超高压技术在蛋白质改性和活性肽制备中的应用研究进展

生物活性肽可以从植物、动物、海洋资源中获得,其具有多种生物活性,如抗高血压、抗氧化、抗血栓、降胆固醇、降血压、抗菌、免疫调节、细胞调节、结合矿物质等。提高蛋白质向多肽的转化率一直以来是多肽研究的难点之一,超高压技术是一种适合于规模化生产的新型非热加工物理技术,近年来被广泛地应用于蛋白质工程,超高压技术的应用改善了蛋白质的结构和功能特性,提高了生物活性肽提取、生产的效率。本文重点综述超高压技术在蛋白质改性和肽制备方面的应用,概述超高压制备生物活性肽的类型、来源和生物活性,以期为深入应用超高压技术辅助蛋白质改性和活性肽制备提供参考。

黑米中微量营养元素Fe、Zn、Cu和黑米色素的研究

研究黑米中微量元素Fe、Zn、Cu的含量与分布,及光、温度和几种常见金属离子对黑米色素稳定性的影响。原子吸收光谱测定表明,黑米中Fe和Zn的含量分别为38610^(－5)和36010^(－6);主要富集于黑米色素中。Cu的含量均低于1010^(－6)。黑米色素水溶液(pH=3)于温度70~100℃中,随着温度升高和延长加热时间,吸光值明显降低。光照对色素稳定性的影响随时间延长而增大。Fe^(2+)、Fe^(3+)和Sn^(2+)明显的影响色素的稳定性,而Ca^(2+)、Na^+、Cu^(2+)、Zn^(2+)的作用较小,Al^(3+)和Mg^(2+)可提高黑米色素的稳定性。

山楂挥发性化合物的研究

用蒸馏-苹取法收集山楂中的挥发性化合物，经过气相色谱-质谱联用分析，在成熟山楂果实中共鉴定出32种沸点较低的挥发性化合物．占总挥发性成分的68．3％（以峰面积计）。其中主要的成分为顺-3-己烯醛、顺-3-乙酸己烯酯、a-萜品醇、糠醛、芳樟醇等。除芳樟醇外大多数挥发性成分的合量在山植果实成熟期间含量呈现增长趋势。在山植果实各成熟阶段，顺-3-己烯醛始终是含量最高的挥发性成分。顺-3-乙酸己酯在山楂果实成熟过程中含量增长速度最快，是山楂清香味的代表性化合物。山植果实中大多数挥发性化合物的形成机理可以用脂氧合酶降解途径解释。亚麻酸被认为是山楂香味主要的前体物质。

绿茶、乌龙茶、红茶中的主要组分和酚类化合物抑制脂肪氧合酶活性和抗油脂自动氧化特性的研究

绿茶、乌龙茶和红茶中含有多种抑制脂肪氧合酶及抗油脂自动氧化的有效成分。实验结果表明,其中以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的抗氧化活性最强,延缓猪油自动氧化诱导期为55.5小时,比无添加抗氧化成分的延长11倍,抑制脂肪氧合酶活性的IC_(50)值为10.0μmol/L。茶黄素单酯-2B(TFM-2B)和茶黄素双酯(TFD)比EGCG抑制脂肪氧合酶活性的效果更强,其IC_(60)值分别为0.57和0.23μmol/L。在三种茶叶的四种溶剂萃取物中,以乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性最强。本文还研究了茶叶中主要生物活性物质的分离与纯化方法,以及抗氧化活性与结构的关系。

食品天然抗氧化剂—茶多酚的抗氧化活性及机理研究

茶多酚提取物(TPE)的抗油脂氧化活性与其组分的结构有关,组分的酚羟基数愈多活性愈强,非酯型儿茶素的活性高于酯型。红外、紫外光谱观测的结果证明,在TPE-柠檬酸(CA)、TPE-CA-油脂不饱和脂肪酸-CH=CH-基团诸体系中均存在较强的氢键缔合作用。TPE组份-CA氢键缔合生成大的供氢体,能有效地延缓油脂自动氧化过程,使TPE组分在参与抗氧化作用后获得再生。油脂的不饱和脂肪酸-CH=CH-因与TPE组分和CA发生氢键缔合导致氧化活化能的提高,因而油脂不容易氧化。表征油脂氧化降解产物羟基(-OH)3450cm^(-1)和醛(2710cm^(-1))、酮(1700cm^(-1))的红外吸收峰强度,以及(-CH=CH-)_2紫外吸收强度的变化,均能显示油脂自动氧化的程度。TPE经柱层析分离得到四个酚型抗氧化组分,用红外、紫外、核磁共振和质谱结构分析证实,该四种组分为表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(EGCG)。其中,以EGC的抗氧化活性最强,相当于EGCG抗氧化活性的3～6倍。此外,还发现茶叶和某些植物的叶绿素及其降解产物亦具有一定程度的抗油脂氧化活性。

