EMS诱变广金钱草突变体库的构建

目的:利用甲基磺酸乙酯(EMS)溶液诱变处理广金钱草种子,对M_1和M_2代群体单株在茎、叶、分枝等表型变异进行观察记录,并鉴定和筛选突变体。方法:以广金钱草种子为材料,用不同EMS浓度的磷酸缓冲液(0%,0.5%,0.6%,0.7%,0.8%)分别处理广金钱草种子4、8、12 h,使其发生诱变,得到半致死剂量和处理时间,再用该半致死剂量和处理时间创建突变材料,观察并统计诱变后植株表型性状的变异。结果:EMS诱变广金钱草种子的半致死剂量浓度为0.6%,处理时间为4 h。初步鉴定了M_1代658个单株和M_2代1 131个单株的形态学性状,共获得759份发生一个到多个性状变异的突变株,主要包括叶、株高、分枝数、株型以及其他性状变异。结论:初步构建了EMS诱变广金钱草突变体库,得到了对种植生产有利的变异性状,为优良品种选育提供了基本材料。

胶孢炭疽菌粗毒素对铁皮石斛生长的影响

【目的】探究胶孢炭疽菌粗毒素对铁皮石斛幼苗生长状况的影响,为铁皮石斛抗性突变体筛选和培育提供前期基础。【方法】添加不同浓度胶孢炭疽菌粗毒素的MS培养基对铁皮石斛幼苗进行培养,观察粗毒素对幼苗生长的影响,并初步筛选适宜抗性选择压。【结果】胶孢炭疽菌粗毒素浓度在5%~15%(体积分数)范围内,对铁皮石斛株高、茎粗、新增芽数、根数、鲜重的增长起促进作用,其中以浓度为5%(体积分数)时促进作用最为显著;粗毒素浓度在35%~40%(体积分数)范围内对铁皮石斛株高、叶片数、新增芽数、根数、鲜质量的增长起到抑制作用;粗毒素浓度在20%(体积分数)时,铁皮石斛出现开花现象,且花的形态出现变异现象。【结论】胶孢炭疽病菌粗毒素具有生物活性,且有一定的毒性,可以考虑代替病原菌作为离体筛选铁皮石斛抗炭疽病突变体的选择剂,但筛选铁皮石斛抗性突变体的抗性选择压还有待进一步研究。

植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体生长情况的影响

目的探究植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体生长情况的影响,并对其培养产物进行粗多糖、粗三萜含量及抗氧化活性测定研究。方法采用皿式培养法培育牛樟芝,超声提取培养产物,选用苯酚-硫酸法测定粗多糖含量、香草醛-冰醋酸法测定粗三萜含量,并以DPPH自由基、ABTS自由基的半数清除浓度(IC_(50))作为培养产物抗氧化活性的评价指标。结果菌种活化方法为培养20 d后靠近菌丝层边缘取样,可获得生长活力好的接种原料;改良PCA培养基上牛樟芝菌丝长势较好、粗三萜及粗多糖含量高;以改良PCA培养基为基础,向其中添加0.5g/L木质素时菌丝生长最快,菌丝层直径为对照组的1.19倍;当IBA添加质量浓度为0.5 mg/L时,菌丝体干质量较对照组增加了89.51%,粗多糖产量较对照组提升了130.57%,远高于其他组别,与此同时,菌丝体粗三萜含量及产量也显著提升,其含量较对照组提高了61.31%,粗三萜产量达到133.24mg/L;添加牛樟树粉末0.5 g/L时,菌丝体粗三萜含量最高,为5.62%,较对照组提升了84.26%;此外,向培养基中加入植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体的抗氧化能力提升有一定作用,整体来说加入不同物质后实验组抗氧化活性良好。结论通过向改良PCA培养基中添加植物激素及木质素,可有效促进牛樟芝菌丝体生长、提高活性成分含量并提升其抗氧化活性。

基于GC-MS代谢组学的铁皮石斛与胶孢炭疽菌互作机制研究

目的利用代谢组学技术探讨与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物及其可能的作用机制,为铁皮石斛抗病品种选育提供依据。方法分别采集铁皮石斛正常叶片与经胶孢炭疽菌处理的感病叶片,经样本前处理、GC-MS分析、生物信息学分析等找出差异代谢物,初步探讨参与病程的差异代谢物并分析代谢通路。结果成功建立了各分析组的多维统计分析模型,选取VIP>1.0的分散点为潜在差异物质,同时结合单维统计分析(test)中P<0.05为标准加以验证,从鉴定出的305个代谢物中共筛选出84个差异代谢产物,被认为是病程相关代谢物;通过对差异代谢物进行通路富集分析,共有34个差异代谢物参与了代谢途径,且获得的正常-感病代谢通路具有显著意义。结论基于GC-MS技术对铁皮石斛不同处理组(正常/感病)样本进行了代谢组学分析,并找出与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物,可为从分子水平研究铁皮石斛病害及培育抗病品种奠定基础。