内皮素-1促进去甲肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨内皮素 (ET- 1 )在去甲肾上腺素 (NE)诱导的心肌细胞凋亡中的作用 .方法 采用无血清培养新生大鼠心肌细胞模型 ,以免疫组化鉴定心肌细胞 ;以 Hoechst332 58与 PI双重荧光染色观察 ET- 1与 NE单独或联合作用时心肌细胞凋亡率的变化 .结果 1实验培养的新生大鼠心肌细胞的纯度达 90 % ;2 NE呈剂量依赖性诱导心肌细胞凋亡 ;ET- 1对心肌细胞凋亡率无明显影响 ;ET- 1与 NE联合作用可显著增加心肌细胞的凋亡率 .结论 内皮素 -

模拟失重增强大鼠脑动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道功能

本工作旨在探讨短期模拟失重大鼠脑动脉血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)大电导钙激活钾通道(largeconductancecalcium-activatedpotassiumchannels,BKCachannels)功能的改变。以尾部悬吊大鼠模型模拟失重对脑血管的影响。应用激光扫描共聚焦显微镜测定VSMCs胞内游离钙浓度([Ca2+]i);采用细胞贴附模式,记录BKCa通道的单通道活动。结果表明,模拟失重1周后,大鼠脑动脉VSMCs的[Ca2+]i比对照组显著升高(P<0.05);BKCa通道的开放概率(Po)与平均开放时间(To)显著增加(P<0.05),而单通道电导与平均关闭时间(Tc)则无显著变化。总之,1周模拟失重可引起脑动脉VSMCs的BKCa通道功能显著增强,且与细胞[Ca2+]i的升高同步出现。结果提示,脑动脉VSMCs的离子通道机制可能参与介导模拟失重引起的脑血管适应性变化。

浅谈航天生理学实验模型的选择

航天生理学作为一门独特而新兴的学科是航空航天医学的重要组成部分，明确航天生理学的内容和实验模型的选择标准对教学、科研与临床工作具有重要意义。

内皮素-1与PGF_(2α)单独或联合作用对心肌细胞的影响

目的:观测ET1与PGF2α单独或联合作用对新生大鼠心肌细胞面积与凋亡率的影响,以探讨心肌细胞肥大与凋亡的关系。方法:分离培养新生大鼠心肌细胞,采用鬼笔环肽(phalloidin)荧光染色(定性)与细胞面积测量(定量)两种方法检测心肌细胞肥大;以Hoechst33258荧光染色检测心肌细胞凋亡。结果:Phalloidin荧光染色显示ET1或PGF2α单独处理组,心肌细胞肌原纤维纹理清晰,纤维增多且沿细胞长轴方向排列。而ET1与PGF2α联合处理48h组的肌原纤维出现纹理模糊与断裂现象。ET1与PGF2α诱导心肌细胞肥大呈现一定的量效关系:10nmol/LET1处理24h组心肌细胞面积较对照组增加68%,100nmol/LET1组增加84%。10nmol/LPGF2α组增加28%,100nmol/LPGF2α组增加106%。ET1与PGF2α可协同引起心肌细胞肥大,但缺乏叠加效应:10nmol/L ET1与10nmol/LPGF2α联合作用组增加80%;10nmol/LET1与100nmol/LPGF2α组增加122%;而100nmol/L ET1与10nmol/LPGF2α组增加96%;100nmol/LET1与100nmol/LPGF2α组增加199%。ET1与PGF2α单独作用缺乏明显的促心肌细胞凋亡作用。ET1与PGF2α联合作用24h对心肌细胞凋亡率亦无明显影响,作用48h则使心肌细胞凋亡率呈显著性增加。ET1或PGF2α先引起心肌细胞肥大后,促肥大因子亦可诱导心肌细胞凋亡,且心肌细胞凋亡率?

BK_(Ca)通道是治疗恶性胶质瘤的潜在靶点吗?