白果蛋白质的分离、纯化、理化特性及其抗氧化活性研究

选用江苏省泰兴市大佛指白果为原料,采用盐溶和盐析的方法,从白果中分离制备出清蛋白(GAP)、球蛋白(GGP)和盐溶蛋白(GSP)。白果蛋白中以清蛋白和球蛋白为主,醇溶蛋白、碱溶蛋白和复合蛋白含量很少。化学成分分析表明,制得的GAP、GGP和GSP中以GAP的蛋白质纯度高,氨基酸组成丰富、合理,属于优质蛋白质。活性试验结果表明GAP的抗氧化活性远高于GGP。

绿茶、乌龙茶、红茶的茶多糖组成、抗氧化及降血糖作用研究

目的:比较绿茶、乌龙茶、红茶的茶多糖(TPS)含量、组成、体外清除自由基以及降血糖效果。方法:选择湖北福鼎大白茶、福建水仙以及云南大叶种鲜叶,都制成绿茶、乌龙茶和红茶,提取TPS,并测定其得率,分析TPS中的中性糖、糖醛酸、蛋白质含量,观察体外清除-2O和·OH的作用以及对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的降血糖效果。结果:1. TPS得率、中性糖、糖醛酸、蛋白质含量高低依次为绿茶>乌龙茶>红茶,体外清除 -2O 和·OH 的能力大小依次为乌龙茶>绿茶>红茶。2. 在所设定的低、中、高剂量(100 mg·kg-1·d-1、300 mg·kg-1·d-1、600 mg·kg-1·d-1)下,各种茶叶TPS对DM小鼠都有显著或极显著的降血糖效果,其中在低、中等剂量下,乌龙茶、红茶TPS的降低血糖作用明显优于绿茶TPS,但在高剂量下差异不明显。3. 不同产地、品种和茶类的TPS得率、中性糖、糖醛酸、蛋白质含量高低、体外清除-2O和·OH 能力,对DM小鼠降血糖效果均不相同,其中以湖北产茶叶TPS降血糖效果最好,其次是福建茶叶,再次是云南茶叶。结论:不同产地、品种、加工工艺对茶叶的茶多糖含量、组成、体外清除自由基以及降血糖效果都有显著性影响。

大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的研究

该文以总黄酮含量和总黄酮回收率为考察指标，研究了大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的工艺。结果表明：AB8型树脂对柚皮总黄酮有较好的吸附分离性能，是分离纯化柚皮黄酮的适宜大孔树脂；AB-8型大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的最佳工艺条件为：柱体积为160mL，柚皮提取物上样量为62．5mg／mL（以湿树脂体积计），先用pH4的水淋洗，再用30％的乙醇洗脱，洗脱剂用量为2．5～3倍湿树脂体积。AB-8大孔树脂按上述确定的吸附洗脱条件可重复使用3次。柚皮黄酮经上述工艺纯化后总黄酮含量达到39．67％，总黄酮回收率为62．48％。对经AB-8大孔树脂纯化后的柚皮黄酮进行高效液相色谱（HPLC）分析发现，柚皮黄酮主要为黄酮甙类。

乌龙茶多糖对糖尿病大鼠肝肾抗氧化功能及组织形态的影响

利用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,研究乌龙茶多糖对糖尿病大鼠肝肾抗氧化功能和组织形态变化的影响。结果表明,糖尿病大鼠灌胃乌龙茶多糖4周后,肝肾SOD和GSHPX活性明显提高,MDA含量显著下降,抗氧化能力增强;茶多糖对糖尿病大鼠肝肾组织有保护作用。

白果活性蛋白的酶法水解及抗氧化活性研究

白果活性蛋白(GAP)是华中农业大学天然产物化学实验室首次从白果中分离得到的一种以清蛋白为主的且具有显著生物活性的蛋白,为扩大该蛋白在食品中的用途,提高其生物活性,研究了酶法水解制备白果肽段的方法及其抗氧化活性的变化。通过单因素分析、正交试验以及对试验结果的分析,确定了2709碱性蛋白酶水解白果活性蛋白的最佳水解条件为:底物浓度1%,pH值8.5,水解温度45℃,酶浓度7000 U/g,反应时间6 h。以F en ton体系和邻苯三酚体系检验其抗氧化活性,结果表明白果肽段较酶解前的活性蛋白,抗氧化活性有不同程度的提高,但两者均具有较强的抗氧化活性。

