苦参碱改构体X调控Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9蛋白表达诱导人鼻咽癌CNE1凋亡的研究

目的研究苦参碱改构体X体外诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡的机制。方法用不同剂量改构体X处理CNE1细胞48h,透射电镜观察CNE1细胞超微结构变化;Westernblot检测改构体X对CNE1细胞内Caspase-3,-8,-9蛋白表达的影响。结果苦参碱改构体X作用CNE1 48 h后,细胞出现皱缩,核内异染色质明显增多,核周隙增大,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态,高剂量组较低剂量组细胞凋亡程度更加明显;Western blot检测显示,与阴性对照组相比,除低剂量改构体X对Caspase-8无上调作用外,其他剂量组可上调凋亡相关蛋白Caspase-3,-8,-9的表达(P<0.01),且具有剂量依赖性。结论苦参碱改构体X可通过上调促凋亡蛋白Caspase-3,-8,-9的表达诱导CNE1细胞凋亡。

苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡相关基因表达的影响

目的:观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡相关基因表达的影响。方法:20只裸鼠皮下接种CNE2,建立移植瘤模型,成瘤后,随机分成4组,每组5只。苦参碱高、低剂量组分别腹腔注射100、50mg/kg苦参碱,阳性对照组腹腔注射顺铂2 mg/kg,阴性对照组给予生理盐水。给药7次后,应用体内抑瘤实验测定抑瘤率,分别采用real-time PCR法和Western blot法检测移植瘤组织中bax、bcl-2、caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果:阳性对照组和苦参碱低、高剂量组抑瘤率分别为51.6%和26.4%、43.2%。4组间移植瘤组织中bax、bcl-2、caspase-3的mRNA和蛋白表达差异有统计学意义(F=3.751、16.113、3.918和26.500、9.771、12.255,P<0.05);与阴性对照组比较,阳性对照组和苦参碱高、低剂量组bax mRNA和蛋白表达及阳性对照组、苦参碱高剂量组caspase-3 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),bcl-2 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。结论:苦参碱可通过调节CNE2移植瘤组织中凋亡相关基因的表达抑制肿瘤的生长。

鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎中IL-1β和内毒素的表达与咽鼓管功能障碍的关系

目的分析鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎中IL-1β与内毒素表达,探讨其发病机制以及与咽鼓管功能障碍的关系。方法采集中耳积液行需氧菌和兼性厌氧菌培养以及药敏试验,同时应用酶联免疫吸附反应技术及鲎试验动态浊度法检测中耳积液和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及内毒素的表达。结果 (1)细菌培养:普通组中有1例细菌培养为阳性,为鲍曼不动杆菌,放疗组有2例阳性,均为金黄色葡萄球菌;(2)内毒素:普通组及放疗组的中耳积液内毒素均显著高于各自血清中内毒素的表达值(P<0.05),且中耳积液内毒素含量放疗组高于普通组(P<0.05);(3)普通组及放疗组中耳积液的IL-1β、TNF-α表达均显著高于各自血清的表达值(P<0.05),但中耳积液中放疗组与普通组差异无统计学意义(P>0.05);(4)放疗组中耳积液IL-1β表达值在咽鼓管功能障碍形态不全阻塞、完全阻塞、完全闭锁3组对比中具有显著性差异(P<0.05)。结论鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎的特点为细菌培养低阳性率和局部中耳腔积液内毒素、细胞因子IL-1β、TNF-α的高表达率;多种因素共同作用导致其迁延难愈,内毒素可能是重要因素;放疗后咽鼓管功能形态障碍程度与中耳积液IL-1β表达值密切相关。

脑出血、脑梗死所致感音神经性耳聋临床分析(附2例报告)

脑出血、脑梗死可导致感音神经性耳聋，但部分患者就诊时可能因其脑部病变的病情危急且其他表现突出，其听力变化易被掩盖或者未引起医师的足够重视。本文回顾性分析2例患者因脑出血、脑梗死所致感音神经性耳聋的临床特点，以提高对不同中枢病变所致耳聋的认识，减少误诊，从而及时采取正确的治疗方案。

难治性变应性鼻炎手术治疗的进展

变应性鼻炎的患病率呈现逐年快速上升的趋势,鼻内镜外科手术成为治疗难治性变应性鼻炎的重要辅助手段。本文对治疗难治性变应性鼻炎的手术进展进行综述,综合分析与评价不同的手术方式,为难治性变应性鼻炎患者提供精准、安全、高效的治疗方案。

树鼩听性脑干反应的探讨

目的探讨树鼩听性脑干反应的波形特征及其各频率的反应阈。方法运用美国TDT SystemⅢ诱发电位系统对树鼩进行短音(1、2、4、8、12、16kHz)测试,记录各自不同强度下ABR波形。结果短音诱发ABR波形图具有较高的可重复性和可靠性;随频率(1、2、4、8、12、16kHz)和强度(100～20dB SPL)增加,Ⅰ～Ⅵ波的潜伏期逐渐延长。结论短音诱发的ABR具有频率特异性,其反应阈在相应频率的客观听力评估中具有应用价值。

