西洋参抗心脏肥大的网络药理学分析和实验验证研究

目的:通过网络药理学探讨西洋参多成分、多靶点、多通路的抗心脏肥大作用机制,并选取关键靶点进行细胞实验验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药百科全书(ETCM)、有机小分子生物活性数据库(PubChem)、多靶点定量构效关系的靶点预测平台数据库(Targetnet)、小分子药物靶点预测在线平台(Swiss Target Prediction)等数据库及参考文献筛选西洋参活性成分及作用靶点。通过人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、药物靶标数据库(TTD)及基因名片数据库(GeneCards)筛选心脏肥大相关靶点。将药物的作用靶点与疾病靶点进行交集,获得药物-疾病共同靶点,利用STRING数据库构建PPI网络图,并借助Cytoscape 3.8.0软件进行可视化分析,采用注释、可视化和综合发现(DAVID)数据库对重要靶点进行基因本体(GO)功能与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。进一步采用异丙肾上腺素诱导的H9c2心肌细胞肥大模型,观察西洋参抗心肌细胞肥大作用,逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测关键靶点的基因表达。结果:从西洋参中筛选出42个活性成分,能够作用于41个心脏肥大相关靶点,其中血管内皮生长因子A(VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等21个靶点是关键靶点,主要涉及一氧化氮合成过程的正调控、脂多糖介导的信号通路、肽基-丝氨酸磷酸化的正调控,参与调节癌症蛋白多糖、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路等。进一步细胞实验结果表明,西洋参100.0μg/mL可抑制异丙肾上腺素10μmol/L诱导的心肌细胞肥大(P<0.05)。在异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大模型中,VEGFA、AKT1、EGFR、TNF、MAPK1 mRNA表达上调(P<0.05),西洋参可明显抑制上述关键靶点基因表达上调(P<0.05)。结论:西洋参抗心脏肥大的作用机制可能与下调VEGFA、AKT1、EGFR、TNF、MAPK1等多个靶点的基因表达有关。

基于体外细胞实验和网络药理学研究乳香挥发油抗心脏肥大的作用机制

目的:通过体外细胞实验和网络药理学方法探讨乳香挥发油抗心脏肥大的作用机制。方法:通过异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的H9c2心肌细胞肥大模型研究乳香挥发油抗心脏肥大的作用。通过CNKI、Pubmed、Pubchem等数据平台检索筛选并收集乳香挥发油活性成分、作用靶点及心脏肥大疾病靶点;利用String数据库和Cytoscape 3.8.0软件构建乳香挥发油抗心脏肥大蛋白互作(PPI)网络和乳香挥发油“药物-活性成分-关键靶点-疾病”网络,筛选分析乳香挥发油抗心脏肥大的关键靶点,并采用荧光定量PCR实验进行关键靶点的验证。通过DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。结果:体外细胞实验表明乳香挥发油可抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞表面积增大、蛋白合成增加以及心脏肥大相关胚胎基因心房钠尿肽(ANP)、β-MHC mRNA表达上调。基于文献筛选乳香挥发油有效成分86种,抗心脏肥大靶点36个。网络分析雌激素受体1(ESR1)、内皮型一氧化氮合酶(NOS3)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)是关键靶点,荧光定量PCR结果显示乳香挥发油抑制ISO诱导的心肌细胞ESR1、PTGS2、TNF、MAPK14 mRNA水平上调,NOS3、PPARG mRNA水平下调。GO功能富集分析主要涉及脂多糖介导的信号通路、一氧化氮生物合成过程的正调控、质膜穴样内陷、酶结合等。KEGG通路富集分析包含通路22条,主要与VEGF signaling pathway,TNF signaling pathway,Sphingolipid signaling pathway等相关。结论:乳香挥发油活性成分可能是通过作用于ESR1、NOS3、PTGS2、TNF、MAPK14、PPARG等关键靶点,调节VEGF signaling pathway,TNF signaling pathway,Sphingolipid signaling pathway等途径,影响脂多糖介导的信号通路、一氧化氮生物合成过程的正调控、质膜穴样内陷、酶结合等改善心脏肥大。