原花青素的药理学研究进展

综述近几年来国内外对原花青素在抗氧化、保护心血管、调节免疫活性、保护肝肾功能、抗诱变、抗病毒、抗癌、抗溃疡、抗微生物、促进毛发生长等生物药理活性的研究进展。

谷物中多酚类化合物提取方法及抗氧化效果研究

分别采用体积分数为70%的甲醇、乙醇、丙酮对米糠及高粱、甜高粱、大麦、水稻、燕麦等谷物中的多酚类化合物进行提取,并测定其抗氧化值和羟基自由基清除作用。结果表明,以70%乙醇作提取溶剂时,多酚类化合物得率最高(大麦以70%丙酮最高),其中甜高梁中多酚类化合物得率最高,达4.47%。三种不同溶剂提取的多酚类化合物均具有一定的抗氧化能力,且均高于同浓度的VC。其中70%丙酮提取的多酚类化合物抗氧化值最大,清除羟基自由基效果最佳。米糠及各种谷物对.OH的清除率和抗氧化值顺序均为:高粱>甜高粱>大麦>米糠>水稻>燕麦。

莲房原花青素对大鼠实验性心肌缺血的保护作用

目的 观察莲房原花青素 (LSPC)对实验性心肌缺血的保护作用。方法 以diltiazem (10mg·kg-1·d-1)和复方丹参 (8mg·kg-1·d-1)为阳性对照 ,LSPC治疗性口服给药 1h后 ,分别采用大鼠皮下注射异丙肾上腺素 (Iso ,40mg·kg-1·d-1,共 2d)造成心肌损伤模型和大鼠冠脉结扎引起急性心肌缺血模型。结果 LSPC可剂量依赖性拮抗Iso引起的大鼠心肌酶释放量、心肌钙含量的增加 ,缩小心肌梗死面积 ,并可缓解心肌组织病理损伤程序 ,升高超氧化物歧化酶与丙二醛的比值。结论 提示LSPC对大鼠心肌缺血损伤有一定保护作用 ,其作用可能与抗脂质过氧化。

三种温州蜜柑果实香气成分的研究

【目的】研究‘国庆1号’、‘宫川’和‘大叶尾张’3种温州蜜柑果实的香气成分及其差异。【方法】利用顶空固相微萃取技术-气质联用技术(HS-SPME-GC-MS),对3种温州蜜柑果实的香气成分进行分析测定。【结果】从3种温州蜜柑果实中分别检测到65、36和55种挥发性成分,总含量分别为584.67μg·g-1、505.29μg·g-1和494.63μg·g-1。在3种果实中有29种相同的成分。独有的香气成分中,‘国庆1号’有12种,‘宫川’有5种,‘大叶尾张’有2种。【结论】D-柠檬烯、γ-松油烯、β-月桂烯、α-蒎烯、芳樟醇和辛醛是3种果实中主要的特征香气成分。‘国庆1号’特征香气成分的含量高于‘宫川’和‘大叶尾张’的。

顶空固相微萃取—气质联用技术分析3种柑橘果实的香气成分

采用顶空固相微萃取-气质联用技术对大叶尾张温州蜜柑、锦橙和酸橙3种柑橘果实的香气成分进行分析测定。结果表明,大叶尾张温州蜜柑、锦橙和酸橙果实中分别检测出73、71和66种香气成分,各占总峰面积的85.9%、85.12%、79.82%。主要成分为烃类、酯类、醇类、酮类和醛类化合物。烃类在大叶尾张温州蜜柑中含量最高,酯类物质在锦橙中含量最高,醛类和醇类物质在酸橙中含量最高。3种果实有31种相同的香气成分,独有的香气成分,大叶尾张温州蜜柑15种,锦橙24种,酸橙17种。3种柑橘果实香气成分的种类和含量均存在差异,大叶尾张温州蜜柑的重要特征香气是γ-松油烯,丁酸乙酯和3-羟基己酸乙酯可作为锦橙的重要特征香气,芳樟醇可作为酸橙的重要特征香气物质。

