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肠道病毒71 VP1基因的原核表达及其抗血清的制备
被引量:
5
1
作者
谢维欣
武建明
+3 位作者
李杰
方永志
王洪梅
何洪彬
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期38-42,共5页
目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重...
目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备VP1抗血清,ELISA检测抗体效价。同时构建真核表达载体,利用其在真核细胞中的瞬时表达检测抗血清的特异性。结果通过克隆获得VP1原核表达载体,IPTG诱导VP1蛋白表达并纯化,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达且纯化浓度较高,将重组蛋白乳化后免疫新西兰兔3次,取血检测抗血清的效价,ELISA结果显示抗体效价为1∶64 000,利用所构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP1表达VP1对抗血清进行检测,Western blot结果表明抗血清可较好的与VP1特异性结合。结论制备具有免疫原性的VP1蛋白及其效价较高的抗血清,为进一步研究抗EV71诊断方法、血清学诊断试剂盒及抗病毒疫苗的研制奠定基础。
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关键词
肠道病毒71
VP1
抗血清
抗体效价
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职称材料
转座子在动物转基因研究中的应用
被引量:
2
2
作者
谢维欣
武建明
+3 位作者
王洪梅
高运东
仲跻峰
何洪彬
《家畜生态学报》
2011年第5期87-90,共4页
转座子是生物界中存在的一类可移动的遗传因子,它们在转基因和基因组进化中扮演了一个极其重要的角色。转座子技术已成为制备转基因动物的重要手段。论文综述了转座子及其在动物转基因领域的相关应用,并对转座子技术进行了展望。
关键词
转座子
转基因动物
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职称材料
DNA条形码技术在黑龙江地区姬小蜂科物种鉴定中的应用与分析
被引量:
1
3
作者
邵天玉
刘思竹
+5 位作者
谢维欣
刘兴龙
李志勇
王克勤
朱朝东
刘丹
《安徽农业科学》
CAS
2023年第5期78-84,88,共8页
姬小蜂科寄生蜂在农业害虫防治应用中起着非常重要的作用,但因体型小种类多,鉴定较难,导致开发利用的局限性。随着分子生物学的快速发展,通过形态学与分子生物学相结合的方法来研究小蜂总科已经成为发展趋势。利用黑龙江省的6个吸虫塔...
姬小蜂科寄生蜂在农业害虫防治应用中起着非常重要的作用,但因体型小种类多,鉴定较难,导致开发利用的局限性。随着分子生物学的快速发展,通过形态学与分子生物学相结合的方法来研究小蜂总科已经成为发展趋势。利用黑龙江省的6个吸虫塔收集到了238个姬小蜂科样本。在DNA提取之前通过形态学鉴定为14属52种。对其中60个COI和68个28S基因进行了扩增和测序,并将基因登录号提交GenBank;COI基因的登录号为MG836426~MG836501,28S基因的登录号为MH169011~MH169101。经进一步计算COI和28S基因的种内和种间遗传距离发现,COI基因的种间遗传距离差异显著,最小种间遗传距离(6.00%)远大于最大种内遗传距离(3.02%)。但是,28S基因的差异较大,许多属的种内遗传距离超过种间遗传距离,重叠现象严重。用MEGA-7.0软件进一步分析了COI基因的序列相似性和系统发育关系,结果表明:COI基因序列的聚类结果与形态学分类基本一致,而28S基因序列的聚类结果与形态学结果有较大差异。可见COI基因在姬小蜂科的分类鉴定和系统发育分析上比28S基因有很大优势,更适合姬小蜂科DNA条形码分析。
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关键词
DNA条形码
COI
28S
分子鉴定
姬小蜂科
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职称材料
我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展
被引量:
4
4
作者
邵天玉
刘兴龙
+2 位作者
刘思竹
谢维欣
王克勤
《黑龙江农业科学》
2016年第1期162-166,共5页
核型多角体病毒是昆虫病毒中最大的类群,它能够专一性地侵染并杀死一种或者几种农林害虫,并对害虫天敌、环境和人畜无害,是一种值得推广的绿色生物农药。为有效利用绿色生物农药防治病虫害,对我国近几年关于甜菜夜蛾核多角体病毒的毒力...