遗传算法优化BP神经网络预测股指研究

股票价格受众多不确定性因素影响。为更精准地预测股票指数,首先利用具有良好非线性寻优能力的遗传算法优化BP网络初始权值阈值设置,然后构建一个以开盘价、最高价、最低价、收盘价、成交量、收盘价近5日移动平均线MA等6个输入变量、以下一天6个变量为输出变量的股指预测模型。对观察期内上证综指实证研究表明,经遗传算法优化后的BP网络对股票指数预测平均误差为0.1%,其中成交量预测值比单纯BP神经网络算法误差减少0.71%,同时收敛速度得到提高。

中医治疗卵巢早衰的原理及研究进展

近年来,卵巢早衰发病率逐步升高,国内外对卵巢早衰的治疗也有一定的进展,卵巢早衰是指女性在40岁以前卵巢功能衰竭,出现闭经、不孕等症状,西医目前对卵巢早衰的病因、发病机制尚不明确,对此病也无明确有效的治疗方式,主要治疗方式通过激素替代疗法,此方法有很大的不良作用,因此还需寻求更好的治疗方法。中医对此病有极大的优势,临床上治疗方法多样且不良作用小,此文针对中医治疗卵巢早衰的研究进展进行了综述。

浅析当代名医治疗崩漏的学术特点

崩漏是中医妇科上的疑难重病,也是急症。古代历史上的医家总结崩漏的理论非常完善。大部分基于前人的理论再寻找创新点。崩漏病因病机复杂,难以辨证,夹杂因素较多,但当代也不乏治疗崩漏上有较多经验及思想的名医,让学者在治疗过程中有思路及方法去更好地辨证治疗崩漏。文章总结了当代名医治疗崩漏的学术思想并附病案一则。

胆固醇酯转运蛋白在家兔心脏肥大中表达的实验研究

目的复制异丙肾上腺素致家兔心脏肥大模型,考察胆固醇酯转运蛋白(CETP)的表达变化。方法将雄性新西兰兔随机分为正常组和模型组。模型组采用腹腔注射异丙肾上腺素15 mg/(kg·d)(分早晚2次进行)建立家兔心脏肥大模型,正常组腹腔注射等体积的生理盐水,连续14 d后,取血、心脏和肺脏,分离左、右心室,考察脏器指数;HE染色观察心肌组织形态学改变;RT-PCR法检测心脏肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC mRNA表达;检测血清TG、TC、LDL-C及HDL-C的含量;检测左心室CETP的mRNA水平、蛋白表达及含量。结果与正常组比较,模型组家兔心脏质量指数(HW/BW)和左心室质量指数(LVW/BW)显著增加(P<0.05),右心室质量指数(RVW/BW)和肺脏质量指数(LW/BW)有增加的趋势,左心室心肌细胞体积明显增大,间质增宽,左心室ANP、β-MHC的mRNA表达显著上调(P<0.05)。与正常组比较,模型组家兔血清TG含量显著升高(P<0.05),TC、LDLC水平呈升高趋势,HDL-C水平呈下降趋势,模型组家兔左心室组织中CETP mRNA水平和蛋白表达均显著上调(P<0.05),CETP含量显著增加(P<0.05)。结论在异丙肾上腺素诱导的家兔心脏肥大模型中,CETP表达上调,但其是否与心脏肥大有关还有待进一步深入研究。本研究结果为后续研究CETP与心脏肥大的关系提供了理想动物模型。

肛肠科患者术后尿潴留的护理研究

目的:通过开展调查研究,讨论分析护理干预对于减少肛肠科患者术后尿潴留发生率的重要性。方法:选取本院肛肠科门诊2015年1月~2017年1月的患者100例,随机分为对照组(n=50)和实验组(n=50)。对照组常规护理,实验组将应用针对性预防和整体护理理念到整个护理过程,观察分析患者术后尿潴留的发生率及手术满意程度评价。结果:加强尿潴留护理之后,患者术后尿潴留的发生率降低,手术满意程度评价较对照组提高(P<0.05),结论:加强尿潴留护理在肛肠科日常护理当中的重要性值得关注,理应推行。