一种白果清蛋白的抗衰老活性研究

目的研究白果清蛋白(GAP)对自然衰老小鼠及半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的延缓衰老作用,并探讨作用机制。方法在半乳糖致亚急性衰老模型小鼠实验中,采用物理称重方法测定了GAP对小鼠脏器的影响,采用MTT法测定体外T、B淋巴细胞增殖作用,胸腺细胞增殖法测定GAP对细胞因子白细胞介素-2(IL-2)活性的影响,采用生化方法测定了血清中SOD的活性、GSH-Px的活性和MDA含量,采用机检法分析了GAP对小鼠血像的影响;在自然衰老小鼠实验中,分别进行了对小鼠免疫器官的影响实验、碳粒廓清作用实验、血清半数溶血值(HC50)实验以及二硝基氟苯诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH)实验。结果GAP能增加半乳糖亚急性致衰老模型小鼠免疫器官的胸腺指数和脾脏指数,体外能促进活化和未活化的T、B淋巴细胞增殖及刺激脾淋巴细胞IL-2的分泌,能提高血液中白细胞的数量,增强小鼠的抗氧化能力;在自然衰老小鼠中,GAP能增加小鼠的胸腺指数和脾脏指数,增强自然衰老小鼠的巨噬细胞吞噬能力和DTH反应,促进血清溶血素的形成。结论GAP能在一定程度上延缓自然衰老小鼠及半乳糖亚急性致衰老模型小鼠的衰老过程,其作用机制可能与提高小鼠的免疫功能和抗氧化能力有关。

燕麦β-葡聚糖对正常小鼠及四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖、血脂的调节作用研究

目的:观察燕麦葡聚糖对正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖、血脂、血清胰岛素水平的影响。方法:采用四氧嘧啶造糖尿病小鼠模型,对糖尿病小鼠和正常小鼠灌胃燕麦葡聚糖,测定小鼠血糖、血脂、胰岛素水平、糖耐量指标。结果:燕麦葡聚糖对正常小鼠的血脂、体重具有调节作用,对四氧嘧啶糖尿病小鼠具有显著的降血糖、降血脂和恢复胰岛素水平的功效(p<0.01)。

高粱种子外种皮中原花青素提取、纯化及其抗氧化活性的研究

本文对我国高粱种子不同部位的原花青素的含量以及高粱主产地高粱种子外种皮中原花青素的含量进行了测定 ;用水和不同浓度梯度的甲醇、乙醇、丙酮水溶液作提取剂 ,对黑龙江产高粱种子外种皮中原花青素的提取率进行了比较 ,选用乙醇水溶液 (5 0∶5 0V/V)作提取剂 ,通过正交实验对工艺进行优化 ;采用固相萃取的方法对黑龙江产高粱种子外种皮提取物中原花青素进行纯化 ,产物纯度为 96 .0 1%,原花青素的得率为 3.76 %;同时测定了产物的抗氧化能力和清除超氧阴离子的能力。

柚皮提取物的抑菌作用

用乙醇作提取剂提取柚皮 ,将提取物经过初步分离纯化得到黄酮含量为 1 0 9%的柚皮提取物 (SPE) ,并对其抑制细菌和霉菌的作用进行了研究。用滤纸片扩散法测定了相对抑菌活性 ,采用固体稀释法确定柚皮提取物的最小抑菌浓度 (MIC) ,并进一步研究了 pH值、温度对柚皮提取物抑菌作用的影响 ,采用 3点接种法初步研究了样品对米曲霉、黑曲霉、青霉的抑制作用。结果表明 ,柚皮提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用较强 ,其MIC均为 2 5 %;对沙门氏菌的抑制作用较弱 ,其MIC >2 5 %;pH值和温度对柚皮提取物的抑菌活性均有影响 ,SPE在偏酸性条件下抑菌效果较好 ;样品经 5 0℃处理对其抑菌活性影响不大 ;但处理温度提高到 80℃和 1 0 0℃时 ,其抑菌活力明显降低。在供试的 3种霉菌中 ,柚皮提取物对黑曲霉的抑制作用最强 ,抑制率为60 5 %;对米曲霉的作用较差 ,抑制率为 34 3%。

高粱外种皮中原花青素的提取工艺及其组分鉴定

本研究旨在提取黑龙江产高粱外种皮中的原花青素并鉴定其组成。通过正交试验对提取工艺进行优化,采用柱层析、葡聚糖(SephadexLH-20)凝胶色谱进行纯化和分离,纯化和分离的原花青素产物用ESI-MS鉴定其组成。在影响提取率的4个因素温度、料液比、时间和pH值中,温度对提取率的影响最为显著,料液比也有一定影响。研究得到最佳提取工艺为:温度80℃,时间1.5h,pH值为4,料液比为1∶20;通过ESI-MS鉴定出了原花青素的组成成分的分子量,黑龙江产高粱外种皮中的原花青素以聚合度小于5的低聚体为主。