基于高通量测序和纯培养技术解析海南东寨港红树植物老鼠簕根际放线菌多样性及其潜在的功能

根际是土壤-植物根系-微生物进行物质交换的活跃地带。根际放线菌是根系放线菌的重要组成部分,是生物活性物质的主要来源之一。本研究从海南东寨港红树林自然保护区采集了5份红树植物老鼠簕根际土壤样品,采用高通量测序和传统纯培养相结合的策略探究样品中根际放线菌的多样性和产生生物活性物质的潜力。利用Illumina Novaseq6000测序平台对老鼠簕根际样品细菌的16SrRNA基因的V3~V4区域进行测序与分析,结果显示:(1)老鼠簕根际细菌共注释到32个门(包括25个有效鉴定的门),其中优势门是变形菌门;α多样性分析表明老鼠簕根际细菌群落多样性非常丰富;(2)对放线菌门的微生物群落进行分析,注释到33个有效鉴定的属、4个暂定的属和28个未培养的新放线菌属,KEGG功能预测分析显示老鼠簕根际放线菌主要参与次级代谢产物的生物合成。同时,利用传统纯培养方法分离放线菌,经形态特征分群和排重,通过PCR扩增、测序并比对16SrRNA基因序列后进行放线菌多样性分析,利用琼脂扩散法筛选抑菌活性,通过基于PCR的基因筛选技术检测代表菌株可能存在的PKS-Ⅰ、PKS-Ⅱ和NRPS抗生素生物合成基因,结果显示:(1)共得到4个属的33株放线菌代表菌株,其中链霉菌属为优势菌属,有2个属未被高通量测序分析结果注释到;(2)代表菌株的NRPS和PKS-Ⅱ基因阳性率很高(90%以上),24.24%根际放线菌具有抗1种及以上指示菌的活性。本研究利用高通量测序和纯培养方法得出东寨港红树植物老鼠簕的根际放线菌多样性非常丰富,并具有较好的合成次生代谢产物的潜力,因此,该研究结果可为具有生物活性化合物的筛选提供丰富的菌种资源,同时也为后续新药的开发提供重要参考依据。

伴阿尔茨海默病牙周炎患者血清Th17/Treg相关细胞因子水平变化研究

目的·观察血清Th17/Treg水平的变化对阿尔茨海默病与牙周炎的影响。方法·纳入2020年6月—2021年12月就诊于上海交通大学医学院附属精神卫生中心老年科共18位伴阿尔茨海默病的牙周炎患者与同时期就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院共15位认知功能正常的牙周炎患者,检查并记录患者探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(clinical attachment loss,CAL)及探诊出血位点比例(percentage of bleeding on probing,BOP%)。使用酶联免疫吸附法检测血清中Th17相关细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-17、IL-22及Treg相关细胞因子IL-4、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)水平。采用样本独立t检验比较2组牙周指标与细胞因子水平的差异,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果·伴阿尔茨海默病的牙周炎患者PD(P=0.021)、CAL(P=0.023)及BOP%(P=0.018)均显著高于认知功能正常的牙周炎患者。伴阿尔茨海默病的牙周炎患者血清IL-6(P=0.010)、IL-17(P=0.022)、IL-22(P=0.031)水平均显著高于认知功能正常的牙周炎患者;同时,组中IL-4(P=0.002)及IL-10(P=0.049)、TGF-β(P=0.006)水平相较于认知功能正常的牙周炎患者显著降低。结论·伴阿尔茨海默病牙周炎患者的牙周状况比认知功能正常的牙周炎患者差,Th17相关促炎细胞因子升高,而Treg相关抗炎因子降低,说明牙周炎可能通过介导Th17/Treg相关的慢性炎症反应影响阿尔茨海默病的发生发展。

小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠的构建及鉴定

目的·基于Cre-Loxp系统构建小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠并验证其敲除效率。方法·将Cx3cr1^(creERT2)与Stat3^(fl/fl)基因型小鼠多代交配繁育,直到获得足够数量的Stat3^(fl/fl);Cx3cr1^(creERT2)基因型小鼠,即条件敲除小鼠(conditional knockout,CKO);同窝Stat3^(fl/fl)基因型小鼠,即对照小鼠(wild type,WT)。利用小鼠组织提取DNA后通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),结合特异性引物分别扩增的结果来判断小鼠基因型。在CKO及WT小鼠6周龄时通过腹腔注射他莫昔芬诱导小胶质细胞中Stat3基因的敲除;2周后,随机选取CKO小鼠(n=4)及WT小鼠(n=4),利用磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分选出小胶质细胞后通过实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)技术从基因水平检测基因敲除效率;通过脑组织切片免疫荧光染色标记小胶质细胞和STAT3蛋白观察小胶质细胞中STAT3的表达情况;利用流式细胞术分别检测STAT3在小胶质细胞及脾巨噬细胞中的变化。通过尼氏染色检测神经元细胞的情况;通过脑组织切片荧光染色标记小胶质细胞,观察皮层和海马区域小胶质细胞的情况;通过流式细胞术检测小胶质细胞表型。结果·成功繁育出CKO小鼠和WT小鼠。MACS后脑细胞中小胶质细胞的占比从10%提升到85%。RT-PCR结果显示,相对于WT小鼠,CKO小鼠小胶质细胞中Stat3的mRNA相对表达量为0.3317±0.0414,mRNA水平下调(P=0.001)。脑组织免疫荧光染色结果显示,CKO小鼠小胶质细胞中STAT3蛋白的荧光强度较WT小鼠弱。脑组织流式细胞术显示:WT小鼠小胶质细胞中STAT3的阳性细胞占比为(85.30±5.69)%;CKO小鼠小胶质细胞中STAT3的阳性细胞占比为(39.70±3.88)%,STAT3表达率下降(P=0.001)。脾组织流式细胞术显示,CKO小鼠与WT小鼠脾巨噬细胞中STAT3的阳性细胞占比的差异无统计学意义(P>0.05)。尼氏染色显示,CKO小鼠与WT小鼠神经元细胞无显著差异。脑组织切片荧光染色结果显示,CKO小鼠与WT小鼠的小胶质细胞在形态上无明显差异。小胶质细胞流式细胞术显示CKO小鼠与WT小鼠小胶质细胞表型无显著差别。结论·成功构建小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠,为后续相关研究提供动物模型。

