国内血小板基因库建设及应用的现状研究

目的调研国内血小板基因库的建设规模和临床应用情况,了解我国各地区血小板基因库的现状。方法收集来自中国血小板基因数据库协作组的数据和采取自愿上报原则,对2022年度国内27家血站血小板基因库的数据和2021—2023年度14家血站的建库规模、血小板配型数据进行统计分析。结果截止2022年底,全国有27家血站建立血小板HLA基因型资料库,库容量为50~23940人不等,均值为3339±5915人,其中有9家>2000人;血小板HPA基因型资料库容量为50~7162人不等,均值为1636±1549人,其中有14家>1000人;全国有27家血站中,13家无CD36阴性献血者,14家有CD36阴性献血者数据,库容量为2~280个,均值为41±73人。2021—2023年全国血小板捐献者HLA和HPA基因型资料库的库容量呈逐年上升的趋势。14家血站2021—2023年的血小板血清学交叉配型数量在20~8000不等,但血小板基因配合性输注占比差异较大,0%~40%不等,均值<10%。结论国内血小板基因库的规模及应用占比差异大,迫切需要通过扩大血小板捐献者基因型资料库规模、提高血小板基因库的临床使用率,实现血小板的精准输注,进一步保障临床输血的科学性、有效性和安全性。

2016—2021年血型血清学实验室间质量评价结果分析

目的分析本实验室血型血清学实验室间质量评价项目中与参考答案不符项,制定相应措施以提高本实验室检测能力。方法整理2016—2021年12份血型血清学实验室间质量评价回执报告,收集在ABO定型、RhD定型、抗体筛选、抗体鉴定和交叉配血实验中与参考答案不符项,剖析其产生的原因。结果12份血型血清学实验室间质量评价的回执报告结果均为满意,Z均值为0.53,其中有6次为零。抗体筛选阳性率为44.44%,检出27个抗体,覆盖了6个系统的12种类型,其中Rh血型系统59.26%、MNS血型系统11.11%、Lewis血型系统7.41%、P1PK血型系统3.70%、Kidd血型系统3.70%,其他11.11%。参与的252项检测中共15项与参考答案不符合,其中11项有罚分,包括ABO定型1项、RhD定型4项、抗体鉴定5项和交叉配血1项。结论参加血型血清学实验室间质量评价是实验室检测能力持续改进的一种有效途径,能监控本实验室存在的问题。

长沙地区血小板供者基因数据库理论建模分析

目的分析长沙地区血小板供者基因数据库建设情况,评估为临床提供HLA/HPA匹配的单采血小板的可能性。方法分析长沙地区血小板供者基因数据库1029例无亲缘关系单采血小板供者HPA、HLA⁃A/B等位基因及抗原分布情况,评估长沙地区血小板供者基因数据库建设规模。结果在不考虑ABO血型的情况下,当库容为207人时,约有95%的患者能在该库中找到至少1名HPA基因型全匹配的供者;当库容为2127人时,约有95%的患者能在该库中找到至少1名HLA⁃A/⁃B表型匹配的供者;当库容为1029人时,约有79.25%的患者能在该库中找到至少1名HLA⁃AB表型匹配的供者。单采血小板捐献者A、B抗原CREG表位不配合的概率最高分别为1C⁃2C和7C⁃5C,Broad CREG不配合概率最高的为4C⁃6C。结论长沙地区已建立已知HLA/HPA基因型的血小板供者基因数据库库容1029人,在扩大有效库容的同时将进一步验证理论建模的适用性和匹配概率的符合性。

