葡萄籽原花青素对高精料育肥绵羊肝脏炎症反应、抗氧化功能的影响及代谢组学分析

本试验旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料育肥绵羊肝脏形态结构、肝脏功能、抗氧化功能及炎症反应的影响,通过非靶向代谢组学分析肝脏代谢变化。试验选取48只日龄、体重[(22.75±1.20)kg]相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每组12只羊。基础饲粮精粗比为70∶30,对照组饲喂基础饲粮,各试验组在饲喂基础饲粮的同时分别再每天补饲10(LGSPs组)、20(MGSPs组)、40 mg/kg BW GSPs(HGSPs组)。试验羊单栏饲养,自由采食、饮水,GSPs于每次晨饲前单独混合于100 g基础饲粮中饲喂。试验期60 d,其中预试期15 d。结果表明:1)对照组绵羊肝细胞肿胀、空泡化严重,各GSPs添加组肝脏组织损伤均有不同程度缓解。2)随着GSPs添加水平的提高,绵羊血清总蛋白和白蛋白含量线性升高(P<0.05),血清天冬氨酸转氨酶和谷丙转氨酶活性线性降低(P<0.05);肝脏组织总抗氧化能力(T-AOC)呈二次曲线变化,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性线性升高,丙二醛(MDA)含量线性降低(P<0.05);肝脏组织中髓过氧化物酶(MPO)活性线性降低,炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量线性降低(P<0.05)。与对照组相比,MGSPs和HGSPs组血清脂多糖(LPS)和脂多糖结合蛋白(LBP)含量显著降低(P<0.05)。3)随着GSPs添加水平的提高,肝脏组织中甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量线性降低(P<0.05)。4)非靶向代谢组学结果表明,MGSPs组与对照组间共有99种差异代谢物,其中67种脂类物质。99种差异代谢产物中71种显著上调,28种显著下调。共有差异代谢物富集在癌症中的胆碱代谢、甘油磷脂代谢、逆行内源性大麻素信号、自噬-其他/动物等潜在靶向通路。综上所述,GSPs可以提高高精料饲粮条件下绵羊肝脏抗氧化功能,降低炎症因子含量,并可能通过调节肝脏脂质代谢、胆碱代谢及肝细胞自噬共同应答肝脏炎性反应和氧化应激,缓解炎性损伤。

葡萄籽原花青素对饲喂高精料绵羊结肠上皮屏障的影响及作用机制研究

【目的】探究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料绵羊结肠上皮屏障的影响及通过Nrf2/ARE通路保护结肠上皮损伤的作用机制。【方法】选取48只120日龄、体重(22.75 kg±1.20 kg)相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每组12只羊。各组试验羔羊基础饲粮中GSPs的添加量分别为0(对照组,CON)、10(10GSPs组)、20(20GSPs组)、40(40GSPs组)mg/kg BW。试验期60 d,其中预试期15 d,正试期45 d。正试期结束次日早晨每组屠宰6只羊,采集结肠组织进行形态学和炎性细胞浸润分析,检测结肠组织白细胞介素2(IL-2)、IL-4、前列腺素E2(PGE2)等炎症因子水平及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)等相关基因和蛋白表达量。【结果】(1)对照组羔羊结肠黏膜上皮细胞严重缺失,固有层裸露,肠腺排列疏松,间隙增宽,紧密连接蛋白缺失、受损,而20GSPs和40GSPs组羔羊结肠形态结构和紧密连接蛋白分布表达正常;(2)随着GSPs添加量的升高,羔羊结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)酶活性及一氧化氮(NO)、PGE2、IL-2水平线性降低(P<0.05);(3)与对照组相比,20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中Nrf2、OH-1基因和蛋白表达量均显著升高(P<0.05),40GSPs组结肠组织中GPx4基因表达量升高(P<0.05);(4)与对照组相比,20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中Toll-样受体4(TLR4)基因和蛋白表达量均显著降低(P<0.05),40GSPs组结肠组织中核因子κB(NF-κB)P65基因和蛋白表达量均显著降低(P<0.05);20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因和蛋白及IL-1β蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】GSPs可以通过激活Nrf2通路,抑制NF-κB炎症信号通路活化,降低结肠组织局部炎症,缓解饲喂高精料绵羊结肠上皮组织损伤。