孵化培养成转基因成鱼。抽提423尾转基因实验鱼血总DNA,经PCR检测表明:斑点叉尾鮰生长激素基因已导入中华倒刺鲃基因组中,导入率为17.26%。同时通过RT-PCR技术检测阳性中华倒刺鲃中生长激素基因的表达情况。

大口鲶病原菌蛭弧菌的分离及其生物学特性研究

从患病南方大口鲶分离得到病原菌N1、N2、N3、N4,以N3为宿主菌,从鱼塘淤泥中分离到三株蛭弧菌。其中蛭弧菌Bd-tw7的宿主菌范围广泛,不仅能降解嗜水气单胞菌、N1、N2、N3、N4等鱼类病原菌,而且能降解大肠杆菌C600、金黄色葡萄球菌等细菌。其在1/10NB双层琼脂平板上形成圆形透明的噬菌斑,最适温度35℃,最适pH为7.5,短杆状,单极生鞭毛。在水体防病试验中,试验组的鱼存活率明显高于对照组(P<0.05)。

中华倒刺鲃血清凝集素的研究

从中华倒刺鱼巴(Spinibarbus sinensis)血清分离到一种天然的凝集素,能够凝集多种不同的抗原物质,其组成成分为糖蛋白,具有耐热和耐酸碱性,对β-巯基乙醇敏感。凝集反应受温度、PBS离子浓度以及时间等因素的影响。经糖的专一性抑制实验显示,蔗糖和乳糖对凝集反应有抑制作用,说明这2种糖分子是凝集素在识别和凝集过程中起一定作用的糖分子。

大口鲇抗菌相关蛋白的初步研究

对健康大口鲇皮肤分泌液蛋白组分进行了分析，SDS-PAGE电泳表明其中有17种蛋白质．用饱和硫酸铵分级沉淀法发现在20％～50％的饱和度之间沉淀出来的蛋白有抗菌活性．该抗菌蛋白对G^＋和G^-菌有广谱抗菌活性，在pH5～8范围内稳定，并且在100℃下作用10min后活性依然稳定．同时检测了患病大口鲇重要组织提取液的抗菌活性，为进一步研究健康大口鲇抗菌蛋白奠定了基础．

南方鲇血清凝集素的研究

从南方鲇(Silurusmeridionalis)血清分离到一种天然的凝集素分子,能够凝集多种不同的抗原物质,其组成成分为糖蛋白,具有耐热和耐酸碱性,对β-巯基乙醇敏感。凝集反应受温度、离子强度以及时间等因素的影响。经糖的专一性抑制实验显示,蔗糖和半乳糖对凝集反应有抑制作用,说明这2种糖分子是凝集素在识别和凝集过程中起一定作用的糖分子。

鲤亚目几种名优鱼的随机扩增多态性DNA分析

采用OPA、OPC和OPM三组共60条随机引物对鲤亚目的七种名优鱼和一种杂交品种进行了随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,对其中35个引物的扩增条带进行了统计,计算了它们之间的遗传相似率和遗传距离.在此基础上,利用UPGMA聚类分析建立了它们之间的亲缘关系,结果与传统分类是一致的,并且将杂交品种与纯种区分开来.实验还初步筛选了7种鱼的RAPD分子标记,探讨了用RAPD技术来鉴定名优鱼应用的可行性.

中华倒刺鲃血清凝集素对细菌凝集作用的观察报告

随着水产养殖业的繁荣，水污染加剧，养殖鱼类频频发生各种疾病，因此研究鱼类抗菌相关的特别是非特异性免疫因子，已成为世界研究热点。目前研究的鱼类抗菌相关因子主要包括：凝集素、抗菌肽、干扰素、补体、白细胞介素、溶菌酶、转铁蛋白、鱼精蛋白、金属硫蛋白、免疫球蛋白等等。