冻存时间对ALT干粉质控品检测的影响分析

目的:分析冻存时间对转氨酶干粉质控品检测结果的影响,了解干粉质控品复溶后的均一与稳定性,从而优化血站ALT检测中室内质控品使用方案。方法:将转氨酶干粉质控品中值及高值复溶后分装,各浓度取6支共重复检测20次,其他−20℃冰箱保存。自第2天起至第38天,每天取出2支置室温,由同一人重复操作共检测4次,计算均值(X)、标准差(SD)和变异常数(CV)。将第一天的值作为实验对照组,第2~15天为第二组,第16~29天为第三组,第30~38天为第四组。采用多重比较Dunnett-t检验比较后三组与第一组检测结果有无差异性。连续观察152天,制作结果折线图观察有无趋势变化。结果:每天重复检测的CV 0.05);ALT质控品152天检测趋势显示,CV小于允许总误差值的1/3 (6.67%),折线图显示无明显趋势变化。结论:−20℃保存的朗道ALT质控品分装37支较为合理,能最大限度发挥其使用效能。

新冠恢复期血浆拟捐献者健康评估及抗体水平分析

目的分析新冠肺炎康复者健康状况和抗体水平,为恢复期血浆采集和治疗选择合适的捐献者。方法收集2020年2月7日~3月8日长沙市新冠肺炎康复者出院时相关体检数据,对有意愿参加恢复期血浆捐献的康复者进行健康状况评估,评估合格者进行抗体检测。采用ELISA方法检测新型冠状病毒IgM、IgG抗体及总抗体,固相红细胞粘附法筛查血小板抗体,凝集法检测红细胞直接抗体及不规则抗体。结果15名拟捐献者平均年龄32岁,平均住院天数16.5 d,样本采集时距出院平均17.9 d。15名拟捐献者新冠核酸检测均呈阴性,有1名HBsAg阳性不符合捐献条件。15名拟捐献者直抗、不规则抗体筛查均阴性,血小板抗体筛查均呈非特异性阳性。20%(3/15)为IgM阴性,53.33%(8/15)IgG抗体滴度大于160,60%(9/15)总抗体滴度大于320,46.67%(7/15)同时满足IgG抗体滴度大于160及总抗体滴度大于320。结论46.67%~60%的拟捐献者可以进行恢复期血浆的捐献。采集前进行新冠肺炎康复者健康评估和抗体水平的检测,对于选择合适的捐献者,保障恢复期血浆治疗效果,具有重要意义。

湖南地区人群HLA-A、B、DRB1等位基因多态性的研究

目的研究湖南地区人群HLA-A、B、DRB1位点等位基因的多态性。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对3 664名湖南籍健康人进行HLA-A、B、DRB1等位基因的低分辨分型。结果本次研究共检出HLA-A、B、DRB1位点等位基因74种,其中A位点17种,B位点44种,DRB1位点13种。A位点中A*11(34.42%)、A*02(31.88%)、A*24(18.01%)、A*33(6.18%)为湖南人群的优势基因。B位点中B*40(23.70%)>B*46(17.76%)>B*15(13.99%)>B*13(8.60%)。DRB1位点中,频率最高的为DRB1*09(19.69%),其次为DRB1*15(14.01%)、DRB1*12(12.97%)、DRB1*04(11.96%)、DRB1*08(9.02%),频率最低的为DRB1*01(0.88%)。与其他地区不同人群相比,HLA-A、B、DRB1各位点等位基因的分布均有显著的差异。结论湖南人群的HLA-A、B、DRB1位点等位基因具有复杂的多态性,中国各地常见的基因均有分布,白血病患者在湖南不难找到合适的造血干细胞供者。本研究结果可作为湖南地区人群正常参考值,为人类学及HLA与疾病相关的研究提供了有力的背景资料。

