双氢青蒿素减轻慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺损伤

目的 探究双氢青蒿素(DHA)抑制白细胞介素(IL)-6/信号传导及转录激活因子(STAT)3信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎性反应和肺损伤的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组、COPD组、低、高剂量DHA(L-DHA、H-DHA)组及中和IL-6组,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性因子[IL-6、IL-1β、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;计数BALF中细胞总数及炎性细胞分类[嗜酸性粒细胞(Eos)、中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)]数;HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变;Western blot检测肺组织中IL-6/STAT3信号通路蛋白表达水平。结果 与对照组比较,COPD组BALF中IL-6、IL-1β、IL-17、TNF-α水平及细胞总数,Eos、Neu、Lym细胞数增加(P<0.05);肺组织发生明显病理改变,且肺组织中IL-6蛋白及STAT3磷酸化水平增加(P<0.05),经L-DHA、H-DHA、中和IL-6干预后上述情况改善(P<0.05)。结论 DHA能够减轻COPD模型大鼠气道炎性反应和肺组织损伤,可能与抑制IL-6/STAT3信号通路有关。

LncRNA CDKN2BAS通过调控miR-627-3p影响肺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的机制

目的探讨LncRNA CDKN2BAS对肺癌细胞NCI-H1299增殖、凋亡和放射敏感性的影响及其分子机制。方法选取42例肺癌组织及相应癌旁组织;体外培养人正常肺支气管上皮细胞和肺癌细胞系;将NCI-H1299细胞分为NC组、si-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS组、miR-NC组、miR-627-3p组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-627-3p组;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA CDKN2BAS、miR-627-3p mRNA相对表达水平;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;克隆形成实验检测放射敏感性;Western印迹检测相关蛋白的表达;双荧光素酶报告实验检测LncRNA CDKN2BAS和miR-627-3p的靶向关系。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中LncRNA CDKN2BAS mRNA表达明显升高,miR-627-3p mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与BEAS-2B细胞比较,肺癌细胞NCI-H1299、NCI-H2170、PNCI-H1975中LncRNA CDKN2BAS表达明显升高,miR-627-3p表达明显降低(P<0.05);低表达LncRNA CDKN2BAS或高表达miR-627-3p明显抑制NCI-H1299细胞增殖能力,明显促进了细胞凋亡和放射敏感性(P<0.05)。LncRNA CDKN2BAS靶向调控miR-627-3p表达(P<0.05),且下调miR-627-3p表达明显逆转低表达LncRNA CDKN2BAS对NCI-H1299细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响。结论LncRNA CDKN2BAS通过靶向miR-627-3p调控NCI-H1299细胞的增殖、凋亡和放射敏感性。

circRNA001653对急性心肌梗死心肌细胞凋亡的作用及机制

目的探讨环状RNA(circRNA)_001653(circ_001653)对急性心肌梗死(AMI)心肌细胞凋亡的作用及机制。方法采用生物信息学分析AMI时差异表达的circRNA;大鼠心肌细胞分别培养于常氧(Normoxia组)和缺氧12 h(Hypoxia 12 h组)、24 h(Hypoxia 24 h组)、48 h(Hypoxia 48 h组)条件下,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测上述4组细胞中circ_001653、微小RNA(microRNA)-324-5p、ELAV样RNA结合蛋白1(ELAVL1)的表达;选取缺氧48 h的心肌细胞转染sh-NC(sh-NC组)、sh-circ_001653(sh-circ_001653组)、circ-NC(circ-NC组)、circ_001653(circ_001653组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-324-5p mimic(miR-324-5p mimic组)、circ_001653+miR-NC(circ_001653+miR-NC组)、circ_001653+miR-324-5p mimic(circ_001653+miR-324-5p mimic组)、miR-324-5p mimic+pcDNA3.1(miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组)及miR-324-5p mimic+ELAVL1(miR-324-5p mimic+ELAVL1组)等载体,采用比色试剂盒和流式细胞术分别检测Normoxia组、Hypoxia-48 h组、sh-NC组、sh-circ_001653组、circ-NC组、circ_001653组、miR-NC组、miR-324-5p mimic组、circ_001653+miR-NC组、circ_001653+miR-324-5p mimic组、miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组、miR-324-5p mimic+ELAVL1组心肌细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9活性及细胞凋亡水平。结果生物信息学分析结果显示,与正常组比较、circ_001653在AMI中表达增强(P<0.05);与Normoxia组比较,Hypoxia 48 h组细胞中circ_001653和ELAVL1表达升高、miR-324-5p表达降低(P<0.05);与Normoxia组比较,Hypoxia 48 h组细胞凋亡率与Caspase-3、Caspase-9活力均升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-circ_001653组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与circ-NC组比较,circ_001653组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均升高(P<0.05);与circ_001653+miR-NC组比较,circ_001653+miR-324-5p mimic组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-324-5p mimic组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组比较,miR-324-5p mimic+ELAVL1组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力升高(P<0.05)。结论circ_001653可促进AMI心肌细胞凋亡,其机制可能与circ_001653/miR-324-5p/ELAVL1轴作用有关。