房屋建筑工程监理中提升工期管理效率的具体措施

房屋建筑工程监理在城镇建设中发挥着举足轻重的作用。提升监理中的工期管理效率不仅有助于保障工程项目按时竣工,而且有益于优化资源分配,降低建设成本,提高经济效益。有效的工期管理措施可以确保工程质量与安全,避免因延误导致的法律风险和经济损失。同时,它关系到项目方与施工方的信誉、市场竞争力和社会形象。在城镇化快速发展的今天,精细化、科学化的工期管理显得至关重要,它不仅代表了管理水平的提高,也是对社会资源负责任的体现。因此,研究并实施提升房屋建筑工程监理中工期管理效率的具体措施,具有极其重要的实践意义和深远的社会影响。

基于卷积神经网络可视化的侧信道泄露区间定位

侧信道攻击中,泄露区间的定位对进一步提升攻击效果和芯片防护产生至关重要的作用.对于基于神经网络的模板攻击,由于神经网络是黑盒模型,使得泄露区间定位成为难题.本文通过改进加权梯度类激活映射(Grad-CAM),提出一种新的可以定位功耗或电磁曲线泄露位置的方法WAvg-Grad-CAM.该方法利用梯度计算进行区间定位,计算输入曲线的不同位置对攻击成功的影响程度,从而可以准确地定位输入曲线的泄露区间.通过实验对比其他常见的可视化方法在模板攻击中的应用效果,发现其拥有曲线平滑和噪音小的优势.实验证明在泄露情况未知且不进行二阶曲线处理的情况下,即使网络成功率较低,也可以直接对带掩码实现的曲线进行精准定位.

让无声语言变有声艺术——诵读教学之我见

没有读书声的课堂不能称之为语文课堂,但近年来,由于现代化教法的冲击、课时的限制、教学功利化倾向等原因,使得诵读环节被排挤到语文课堂极其次要的位置。甚至有教师人为地把诵读与课堂割裂开,使之仅在早读时间以正字音梳文意为目的进行。即使在课堂上,诵读教学的现状也是问题百出,这一语文传统教学方法到了亟须"拯救"的地步。本文将通过分析诵读教学中存在的问题,提出策略建议,再现诵读教学让书面的无声语言变成有声的语言艺术方面的魅力。

拾得金粉,铸成蔷薇——高中作文教学的可行性分析

语文作为整个高中阶段中的一门重要科目,对学生高考成绩发挥有着重要作用。而作文教学又是整个语文学科教学中的重中之重。针对这种情况,本文笔者结合实践教学,主要围绕应用多元化的教学方法,结合时事指导写作,汲取生活之源,让写作回归生活,指定写作训练计划,有序提高写作能力等进行以下几点简要分析。

“上医”墨子的救世药方——部级精品课《兼爱》品赏

春秋战国时期,诸子百花齐放百家争鸣,共同铸就了中国思想文化史上一段熠熠生辉的历史。秦汉以后,儒家成为中华文化的正统,道家主导了普罗大众的思想,法家则主宰了专制王朝的庙堂。唯独墨家昙花一现,在历史中轰轰烈烈地存在过,却又在乱世中迅速由显而微,乃至分崩离析。如此重要的一个思想流派为何会突然不见踪影、无人传承?是历史的选择还是另有隐情?

石油化工工艺管道安装工程施工管理中的问题分析

在改革开放脚步不断加快的过程中我国石油行业得以飞速进步,管道工程建设数量日益增加,随之质量标准也不断提升。但是现阶段中许多安装管理工作中存在着明显的问题,基于这些问题通过相应的工艺施展可以提高对石油油田管道安装质量管控的效果,有效的发挥安装工艺的作用,提高管道的安装质量与安装效果,进而为石油资源的收集与处理提供基础,有效的减少或避免石油生产中的安全隐患。

您的教育目标是否病态

所谓教育目标,就是想把孩子培养成为什么样的人。对于这个问题,很多家长和老师几乎不假思索便能给出答案———做人上人。诚然,这种价值观有它的社会根源——独生子女政策,变相的重点学校、重点班制度,残酷的高考竞争等等,都使“望子成龙”、“出人头地”、“做人上人”成为家长、老师的培养信条。殊不知,这样的观念已十分陈旧,甚至可以说是社会文化的倒退,急需改变!著名的教育家陶行知先生早就告诫过父母们：“不要让孩子成为人上人,不要让孩子成为人下人,

让导入为语文课堂保驾护航——高中语文导入教学浅析

在高中语文课堂中,良好的课前导入是不可缺少的一个环节。良好的课前导入能有效将学生的不同思维聚集起来,有利于学生积极投入到本节课的学习内容之中,便于学生快速进入到学习情境当中,这样的导入利于增强语文课堂教学效果。在本文中,笔者就将导入教学做如下几点分析。