核型多角体病毒是昆虫病毒中最大的类群,它能够专一性地侵染并杀死一种或者几种农林害虫,并对害虫天敌、环境和人畜无害,是一种值得推广的绿色生物农药。为有效利用绿色生物农药防治病虫害,对我国近几年关于甜菜夜蛾核多角体病毒的毒力、病毒制剂研究与生产、田间应用及药效试验、增效剂研究、分子生物学等方面进行了阐述,并提出了新的展望和应用需求。
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关键词
甜菜夜蛾核多角体病毒
病毒毒力
病毒制剂研究与生产
田间应用及药效试验
增效剂研究
分子生
物学
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职称材料
题名
肠道病毒71 VP1基因的原核表达及其抗血清的制备
被引量:
5
1
作者
谢维欣
武建明
李杰
方永志
王洪梅
何洪彬
机构
东北农业大学生命科学学院
山东省农业科学院奶牛研究中心
济南军区军犬训练大队
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期38-42,共5页
基金
国家自然科学基金(31272586)
国家转基因重大专项(2009ZX08007-006B
+4 种基金
2011ZX08007-002
2011ZX08008-004)
山东省青年自然科学基金项目(ZR2010ZR029)
山东省自然科学基金(ZR2010CM012)
济南市高校院所主创新计划(201004027)
文摘
目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备VP1抗血清,ELISA检测抗体效价。同时构建真核表达载体,利用其在真核细胞中的瞬时表达检测抗血清的特异性。结果通过克隆获得VP1原核表达载体,IPTG诱导VP1蛋白表达并纯化,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达且纯化浓度较高,将重组蛋白乳化后免疫新西兰兔3次,取血检测抗血清的效价,ELISA结果显示抗体效价为1∶64 000,利用所构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP1表达VP1对抗血清进行检测,Western blot结果表明抗血清可较好的与VP1特异性结合。结论制备具有免疫原性的VP1蛋白及其效价较高的抗血清,为进一步研究抗EV71诊断方法、血清学诊断试剂盒及抗病毒疫苗的研制奠定基础。
关键词
肠道病毒71
VP1
抗血清
抗体效价
Keywords
Enterovirus 71
VP1
Antiserum
Antibody titer
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
转座子在动物转基因研究中的应用
被引量:
2
2
作者
谢维欣
武建明
王洪梅
高运东
仲跻峰
何洪彬
机构
山东省农业科学院奶牛研究中心
东北农业大学生命科学学院
出处
《家畜生态学报》
2011年第5期87-90,共4页
基金
泰山学者海外特聘专家(何洪彬)
现代农业产业技术体系建设专项资金资助
+3 种基金
山东省科技攻关课题(2009GG20002032)
国家自然科学基金(31072160)
济南市高校院所自主创新计划(201004027
201102034)
文摘
转座子是生物界中存在的一类可移动的遗传因子,它们在转基因和基因组进化中扮演了一个极其重要的角色。转座子技术已成为制备转基因动物的重要手段。论文综述了转座子及其在动物转基因领域的相关应用,并对转座子技术进行了展望。
关键词
转座子
转基因动物
Keywords
transposon element
transgenic animal
分类号
S811.5 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
DNA条形码技术在黑龙江地区姬小蜂科物种鉴定中的应用与分析
被引量:
1
3
作者
邵天玉
刘思竹
谢维欣
刘兴龙
李志勇
王克勤
朱朝东
刘丹
机构
重庆邮电大学
哈尔滨工程大学智能系统科学与工程学院智能系统与生物信息学研究所
黑龙江省农业科学院
中国科学院动物研究所动物系统学与进化重点实验室
重庆三峡职业学院农林科技系
出处
《安徽农业科学》
CAS
2023年第5期78-84,88,共8页
基金
重庆邮电大学科研启动基金项目(E012A2020571)。
文摘
姬小蜂科寄生蜂在农业害虫防治应用中起着非常重要的作用,但因体型小种类多,鉴定较难,导致开发利用的局限性。随着分子生物学的快速发展,通过形态学与分子生物学相结合的方法来研究小蜂总科已经成为发展趋势。利用黑龙江省的6个吸虫塔收集到了238个姬小蜂科样本。在DNA提取之前通过形态学鉴定为14属52种。对其中60个COI和68个28S基因进行了扩增和测序,并将基因登录号提交GenBank;COI基因的登录号为MG836426~MG836501,28S基因的登录号为MH169011~MH169101。经进一步计算COI和28S基因的种内和种间遗传距离发现,COI基因的种间遗传距离差异显著,最小种间遗传距离(6.00%)远大于最大种内遗传距离(3.02%)。但是,28S基因的差异较大,许多属的种内遗传距离超过种间遗传距离,重叠现象严重。用MEGA-7.0软件进一步分析了COI基因的序列相似性和系统发育关系,结果表明:COI基因序列的聚类结果与形态学分类基本一致,而28S基因序列的聚类结果与形态学结果有较大差异。可见COI基因在姬小蜂科的分类鉴定和系统发育分析上比28S基因有很大优势,更适合姬小蜂科DNA条形码分析。
关键词
DNA条形码
COI
28S
分子鉴定
姬小蜂科
Keywords
DNA barcoding
COI
28S
Molecular identification
Eulophidae
分类号
S433 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展
被引量:
4
4
作者
邵天玉
刘兴龙
刘思竹
谢维欣
王克勤
机构
黑龙江省农业科学院植物保护研究所
东北林业大学
黑龙江省农业科学院信息中心
出处
《黑龙江农业科学》
2016年第1期162-166,共5页
基金
农作物重大病虫害(玉米螟)专业化统防统治技术应用资助项目(2014DB3BN028)
文摘
核型多角体病毒是昆虫病毒中最大的类群,它能够专一性地侵染并杀死一种或者几种农林害虫,并对害虫天敌、环境和人畜无害,是一种值得推广的绿色生物农药。为有效利用绿色生物农药防治病虫害,对我国近几年关于甜菜夜蛾核多角体病毒的毒力、病毒制剂研究与生产、田间应用及药效试验、增效剂研究、分子生物学等方面进行了阐述,并提出了新的展望和应用需求。
关键词
甜菜夜蛾核多角体病毒
病毒毒力
病毒制剂研究与生产
田间应用及药效试验
增效剂研究
分子生
物学
Keywords
Spodoptera pteraexigua multicapsid nucleopolyhedrovirus
virulence of the virus
virus preparation research and production
field application and efficacy trials
synergistresearch
molecular biology
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肠道病毒71 VP1基因的原核表达及其抗血清的制备
谢维欣
武建明
李杰
方永志
王洪梅
何洪彬
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
下载PDF
职称材料
2
转座子在动物转基因研究中的应用
谢维欣
武建明
王洪梅
高运东
仲跻峰
何洪彬
《家畜生态学报》
2011
2
下载PDF
职称材料
3
DNA条形码技术在黑龙江地区姬小蜂科物种鉴定中的应用与分析
邵天玉
刘思竹
谢维欣
刘兴龙
李志勇
王克勤
朱朝东
刘丹
《安徽农业科学》
CAS
2023
1
下载PDF
职称材料
4
我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展
邵天玉
刘兴龙
刘思竹
谢维欣
王克勤
《黑龙江农业科学》
2016
4
下载PDF
职称材料
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