β-桐酸诱导膀胱癌T24细胞凋亡机理

应用Hoechst33342染色对T24细胞进行染色,荧光显微镜下观察T24细胞经β-桐酸处理后的细胞形态学变化;应用流式细胞术分析β-桐酸对T24细胞凋亡率的影响,结果发现,β-桐酸能够诱导膀胱癌T24细胞凋亡。利用蛋白免疫印迹法分析凋亡的相关蛋白表达,发现β-桐酸能上调Bax/Bcl-2比例,并使Caspase-3表达水平上升,这为β-桐酸诱导T24细胞凋亡提供了进一步依据。β-桐酸还能够促进PPARγ的活化,且PPARγ抑制剂能够拮抗β-桐酸对JEG-3细胞生长的抑制作用和凋亡蛋白的表达影响,提示β-桐酸诱导膀胱癌T24细胞的凋亡作用与PPARγ的活化有关。

β-桐酸抑制膀胱癌T24细胞生长及其与ROS的关系

研究了β-桐酸(β-ESA)对人膀胱癌T24细胞的生长抑制作用,阐明活性氧簇(ROS)产生与生长抑制作用的关系。利用MTT法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测ROS,二硫代二硝基苯甲酸比色法(DNTB)检测谷胱甘肽(GSH)的含量。MTT结果显示,β-桐酸对T24细胞有明显的生长抑制作用,呈时间剂量相关性(P<0.05);活性氧检测表明β-桐酸可以诱导ROS的产生(P<0.05);GSH含量检测表明GSH水平显著降低(P<0.05);加入ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以拮抗β-桐酸的作用(P<0.05)。实验结果表明,β-桐酸可抑制T24细胞的生长,其机制可能与诱导ROS的产生有关。

β-桐酸对人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞凋亡的影响

目的:研究β-桐酸对人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:以不同浓度的β-桐酸处理体外培养的绒癌JEG-3细胞,应用MTT实验检测细胞相对活力;应用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测β-桐酸对JEG-3细胞的毒性作用;通过流式细胞术和蛋白免疫印迹法分析细胞凋亡的变化;活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平通过对2',7'-二氯荧光素(2',7'-dichlorofluorescein,DCF)荧光强度的检测确定;应用ROS抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-Acetyl-L-Cysteine,NAC)分析ROS在β-桐酸对JEG-3细胞活力影响中的作用。结果:β-桐酸对JEG-3细胞活力有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05);β-桐酸显著促进LDH的释放和JEG-3细胞的凋亡(P<0.05),凋亡相关蛋白Caspase-3的表达水平与Bax/Bcl-2的表达比例均上调,进一步证明β-桐酸能够诱导JEG-3细胞凋亡;β-桐酸处理后,JEG-3细胞内ROS的含量上升,NAC能够显著拮抗β-桐酸对JEG-3细胞活力的抑制作用(P<0.05)。结论:β-桐酸能够诱导JEG-3细胞的凋亡,其作用可能与ROS的产生有关。