浅谈川蜀妇科名家诊治月经过少的学术思想

月经过少是妇科的常见疾病之一,然不同中医妇科流派对其辨证施治的方法皆有不同侧重。笔者主要从川蜀中医流派入手,以川蜀中医妇科代表人物唐宗海、卓雨农、王渭川、刘敏如、杨家林等人为例,详述当代川蜀妇科名家诊治月经过少的临床经验及学术思想。

环境条件对枸杞光合特性影响的研究进展

枸杞是一种耐盐耐旱植物,因其果实艳丽的外表而被作为一种观赏植物.枸杞果实在中医学方面应用广泛,有着良好的养生效果,常可作为中药药材,枸杞也可以当做食物食用,因此枸杞具有较高的经济价值.枸杞光合能力则直接影响枸杞的经济效用,而影响其光合作用的主要因素是环境条件.本文从盐胁迫、水分胁迫、土壤温度以及CO2等方面概述了枸杞光合特性对环境条件的响应,具体分析了枸杞光合气体交换参数、叶绿素荧光动力学参数、光合色素方面在不同环境下受到的影响,盐胁迫抑制枸杞光合作用,且由于枸杞的不同生长发育阶段对盐胁迫的抗性有显著差异,叶绿素含量具有一定的季节动态;外援物质能调节和改变枸杞的抗胁迫能力;气温升高和干旱胁迫的交互作用降低宁夏枸杞净光合速率.在短时间内CO2浓度升高对枸杞光合作用起促进作用,而长期CO2浓度倍增抑制光合速率.在这些研究基础上提出未来研究应关注的问题.

苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的作用研究

目的探究苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法 (1)体外培养大鼠H9c2心肌细胞,采用MTT法评价不同浓度的异丙肾上腺素(0.625、1.25、2.5、5、10μmol·L-1)和不同浓度的苦瓜皂苷L(1.625、3.125、6.25、12.5、25.0μg·mL^(-1))对心肌细胞活力的影响。(2)采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L干预组和苦瓜皂苷L单独组。分别通过细胞拍照结合ImageJ软件测量、荧光定量PCR法考察苦瓜皂苷L 12.5μg·mL^(-1)对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC及α-SKA表达的影响。在此基础上,选择参与甘油磷脂代谢的酶VI组磷脂酶A2(PLA2G6)、二酰甘油激酶ζ(DGKZ)、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1(GPCPD1)为指标,评价苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3种酶基因表达的影响;进一步以PLA2G6和DGKZ蛋白为指标,采用Western Blot法考察苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6和DGKZ蛋白表达的影响。结果 (1)与正常组比较,异丙肾上腺素(0.625~10μmol·L-1)和苦瓜皂苷L(1.625~25μg·mL^(-1))对心肌细胞活力没有明显影响(P>0.05)。本研究选用异丙肾上腺素10μmol·L^(-1)和苦瓜皂苷L 12.5μg·mL^(-1)进行实验。(2)与正常组比较,模型组心肌细胞表面积增加(P<0.05),心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA表达上调(P<0.05),PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA表达上调(P<0.05),PLA2G6和DGKZ蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,苦瓜皂苷L干预组能够降低心肌细胞表面积(P<0.05),下调心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA表达(P<0.05),下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA表达(P<0.05),降低PLA2G6和DGKZ蛋白表达(P<0.05)。结论苦瓜皂苷L可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,可能与其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6和DGKZ的表达有关。