恶性脑胶质瘤的治疗难,疗效差。能否找到有效的治疗手段是临床医师与科研人员关心的问题。2010年美国Erwin教授在《临床医师肿瘤杂志》(CA Cancer J Clin)上发表了一篇综述,从手术、放疗、化疗、靶向治疗、干细胞等多个方面详细阐述了恶性胶质瘤治疗的最新进展。其中,作者着重对近年来所发现的恶性胶质瘤分子靶点作了一个全面的综述,具有很好的临床指导意义。但当我们仔细研读这些靶点时,发现作者遗漏了调控胶质瘤生长的另一条关键信号通路——离子通道。对此,我们提出了自己的见解,并以Letter的形式发表。

尾悬吊大鼠比目鱼肌肌钙蛋白I异构体的转化与睾丸萎缩

目的确定大鼠比目鱼肌肌钙蛋白I(TnI)发生转化的时间 ,并分析其与比目鱼肌萎缩时间过程间的相关关系 ;分析睾酮水平降低与抗重力肌萎缩速度之间的关系。方法将雄性大鼠分为 8组 ,悬吊时间分别为 3、4、5、7、1 4、2 1、2 8与 42d。测量雄性悬吊大鼠睾丸和比目鱼肌的湿重并计算相对重量 (湿重/体重 ) ,同时采用Westernblot对悬吊大鼠比目鱼肌TnI的表达水平进行观测。将雌性大鼠分为 3组 ,悬吊时间分别为 3、4与 5d ,测量其比目鱼肌的湿重并计算其相对重量。结果雄性悬吊大鼠的比目鱼肌湿重和相对重量在第 4天显著降低 ,1 4d萎缩程度最明显。悬吊大鼠睾丸的湿重在第 5天出现显著萎缩 ,相对重量在第 4天发生了显著萎缩。雌性悬吊大鼠比目鱼肌的湿重与相对重量 4d时没有明显变化 ,在第 5天才显著降低。比目鱼肌TnI在悬吊 1 4d出现由ssTnI向fsTnI的转化。结论雄性悬吊大鼠抗重力肌 (比目鱼肌 )发生由ssTnI向fsTnI转化的时间为 1 4d ,这与抗重力肌发生显著萎缩的时间(4d)并不一致 ,提示TnI可能不是引起模拟失重后抗重力肌萎缩的随重力的降低而发生敏感变化的蛋白。同时 ,雌性大鼠抗重力肌发生显著萎缩的时间是 5d 。

蛋白激酶Cδ可能参与肥大心肌细胞转向凋亡

为了探讨肥大心肌细胞对凋亡刺激的易感性及蛋白激酶Cδ(protein kinase Cδ,PKCδ)在其中的作用,以内皮素-1 (endothelin-1,ET-1)处理原代培养的新生大鼠心肌细胞,诱导心肌细胞肥大；再用血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,Ang II)作为细胞凋亡诱导因子,采用鬼笔环肽(phalloidin)荧光染色与细胞面积测量两种方法检测心肌肥大,Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡。结果显示：(1)1与10 nmol/L ET-1作用48h,心肌细胞肌原纤维排列整齐、染色增浓,随ET-1浓度增加而愈加明显,心肌细胞表面积分别增加42．5%和67．3%,以此作为轻度和中度心肌细胞肥大模型。(2)正常、轻度肥大与中度肥大心肌细胞受1nmol/L AngⅡ处理24h后,凋亡率分别为(15．54±1．32)%、(20．65±1．40)%与(29．33±3．52)%,三组之间有显著差异(P＜0．05)。(3)受AngⅡ刺激后,PKCδ特异性抑制剂rottlerin不影响正常心肌细胞的凋亡率,却有效抑制了轻度和中度肥大心肌细胞的凋亡。肥大心肌细胞凋亡易感性明显高于正常心肌细胞,抑制PKCδ可以抑制肥大心肌细胞凋亡,提示PKCδ参与肥大心肌细胞凋亡过程。

肥大心肌细胞对AngⅡ诱发凋亡的易感性增加

目的 :建立心肌细胞肥大模型 ,观测正常与肥大心肌细胞对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )促凋亡刺激的易感性 .方法 :采用新生大鼠原代培养心肌细胞 ,观测内皮素 (ET 1)或AngⅡ单独作用 2 4h后 ,心肌细胞面积与凋亡率的变化 .进一步观测ET 1作用 2 4h后 ,再用AngⅡ刺激 2 4h ,心肌细胞凋亡率的变化 .结果 :① 10或 10 0nmol·L-1ET 1作用 2 4h ,心肌细胞轮廓面积较对照组分别增加 16 8%或 184 %.而凋亡率分别为 10 .9%或 11.7%,与对照组 (10 .7%)相比均无显著性差异 .② 0 .1,1.0或 10 .0nmol·L-1AngⅡ单独作用2 4h ,心肌细胞的面积较对照组分别增大了 14 6 %,16 2 %或2 2 4 %.其凋亡率则分别为 12 .6 %,17.2 %或 16 .2 %,均与对照组有显著性差异 .③经 10nmol·L-1ET 1处理 2 4h后 ,再用 1nmol·L-1AngⅡ作用 2 4h ,心肌细胞的凋亡率进一步增加为 2 1.6 %,与对照组或 1.0nmol·L-1AngⅡ刺激组相比 ,均具有显著性差异 .④AngⅡ的AT1受体阻滞剂Losartan既可抑制AngⅡ诱导的正常心肌细胞凋亡 ,亦可抑制肥大心肌细胞的凋亡 .而AT2 受体阻滞剂PD12 3319则无明显作用 .结论 :ET 1具有剂量依赖性促心肌细胞肥大作用 ,而对心肌细胞凋亡率无明显影响 .AngⅡ有剂量依赖性促心肌细胞肥大作用和非剂量依赖性促心肌细胞凋亡?