125例肺癌患者的组织学类型与临床分析

目的探讨原发性肺癌患者的组织学类型和临床变化特征。方法回顾性分析125例原发性肺癌患者的组织学类型、流行病学和临床特征,测量其淋巴细胞和凝血功能。结果 125例肺癌患者中鳞癌占40.8%,腺癌占44.0%,大细胞癌占1.6%,小细胞癌占10.4%,腺鳞癌占3.2%;右肺肺癌占52.8%,左肺占42.4%;男性80.8%,女性19.2%;发病年龄34~89岁,平均60.8岁;65.6%患者伴有肺外转移,23.2%伴有慢性阻塞性肺疾病（COPD）,13.6%伴有肺部感染;血浆纤维蛋白原（Fib）4.7g/L,高于正常值。结论本组肺癌以鳞癌和腺癌为主,右肺发病率高于左肺,男性明显高于女性,伴发COPD较低,肺外转移发生率高,Fib高于正常水平。

miR-338-3p靶向调控RNF121促进人肺癌A549的增殖及侵袭能力

近期研究表明,miR-338-3p对肺癌的增殖和侵袭具有重要作用,但其通过靶向调控环指蛋白121(ring finger protein 121, RNF121)在肺癌增殖和侵袭中的研究尚不清楚。为探究其机制,体外培养正常肺细胞系MRC-5和非小细胞肺癌系A549,采用qRT-PCR和Western印迹检测发现,A549肺癌细胞较MRC-5细胞中miR-338-3p表达下降,而RNF121表达增加(P<0.05)。通过TargetScan(http://www. targetscan. org/mamm31/)靶基因预测软件预测与RNF121的3′UTR结合的miR-338-3p。双荧光素酶报告证实了两者互补结合。构建靶向干扰RNF121的shRNA载体并转染细胞。CCK8检测各组细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;Transwell实验和细胞集落形成检测各组细胞侵袭和克隆增殖能力;将各组细胞接种于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线并测定瘤体大小;之后获取肿瘤组织通过TUNEL染色检测组织中细胞凋亡情况。结果显示:与Blank组比较,miR-338-3p mimic和sh-RNF121组中细胞增殖、侵袭以及细胞克隆形成能力被抑制但凋亡显著增加。体内实验显示,上述组成瘤能力降低,肿瘤组织中凋亡增强(P<0.05)。而miR-338-3p抑制组中细胞增殖活力、侵袭以及细胞克隆形成能力增强,且凋亡被显著抑制,同时裸鼠成瘤能力提高,肿瘤组织中凋亡减弱(P<0.05)。NC组、miR-338-3p inhibitor+sh-RNF121组部分指标与Blank组比较未见显著性差异(P>0.05)。综上所述,miR-338-3p能够靶向抑制RNF121的表达进而抑制A549细胞的增殖和侵袭,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,RNF121有望成为非小细胞肺癌治疗的新靶点。

临床医学专业“3+2”助理全科医生培养模式的实践教学体系探索与实践

目的探索建设“3+2”助理全科医生培养模式的实践教学体系。方法分析海南医学院2013年编写的临床医学专业“3+2”培养模式教学计划。结果5年共开设8129学时,其中,实践教学5733学时,占总学时的70.53%。结论实践教学在助理全科医生培养中居主体地位,有助于全科医生实践能力的培养。

miR-411在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探究miR-411在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及临床意义。方法收集2017年3月至2018年8月于海南西部中心医院普二科行肺癌根治手术切除的NSCLC组织62例及其相应的癌旁组织,采用Real-time PCR法检测组织中miR-411的mRNA相对表达量。分析miR-411的表达与NSCLC临床病理特征(性别、年龄、有无吸烟史、肿瘤直径、组织学、有无淋巴结转移和TNM分期)的关系,采用Cox比例风险回归模型分析影响预后的因素。结果miR-411在NSCLC组织中表达量为5.58±0.52,在癌旁组织中表达量为1.64±0.38(P<0.05);miR-411表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05);Cox单因素分析显示除miR-411表达外,淋巴结转移和TNM分期,也与OS有关(P<0.05)。结论MiR-411在NSCLC中高表达,miR-411高表达与TNM分期和淋巴结转移有关,miR-411可作为NSCLC诊断和预后的预测新的靶点。