苦瓜素Ⅰ抑制乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星耐药的研究

目的:研究苦瓜素Ⅰ(momordicin Ⅰ,MMI)对人乳腺癌耐多柔比星(doxorubicin,DOX)MCF-7/DOX细胞耐药的影响及其作用机制。方法:MTT比色法检测MMI对MCF-7/DOX细胞的毒性,考察MMI对MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR和western blot方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中MDR1在mRNA和蛋白质水平的表达变化;进一步采用实时定量PCR方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中与甘油磷脂代谢相关的AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等基因表达的变化。结果:MMI(12.5,25,50μg·mL^(-1),)可明显抑制MCF-7/DOX细胞的增殖,MMI对MCF-7/DOX细胞的最大无毒浓度为6.25μg·mL^(-1)。MMI 6.25μg·mL^(-1)与DOX联用后,DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度(IC50)下降,MMI使得MCF-7/DOX细胞对DOX的敏感性提高了13.88倍。与DOX 50μg·mL^(-1)单独组相比,MMI 6.25μg·mL^(-1)与DOX 50μg·mL^(-1)联用后,MCF-7/DOX细胞中的MDR1 mRNA显著下调(P<0.05),MDR1蛋白表达有下降趋势。进一步研究发现MMI 6.25μg·mL^(-1)与DOX 50μg·mL^(-1)联用可协同下调MCF-7/DOX细胞甘油磷脂代谢相关基因AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等表达。结论:MMI可增强乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,抑制MDR1表达,逆转耐药,此作用可能与其抑制甘油磷脂代谢有关。

基于光谱法的陈皮饮片标准汤剂指纹图谱分析

目的:建立陈皮饮片标准汤剂的指纹图谱并对其进行质量评价。方法:制备15批陈皮饮片标准汤剂,采用HPLC测定陈皮饮片标准汤剂中橙皮苷的含量;采用紫外光谱法(UV)和红外光谱法(IR)建立陈皮饮片标准汤剂的指纹图谱;利用相关系数法和双指标序列分析法对不同批次陈皮饮片标准汤剂的光谱图进行比对。结果:15批陈皮饮片标准汤剂中橙皮苷的质量分数0. 82%～2. 60%,出膏率实测值32. 02%～46. 11%;与紫外和红外对照指纹图谱相比,各批次陈皮饮片标准汤剂指纹图谱的相似度分别为> 0. 897和> 0. 942,双指标分析法结果显示各批次陈皮饮片标准汤剂的共有峰率均>62. 50%,变异峰率均<46. 67%。结论:该研究建立的质量评价方法可用于陈皮饮片标准汤剂的系统性评价,可为陈皮配方颗粒等相关制剂的质量标准制定提供参考。

我是不生气的蝶

＂花蝴蝶!花蝴蝶!＂我的耳边又响起了这几个讨厌的字眼,我被气得火冒三丈。气急败坏的我,只好拿起棒子,向他们冲去。机灵的他们,见情况不妙,如同离了弦的箭一般,撒腿就跑,这让身材矮小的我心有余而力不足。

薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导H9c2心肌细胞肥大的保护作用

目的:探究薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的保护作用及潜在作用机制。方法:采用MTT法筛选异丙肾上腺素和薯蓣皂苷的安全浓度范围,明确异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的最佳造模浓度,确定薯蓣皂苷作用于心肌细胞的最大无毒浓度。将心肌细胞分为空白对照组、模型对照(异丙肾上腺素)组、异丙肾上腺素+薯蓣皂苷1.25μg/mL组、薯蓣皂苷1.25μg/mL组,通过细胞拍照结合Image J软件测量心肌细胞面积,qRT-PCR法检测心肌肥大相关胚胎基因Anp、β-mhc、α-ska表达,进一步采用qRT-PCR、Western blot检测心肌细胞甘油磷脂代谢酶Dgkz和Pla2g6 mRNA和蛋白表达。结果:异丙肾上腺素在2.5μmol/L~40μmol/L范围对心肌细胞增殖没有明显影响,选取异丙肾上腺素10μmol/L诱导心肌细胞肥大。薯蓣皂苷作用于心肌细胞的最大无毒浓度为1.25μg/mL。与空白对照组比较,模型对照组心肌细胞面积明显增加,Anp、β-mhc、α-ska表达上调,Dgkz和Pla2g6 mRNA及其蛋白表达明显上调(P<0.05);与模型对照组比较,异丙肾上腺素+薯蓣皂苷1.25μg/mL组心肌细胞面积降低,Anp、β-mhc、α-ska表达下调,Dgkz和Pla2g6 mRNA及其蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,可能与其抑制甘油磷脂代谢酶DGKZ和PLA2G6的表达有关。