通信协议宏在RS-485总线通信中的应用

从系统构成和通信软件编程两方面详细介绍了一种基于RS-485通信网络的分散式变频制冷控制系统的设计方案,主要是以富士变频器的RS-485通信协议为基础,利用CX-Protocol软件编写了由设定参数、运行命令和监测数据等3个通信序列构成的RS-485串口通信协议宏,实现了单台OMRON CQM1H可编程序控制器与6台变频器的串行通信控制,并能实时监测各变频器的运行状态,最终达到较好的制冷效果。

肌球蛋白重链II_xmRNA表达可能为大鼠比目鱼肌废用的分子标志

目的建立大鼠跟腱切断模型 ,观测并比较跟腱切断与尾部悬吊大鼠比目鱼肌重量与肌球蛋白重链 (MHC)异构体mRNA表达的变化 ,为探讨骨骼肌废用性萎缩的机理提供实验线索。方法选取雄性SD大鼠 30只 ,随机分为 6组 ,每组 5只。直接切断跟腱 ,称量肌腱切断后第 1、3、7、1 4、2 1、2 8天比目鱼肌 (SOL)、腓肠肌内外侧头 (MG ,LG)与跖肌 (PL)的湿重。用RT PCR法观测SOLMHC异构体mR NA的表达。结果跟腱切断后第 3天 ,SOL出现明显萎缩 ,在第 7与 1 4天萎缩达最低点 ,从第 2 1天开始 ,萎缩的SOL重量有所恢复。MG、LG与PL重量的变化趋势与SOL基本一致。在正常SOL中 ,仅有MHCI与IIa mRNA表达。从跟腱切断的第 3天开始直至第 2 8天 ,SOL中出现MHCIIx mRNA的表达 ,但无MHCIIb 的表达。结论跟腱切断引起的SOL萎缩在出现时间与程度上 ,与尾部悬吊相似。两种模型均可引起SOL中MHCIIx mRNA表达 ,推测MHCIIx

PBL教学法内核在航空航天生理学中的灵活应用

PBL教学法是以学生为主体,以问题为中心的一种现代教学方法,有助于培养学生的自主学习能力和解决问题能力。航空航天医学的教学目的在于培养学员解决实际问题的能力。虽然PBL能较好地满足这种要求,但航空航天医学与临床医学之间存在较大差异,在航空航天医学的教学过程中,不适合直接采用PBL的教学模式。在航空航天医学教学中,应该吸收并灵活应用PBL教学模式的内核,探索出一种适合航空航天医学教学的方法。文章使用39 000 m高空极限跳伞的实例,在航空航天生理学的教学中进行了尝试,并取得良好的效果。

两周模拟失重大鼠脑动脉平滑肌细胞Ca_L电流的变化

目的观察模拟失重2周后,大鼠脑动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)L型电压依赖性钙离子通道(L-type voltage dependent calcium channel,CaL)功能的改变,以及钙通道激动剂BayK8644对通道电流的影响。方法以尾部悬吊大鼠模型模拟失重的影响。采用全细胞膜片钳记录模式,以Ba2+作为载流子,记录2周模拟失重后大鼠脑动脉VSMCs的CaL电流及钙通道激动剂Bay K 8644对其的影响,并测定相应的稳态激活与失活曲线及有关参数。结果与对照组相比,模拟失重2周后悬吊组大鼠已出现了典型的模拟失重效应,悬吊组大鼠脑动脉VSMCs的CaL的电流密度显著增加(P<0.05),且对钙通道激动剂Bay K 8644更敏感(P<0.05)。此外,与对照组相比,悬吊组大鼠脑动脉VSMCs的膜电容与接入电阻、CaL稳态失活曲线和稳态激活曲线等通道动力学特征无显著性改变。结论模拟失重2周可引起大鼠脑动脉平滑肌细胞CaL通道功能增强,这可能是模拟失重导致大鼠脑动脉血管收缩反应性增强的因素之一。

