脂多糖通过Nrf2信号通路诱导人气道上皮细胞MUC5AC表达

目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在脂多糖(LPS)上调气道黏蛋白5AC(MUC5AC)表达中的作用。方法:LPS干预体外培养的人气道上皮细胞系A549细胞,以诱导MUC5AC表达。分别转染Nrf2小干扰RNA(siRNA)和Nrf2过表达质粒(pcDNA3-Myc3-Nrf2),敲减或过表达A549细胞中的Nrf2,再加入10 mg/L LPS干预24 h,RT-qPCR和Western blot法分别检测细胞MUC5AC、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、Nrf2及其下游抗氧化因子[NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、谷胱甘肽S-转移酶pi(GST-pi)和血红素加氧酶1(HO-1)]的mRNA及蛋白表达情况。结果:(1)LPS上调A549细胞黏蛋白MUC5AC表达(P<0.01),上调Nrf2及其下游抗氧化因子NQO1、GCLC及GST-pi表达,下调HO-1表达(P<0.05)。(2)与阴性对照组相比,转染Nrf2 siRNA能有效抑制A549细胞Nrf2的表达;敲减Nrf2的A549细胞经LPS干预后,MUC5AC的表达显著增加(P<0.05)。(3)与对照组相比,转染过表达质粒pcDNA3-Myc3-Nrf2明显增加A549细胞Nrf2的表达;增强Nrf2表达后,LPS诱导的MUC5AC表达被抑制(P<0.05)。结论:Nrf2信号通路参与调控LPS诱导的气道上皮细胞MUC5AC表达。