猪瘟单克隆抗体的制备及ACI-ELISA检测猪瘟病毒的研究

本研究用猪瘟石门毒(CSFV-Shimen)免疫BALB/C小鼠,按常规单克隆抗体(McAb)技术方法制作,最终获得4株McAb,分别命名为AC9、CF8、DG5和EC9,4株McAb与基因工程CSFV E2蛋白反应结果表明:AC9、CF8和EC9是抗CSFv E2蛋白的McAb。用AC9和CF8McAb对CSFV进行抗原捕获间接ELISA试验(ACI-ELISA),通过一元McAb和二元McAb CAI-ELISA试验的比较,结果表明AC9与CF8两种McAb有协同作用,其捕获CSFV的能力比一元McAb显著提高。方阵试验结果表明:McAb和血清多抗(PcAb)的最佳工作稀释度分别为1:400和1:200。特异性试验和敏感性试验结果显示本法特异性强,敏感性高。最后用ACI-ELISA与PCR对30份病料的检测结果比较,表明ACI-ELISA与PCR检测结果相符。上述结果说明本研究所获得AC9和CF8可用作猪瘟诊断试剂盒的研制,是检测CSFV的有效方法。

广西狂犬病流行病学

狂犬病在全世界范围内流行,据WHO报告,约有90多个国家流行此病,欧美等发达国家狂犬病发病率较低,南美洲的人狂犬病主要由蝙蝠传播,而以亚洲、非洲最为严重.……

广西巴马小型猪白细胞介素17基因的克隆及其序列分析

用ConA刺激巴马小型猪的外周血淋巴细胞,22 h后提取总RNA,用RT-PCR方法成功扩增出巴马小型猪白细胞介素17(IL-17)基因,将其克隆到pMD18-T载体上,进行序列分析。结果表明,克隆的IL-17的基因序列与GenBank上登录的猪IL-17基因序列同源性为99.4%。

新城疫疫苗接种孔雀后抗体水平的检测

为了解孔雀使用新城疫疫苗免疫后的效果,分别于免疫前和免疫后15、30、60、90 d采血进行血凝抑制试验(HI),对孔雀体内的抗新城疫病毒抗体进行检测。结果显示,孔雀接种新城疫疫苗后15 d平均HI抗体水平达到高峰,并可持续到免疫接种后30 d,免疫接种后90 d,抗体平均滴度已经和免疫前的抗体水平基本持平。

狂犬病PCR-RFLP快速诊断方法的研究

从犬脑组织中提取总RNA,利用设计的一对引物N1/N2,扩增出1513bp的目的片段,通过SphI和SalI两个酶对扩增产物进行酶切,得到了457bp、833bp、233bp大小的3个预期片段,从而能在8 h内快速做出正确的诊断。试验表明,用该技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强,适合于实验室应用。