人肝癌HCC-9204细胞膜钾离子通道特性的研究

目的研究人肝癌HCC-9204细胞膜钾离子通道的特性。方法人肝癌细胞株HCC-9204传代培养72 h后,以膜片钳全细胞记录方式检测细胞膜钾离子通道电流。结果HCC-9204细胞膜静息膜电位为-21.2±1.8mV,细胞膜电容为12.5±2.6pF;HCC-9204细胞所记录到的跨膜电流具有电压依赖及不失活等特性,能被高浓度K+通道阻断剂TEA或4-AP阻断。结论人肝癌HCC-9204细胞膜存在钾离子通道,其主要类型可能是电压依赖性钾通道。

STZ诱导的2型糖尿病大鼠心肌组织TRPC7的表达上调

目的:观察2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织损伤过程中,TRPC7的表达变化。方法:以高脂饲料喂养并辅以腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)来建立T2DM大鼠模型,采用蛋白印迹及免疫组化染色方法检测TRPC7在T2DM大鼠心肌组织的表达变化。结果:1T2DM大鼠造模成功且T2DM大鼠心肌组织发生损伤性变化:与正常组大鼠相比,T2DM组大鼠血糖明显升高且体重显著降低(P<0.05);T2DM组大鼠心脏体积与质量显著减小(P<0.05);T2DM组大鼠心脏质量指数(heart weight index,HWI)明显高于正常组(P<0.05);2在T2DM大鼠心肌损伤过程中TRPC7表达上调:TRPC7在正常及T2DM大鼠心肌组织中均有表达,但与正常大鼠相比,T2DM大鼠心肌组织TRPC7蛋白的表达显著增高(P<0.05)。结论:首次证实在损伤的T2DM大鼠心肌组织中,TRPC7的表达显著上调。

构建以“提高课堂教学质量”为中心的教学评价体系

课堂教学质量是大学育人的主要环节,也是教学质量的综合体现。为切实提高本科生教学质量,第四军医大学深入实施精品战略,建立了一套以"提高课堂教学质量"为中心的完善的教学评价体系,并取得了辉煌的成绩。

军事航空航天医学人文素质的建立与培养

作为"军事特色"突出的学科,航空航天医学在军事医学的教学中占有十分重要的地位,其教学效果与教学改革的成败决定了能否将学员培养为合格的航空军医。其中军事航空航天医学人文素质教育是课程体系改革的重要内容,在提高学员对航空航天医学专业学习的积极性方面具有重要的作用。学员军事航空航天医学人文素质的提高可通过在军事人文素质、专业人文素质和知识性人文素质三个方面进行改革得以实现。

对国家精品课程建设的理解与体会

创建国家精品课程是教育部"质量工程"的重要组成部分,第四军医大学自实施"精品战略"以来,不断完善和优化教学资源,在教学内容、教师队伍、教学设计、教学手段、教学管理与教学效果等各方面有了质的飞越。本文通过对国家精品课程内涵的理解,结合我校的成功经验,提出了高校精品课程建设的几点体会。

克隆的BKCa通道介导AngⅡ诱导的HEK293细胞增殖

目的:探讨BKCa通道在AngⅡ诱导细胞增殖过程中的调控作用。方法:以脂质体转染法将人源性BKCa通道α亚基(hSloα)转染到HEK293细胞中(HEK293-hSloα),用MTT法测定AngⅡ诱导细胞增殖的量效曲线,用免疫细胞化学方法、流式细胞术分别观察AngⅡ、IBTX及AngⅡ+IBTX对HEK293-hSloα细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达和细胞周期的影响。结果:AngⅡ可剂量依赖性诱导HEK293-hSloα细胞增殖,AngⅡ促进HEK293-hSloα细胞PCNA表达,并使S期细胞比率增加。但此作用能被BKCa通道特异性抑制剂IbTX所阻断。结论:BKCa通道可介导调节AngⅡ诱导的HEK293-hSloα细胞增殖过程。

把握任职教育特点 加强航空航天生理学实习课教学改革

任职教育是军队继续教育的一项主要内容,其在军事教育中的地位将愈加重要,军队院校改革要突出任职教育主体地位,推进任职教育深入开展。本文在把握任职教育特点的基础上对航空航天生理学实习在任职教育改革中的特点进行了归纳和总结。