湖南地区人群HLA单倍型的多态性研究

目的了解湖南地区人群HLA单倍型的多态性。方法采用PCR-SSP法对3664名湖南籍健康人群进行HLA-A、B、DR位点的低分辨基因分型,计算HLA-AB、HLA-BDR、HLA-ABDR单倍型的连锁不平衡参数及频率,并与其他人群进行比较。结果共检出350种HLA-AB单倍型、408种HLA-BDR单倍型、1935种HLA-ABDR单倍型。检出具备强连锁的HLA-AB单倍型36种、HLA-BDR单倍型48种,其中,频率较高的单倍型为A2-B46、A11-B60、A24-B60、B46-DR9、B60-DR15、B60-DR4、A2-B46-DR9、A33-B58-DR3、A11-B75-DR12。结论湖南地区人群的HLA单倍型分布特点与我国南方人接近,但有其自身特征,A2-B*8102、A24-B46-DR9、A11-B51-DR9可能为湖南人群特有的单倍型。

湖南地区人群HLA-DRB1基因多态性的研究

目的研究湖南地区人群HLA—DRB1位点等位基因的多态性。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR—SSP)技术对3 664名湖南地区健康汉族人群进行HLA—DRB1等位基因的低分辨分型。结果检出的13种DRB1位点等位基因中,频率最高的为DRB1*09(19．693%),其次为DRB1*15(14．014%)、DRB1*12(12．973%)、DRB1*04(11．960%)、DRB1*08(9．017%),频率较低的为DRB1*10(1．167%)和DRB1*01(0．877%),DRB1*09频率较其它地区人群为高。从遗传距离分析发现,湖南人群和广东人群距离最近(0．1378),和辽宁人群距离最远(0．3356)。结论湖南地区人群的HLA—DRB1位点等位基因具有复杂的多态性,以DRB1*09、DRB1*15、DRB1*12和DRB1* 04频率为高,其等位基因频率的分布属于中国南方人群,但有其自身特点。

应用骨髓库HLA资料构建高匹配诱导多能干细胞库的可行性研究

目的研究利用骨髓库HLA资料建立高匹配诱导多能干细胞(iPS)库的可行性。方法通过对中华骨髓库湖南分库长沙实验室5 236(人)份HLA分型数据统计分析,找出O型HLA-A、-B、-DRB1三座位纯合子数据,计算以纯合子志愿者为假定iPS供者、5 236名随机志愿者为假定患者的匹配几率;同时计算随机志愿者HLA单体型频率,评估以O型HLA高频单体型纯合子志愿者为假设iPS供者的匹配几率。结果在5 236份骨髓供者资料中共发现O型HLA单体型纯合子14种,以此建库可以分别为49.81%(2 608/5 236)、61.29%(3 209/5 236)、79.51%(4 163/5 236)、75.76%(3 967/5 236)及97.78%(5 120/5 236)的假定患者提供5种匹配水平的iPS供者;共检出17种高频率(HF>1%)的单体型,以这些单体型的O型纯合子建库可以分别为64.06%(3 354/5 236)、75.55%(3 956/5 236)、81.11%(4 247/5 236)、78.76%(4 124/5 236)及98.28%(5 146/5 236)的假定患者提供5种匹配水平的iPS供者。结论利用中华骨髓库现有的HLA资料可以建立数量少、效率高的iPS细胞库。

湖南地区汉族健康人群HLA-B＊27基因多态性调查

目的调查湖南地区汉族健康人群中HLA-B*27基因多态性。方法对3 488名湖南汉族健康造血干细胞志愿捐献者进行HLA-B基因测序分型,对HLA-B*27健康携带者亚型分布情况进行分析。结果 3 488名湖南汉族志愿捐献者中,共检出HLA-B*27基因健康携带者99名,在人群中的分布比例为2.84%,男女比例无明显差异。99名健康携带者中,共检出HLA-B*27基因亚型6种,其中以HLA-B*27∶04为主(68/100),其次是HLA-B*27∶05(18/100),HLA-B*27∶06(7/100),HLA-B*27∶07(3/100),HLA-B*27∶02(2/100),HLA-B*27∶24(2/100)。结论湖南地区汉族健康人群HLA-B*27基因亚型以B*27∶04、B*27∶05为主。