乙酰半胱氨酸联合噻托嗅铵吸入治疗急性加重期COPD疗效及对氧化应激因子和炎症因子的影响

目的:探究乙酰半胱氨酸联合噻托嗅铵吸入治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病(COPD)疗效及对氧化应激因子和炎症因子的影响。方法:纳入2019年1月至2021年1月期间163例COPD急性加重期患者作为研究对象,根据非随机临床同期对照研究分为两组,其中观察组92例采用乙酰半胱氨酸吸入剂联合噻托嗅铵吸入剂治疗,对照组71例采用噻托嗅铵吸入剂治疗。比较两组患者治疗2周后临床疗效,治疗前、治疗2周后肺功能[第1秒用力呼气容积(FEV1)、最大呼气峰流速值(PEF)、肺活量50%时的呼气流速(PEF50)、肺总容量(TLC)]、动脉血气指标[氧饱和度(SaO_(2))、血氧张力(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))、酸碱度(PH)]、血清氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)]及炎症因子[降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]水平变化。结果:治疗2周后,观察临床总有效率高于对照组(P<0.05);两组FEV1、PEF、PEF50、TLC均较治疗前提高,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.05);两组SaO_(2)、PaO_(2)、PH均较治疗前提高,PaCO_(2)均较治疗前降低,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.05);两组血清SOD水平均较治疗前提高,MDA、NO均较治疗前降低,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.05);两组血清hs-CRP、PCT水平均较治疗前降低,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.05)。结论:乙酰半胱氨酸联合噻托嗅铵吸入治疗急性加重期COPD可提高疗效,有效抗氧化、抑制炎症反应。

水蛭素抑制RhoA/Rho激酶信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症反应和纤维化的影响

目的 探讨水蛭素抑制RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应和纤维化的影响。方法 2020年1—6月,将52只清洁级SD大鼠随机数字表法分为造模组(42只)和对照组(10只)。造模组大鼠通过气管内滴注脂多糖(LPS)溶液建立COPD模型,建模后的大鼠随机数字表法分为模型组、水蛭素组(50 U/kg)、ROCK激活剂组[溶血磷脂酸(LPA,40μg/kg)组、水蛭素+LPA组(50 U/kg水蛭素+40μg/kg LPA)],10只/组。药物组和激活剂组分别按照相应剂量进行干预;其余各组给予生理盐水干预。干预结束后,检测各组大鼠肺功能指标-呼气峰值流速(PEF)及0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、用力肺活量比值(FVC);颈总动脉取血,检测血清中炎性因子指标[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;分离肺组织,观察肺组织形态学变化、肺纤维化程度以及RhoA/ROCK信号通路蛋白表达情况。结果 对照组大鼠无肺组织损伤;与对照组PEF(11.21±1.12)V/mL,FEV0.3(31.68±3.24)mL/s,FVC(8.56±0.85)V/mL,IL-1β(65.78±6.66)ng/L,TNF-α(100.32±10.02)ng/L相比,模型组大鼠肺组织损伤及纤维化较为严重,PEF(7.41±0.71)V/mL、FEV0.3(22.42±2.21)mL/s、FVC(4.61±0.46)V/mL较显著降低(P<0.05),而IL-1β(158.63±15.89)ng/L、TNF-α(545.37±54.56)ng/L显著增加,RhoA、Rho激酶1(ROCK1)蛋白表达也增加(P<0.05);与模型组相比,经水蛭素组大鼠肺组织损伤及纤维化程度得到改善,PEF(5.34±0.53)V/mL、FEV0.3(16.15±1.62)mL/s、FVC(8.21±0.82)V/mL较模型组显著增加(P<0.05),而IL-1β(68.72±6.88)ng/L、TNF-α(115.35±11.55)ng/L显著降低,RhoA、ROCK1蛋白表达均显著降低(P<0.05);LPA可减弱水蛭素对COPD大鼠炎症反应和肺纤维化的改善作用(P<0.05)。结论 水蛭素可以降低炎症细胞浸润,改善肺组织损伤和肺纤维化,可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。