自身抗体干扰输血相容性检测处理对策

自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者由于存在自身抗体使输血前相容性检测复杂化,若不能正确鉴定这些患者的血型,明确是否存在具有临床意义的同种抗体/自身抗体并及时发出合适的成分血,可能导致输血延误甚至危及生命。正确掌握AIHA患者输血相容性检测处理对策,对于保障AIHA患者的输血及时性和输血安全性意义重大。本文根据国内外研究进展,从AIHA的血清学特点、自身抗体类型、血型鉴定方法、抗体筛查与抗体鉴定方法,以及此类患者的输血策略等方面做出总结,旨在为输血科工作人员排除AIHA患者自身抗体的干扰和输血提供指导。

长沙市20家医院自体输血开展情况调查报告

目的了解长沙市各级医疗机构自体输血开展情况,促进本地区自体输血在临床中规范、安全地应用。方法通过现场走访,填写调查问卷表,对长沙市用血量前20家医疗机构2012-2017年自体输血的开展情况及制约因素等进行调研。结果 2012-2017年长沙地区用血量前20家医院平均自体输血开展率为31.7%,某部级、省级、市级医院2012-2017年平均自体输血率分别为:12.07%、2.27%、13.32%。自体输血类型以术中输血的回收式为主。结论长沙地区较大型的三甲医院已逐步开展自体输血并取得一定成效。自体输血是临床输血的重要组成部分,大力推广和实施自体输血仍任重而道远。

红细胞冰冻前的最佳保存期探讨

背景：既能适当延长冰冻红细胞在冰冻前的保存期,又能保证冰冻红细胞的质量,是十分有意义的研究课题。目的：适当延长稀有血型红细胞冰冻前在（4±2）℃的保存期,满足急症稀有血型患者的输血,降低血液成本,减轻工作强度。方法：将冰冻前（4±2）℃保存1~6d和冰冻前（4±2）℃保存7~12d制备的冰冻红细胞进行质量比较;根据血液保养液的红细胞保护原理、美国AABB相关标准及质检结果将含添加剂的红细胞在冰冻前的保存期设定为自采血之日起14d内,对采取此措施前后2001/2009本中心的Rh（D）阴性供血情况进行统计分析。结果与结论：质量检测结果达到国家标准,两组质量检测数据比较差异无显著性意义;将含添加剂的红细胞在冰冻前的保存期设定为自采血之日起14d内,本中心Rh（D）阴性血年供血量虽逐年增加,但冰冻红细胞的供血量却未增加,其占供血的比例还在逐年下降,（4±2）℃保存血的供血比例则逐渐增加。冰冻前在（4±2）℃保存14d再制备的冰冻红细胞发往临床均未发现因此而产生的血液质量问题。结果可见增加Rh（D）阴性（4±2）℃保存血供血量,减少冰冻红细胞供血量,能及时满足急症Rh（D）阴性患者的输血,降低制备冰冻红细胞导致的高血液成本,减轻员工制备冰冻红细胞的工作强度。

湖南省2013年血站及献血者基本情况调查

目的了解湖南省血站的工作现状、服务能力和运行状况以及全省献血者的基本情况,为制定血站建设规划、促进全省无偿献血事业持续健康发展提供参考依据。方法采用回顾性分析的方法,调查2013年湖南省14个市州血站的机构和人员状况、血液采集和供应、血站财务收支等情况。结果截止2013年底,湖南省血站共有在岗职工1 346人,男女性别比为1∶1.19,年龄以26-40岁居多,占55.65%(749/1 346);学历以本科和专科为主,约占83.58%(1 125/1 346);职称以初级为主,中级及以上仅占22.28%(300/1 346);血站收入以临床用血费用为主,占87.83%(28 884万元/32 887.76万元),支出以人员工资和保障血站运转经费为主,达75.96%(23 632.89万元/31 113.29万元),血费报销费用仅占1.86%(577.86万元/31 113.29万元)。2013年全省采集全血15 594.32万m L;献血者以个人自愿献血者和招募的团体献血者为主,占94.96%(741 313/780 658);捐献机采血小板者以个人自愿献血者为主,占98.17%(32 275/32 877)。2013年全省自愿无偿献血人者中,男性占65.16%(313 745/481 499)、女性占34.84%(167 754/481 499),年龄18-45岁占28.77%(138 537/481 552),高中及中专学历者占26.01%(125 238/481 499)和大专及其以上层次占27.32%(131 549/481 499);献血者职业分布,除无法明确界定或者登记不明确者外,依次为学生(14.11%)、农民(9.87%)、公务员(9.81%)、工人(9.30%)、医务人员(6.79%)、教师(4.8%)和军人(2.70%)。全省献血率为6.93‰,最高的达到19.01‰,最低的为2.93‰。结论湖南省血站存在人员编制不足、专业卫生技术人员比例偏低、财政投入不足等问题;无偿献血者中以男性人群,高中、中专和大专科学生为主,需要有针对性加强宣传招募,特别是在基层地区以及其他职业人群中的宣传,以提高人口献血率,保障临床血液供应。

长沙市50家各级医疗机构对采供血服务满意及需求的调查报告

目的了解长沙市各级医疗机构对采供血服务的需求情况,为进一步加强采供血机构服务管理提供依据。方法通过现场走访,填写调查问卷表,50家各级医疗机构对血站血液领取方式、血液供应满意度、输血指导等情况进行调研。其中三级医院20家,二级医院20家,一级医院10家。结果在供血服务方面:约血接听电话工作人员的服务态度和及时性、血液运输抵达时储血箱温度、送血服务及时性的平均满意度分别为90%、76%、68%。在血液质量、对出现的血液问题的反馈和处理满意度分别为88%、72%,血液供应满足临床需求的平均满意度为86%。临床医院对本中心的服务需求体现在输血技术的指导和培训上。结论临床用血医疗机构满意度及服务需求调查结果应作为衡量采供血机构血液质量及服务质量的重要指标,确保血液中心质量管理的持续改进,保证临床输血的安全性和有效性。

湖南省RhD阴性献血人群11种红细胞血型系统基因频率及多态性研究

目的了解湖南省RhD阴性人群红细胞血型系统抗原基因频率的分布情况,为临床用血及建立多重稀有血型库建设奠定基础。方法抽取本中心2019年6月~2020年6月献血者中经血清学方法确认的300名RhD阴性献血者血样,采用SSP-PCR方法做RHD基因分型,对分型结果为RhD阴性RHD基因缺失型的献血者标本,采用SSP-PCR方法做红细胞MNS、Duffy、Kell、Dombrock、Diego、Kidd、Sciawnna、Colton、Lutheran和Yt血型系统抗原基因分型,并以SPSS20统计学软件其卡方检验做统计学分析。结果 RHD基因缺失型为血清学方法确认RhD阴性者的58.67%(176/300);其中MNS血型S+/s+/Mur+基因频率:GYPB;S 0.045 5(8/176)、GYPB;s 0.954 5(168/176)、GYP;Dane 0.039 8(7/176);Duffy血型基因频率:FY^(*)A 0.965 6(170/176),FY^(*)B 0.034 1(6/176);Dombrock血型基因频率:DO^(*)A 0.082 4(14.5/176),DO^(*)B 0.917 6(161.5/176);Diego血型基因频率:DI;A 0.025 6(4.5/176),DI;B 0.974 4(171.5/176);Kidd血型基因频率:JK;A 0.485 8(85.5/176),JK;B 0.514 2(90.5/176);Kell血型基因频率:KP^(*)A 0.005 7(1/176),KP^(*)B 0.994 3(175/176);Lutheran血型基因频率:LU^(*)A 0.005 7(1/176),LU^(*)B 0.994 3(175/176);Yt血型基因频率:YT^(*)A 0.002 8(0.5/176),YT^(*)B 0.997 2(175.5/176)。Kell血型的K+/k+、Scianna和Colton血型基因型分别为KEL^(*)02/KEL^(*)02,SC^(*)01/SC^(*)01和CO^(*)A/CO^(*)B。O型、RhD阴性及其他红细胞血型系统中低频抗原组合后的期望值频率为1/100 000~1/10 000。结论湖南省RhD阴性献血人群中,MNS、Duffy、Dombrock、Diego、Kidd、Kell和Lutheran血型系统基因呈多态性分布,Kell、Colton、Scianna血型基因型均为纯合子。筛选RhD阴性献血者所获取的其他红细胞血型系统资料对建立本地多重稀有血型资料库具有重要意义。

长沙地区临床退血情况分析与对策

目的通过收回发往临床的缺陷血液或可能存在质量和安全隐患的血液,分析退血情况,提高服务水平,确保产品质量。方法按退血品种、原因分类整理,统计各自所占比例并作出分析。结果 2006～2012年共计退回11个血液品种、3 479.54 U血液,占临床用血的0.11%。退回的血液产品中品种最多的是RBC悬液,占总数48.91%,血袋缺陷、凝块、溶血、脂肪血、絮状物、血袋热合不严是退血主要原因。结论针对上述原因,从献血者、血站、临床用血机构、血袋供应商等方面制定出相应措施,杜绝可能存在质量和安全隐患的血液对受血者造成的人身伤害,保障临床用血安全、及时、有效。

医疗机构输血相关信息系统使用情况调查与分析

目的了解湖南省长沙市各级医疗机构输血相关信息系统建立及使用情况,为进一步加强临床输血管理提供可行依据。方法通过现场走访及填写调查问卷表,对50家各级医疗机构输血相关信息系统的建立、软件功能、升级及联网需求等情况进行调研。结果三级医院的输血信息管理系统(BIS)使用率、与HIS和LIS对接率均为65%,而二级和一级医院BIS使用率为0。三级和二级临床医院对BIS系统有使用需求,一级医院需求不大。长沙市各级医院和采供血机构信息系统联网需求为98%。结论BIS的使用情况在不同等级医院有较大差别;现有信息系统功能模块有待提升及完善;尽早确立并实施规范、统一的区域性BIS有利于安全有效的血液管理。

HCV RNA检测在献血者筛选中的应用分析

目的 探讨我国目前采供血模式下将HCVRNA检测用于献血者筛选的可行性与必要性。 方法 采用HCV核酸扩增酶免检测技术检测 4170例抗 -HCV阴性及 76例抗 -HCV阳性献血者血清HCVRNA。 结果 4170例抗 -HCV阴性血清中未检出HCVRNA阳性 ,76例抗 -HCV阳性者中 ,两种试剂检测抗 -HCV阳性者HCVRNA检出率 48.0 % ,单试剂检测抗 -HCV阳性者HCVRNA检出率 9.80 %。 结论 HCVRNA检测目前尚不能完全取代血清学检测用于献血者筛选。

2009～2014年RhD阴性稀有血型献血者队伍建设及采供保障

目的掌握本市无偿献血人群中RhD血型的分布和RhD阴性稀有血型库的建设情况，通过分析RhD阴性血液血源供血和输血现状，找出科学有效的管理方法。方法对2009～2014年共561360名无偿献血者进行RhD测定，确认为RhD阴性者，进一步测定表型并建立稀有血型献血者信息库。结果561360名无偿献血者中有2343名测定结果为RhD阴性（阴性率0．42％），符合我国汉族人群中RhD阴性比值，RhD阴性人群中ABO血型分布为O〉A〉B〉AB，采取提供库存血液或定向招募（机采）RhD阴性献血者献血的供血方式，对临床给予科学合理用血的指导以保证血液供应。结论实行RhD阴性血液的血源、供血和输血全程管理，能确保临床需求及有效保护稀有血源。