鼻内镜下对不同类型脑脊液鼻漏修补术的临床疗效分析

目的探讨鼻内镜手术下利用自体筋膜和组织对不同类型脑脊液鼻漏修补术的诊治策略和疗效。方法回顾性分析我科2015年6月~2021年1月收治的31例不同类型(病因有外伤性、医源性、自发性)脑脊液鼻漏患者的临床资料,分析其相关病史、诊治方案及手术疗效,修补材料均采用自体大腿阔筋膜、肌肉及脂肪组织,分三层外置法封堵漏口,具体手术方式依据漏口实际情况而定;术后抗炎、降低颅压及卧床等处理。结果31例患者中,26例一次性修补成功;2例(病因为自发性)二次复发再次手术修补成功;3例(2例病因为自发性,1例病因为外伤性)术后二次复发,二次再修补失败转省外医院诊治;颅内感染1例,经过积极保守治疗后痊愈出院。所有病例随访6~12个月。结论术前及术中探查找到漏口的准确位置、合适的手术方式及修补材料是手术成功的关键因素。经鼻内镜脑脊液鼻漏修补手术具有安全、微创、复发率低等优点。自发性脑脊液鼻漏准确寻找漏口在影像学加手术探查下仍有一些病例难度较大,术后复发率也较高。

树鼩听骨链解剖测量分析

目的测量树鼩听骨链数据并分析中耳增压情况,为树鼩耳科实验提供依据。方法借助解剖显微镜对树鼩听骨链结构进行解剖观察及拍照测量,并对所得数据进行相关性分析。结果测量树鼩锤骨、砧骨、镫骨听骨链数据等;对树鼩锤骨柄长与砧骨长脚长度,锤骨全长与砧骨长脚长度,鼓膜面积与镫骨底板面积进行相关性检测发现,三者之间存在显著相关性。结论树鼩听骨链结构及中耳增压情况均与人有较大的相似性,为利用树鼩开展耳科研究提供参考依据。

苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制作用及凋亡相关基因Caspase表达的研究

目的:观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制及对凋亡相关基因Caspase-3 mRNA及Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达的影响,探讨苦参碱抑制人鼻咽癌细胞增殖和诱导其凋亡的机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00g/L)苦参碱对CNE2细胞增殖的影响;采用荧光PCR法检测不同浓度(0、0.75、1.00、1.50g/L)苦参碱处理48h后Caspase-3mRNA的变化;Western Blot检测Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的变化情况。结果:苦参碱对CNE2细胞具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性;能上调CNE2细胞Caspase-3mRNA和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达,且呈浓度依赖性。结论:苦参碱能抑制CNE2细胞的生长,呈浓度依赖性。其作用与上调CNE2细胞Caspase-3mRNA和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达,启动Caspase级联反应密切相关。

苦参碱对鼻咽癌细胞凋亡及凋亡相关基因p53的表达研究

目的:探讨苦参碱对体外培养的人鼻咽癌细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因p53 mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨苦参碱诱导人鼻咽癌细胞凋亡的可能机制。方法:采用MTT法检测不同浓度苦参碱(0、0.25、0.5、1、1.5、2 mg/ml)对CNE1、CNE2细胞增殖的影响;采用荧光定量PCR法检测这些浓度的苦参碱处理48 h后CNE2细胞p53 mRNA的变化;Western Blot检测其蛋白的变化情况。结果:MTT结果显示苦参碱具有抑制CNE1、CNE2细胞体外增殖作用,其抑制率存在浓度、时间依赖性。荧光定量PCR及Western Blot检测结果显示,苦参碱抑制CNE2细胞p53 mRNA和蛋白的表达,且亦呈浓度依赖性。结论:苦参碱抑制CNE2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,呈现浓度、时间依赖性,其作用与抑制CNE2细胞中p53基因和蛋白的表达密切相关。

苦参碱改构体X对人鼻咽癌CNE1细胞的凋亡诱导作用

目的:探讨苦参碱改构体X体外诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡的作用与机制。方法:用0,29,58,116,232,464μmol.L-1不同剂量改构体X处理对数生长期CNE1细胞48 h,采用MTT法检测苦参碱改构体X对CNE1细胞增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测改构体X对CNE1凋亡率和细胞周期的影响,Western blot法检测改构体X对CNE1细胞内Bcl-2、Bax及p53等凋亡过程中相关蛋白表达的影响。结果:苦参碱改构体X作用CNE1 48 h后,MTT结果显示,改构体X对CNE1细胞增殖有抑制作用并具有浓度依赖性;流式细胞仪分析结果显示,改构体X 58,116μmol.L-1浓度组细胞凋亡率高出苦参碱组70.02%,75.73%,高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01);细胞周期测定结果显示改构体X各剂量组均可不同程度地将CNE1细胞周期抑制在G1期,与阴性对照组相比具差异显著性(P<0.05,P<0.01);Western blot检测表明,苦参碱改构体X作用CNE1 48 h后,凋亡相关蛋白Bcl-2降低,Bax,p53增加,与阴性对照组相比有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:苦参碱改构体X在体外可诱导CNE1细胞凋亡,其促凋亡机制可能与阻滞细胞周期、增加促凋亡蛋白Bax和p53表达并降低抑制凋亡蛋白Bcl-2表达有关。

水杨酸钠对螺旋神经节Caspase 3mRNA及蛋白表达的影响

目的:水杨酸是阿司匹林的活性成分,是导致耳鸣的主要原因。而本实验主要探讨水杨酸钠对耳蜗螺旋神经节(SGN)调亡相关基因Caspase 3的mRNA及蛋白表达水平的影响,并初步探讨水杨酸钠对耳蜗毒性的机制。方法:分离取出大鼠蜗轴螺旋管,用酶消化后原代培养SGN,采用荧光定量PCR法检测5 mM水杨酸钠处理前后(1 h,3 h,6 h)Caspase 3 mRNA的变化,WesternBlot检测其蛋白的变化情况。结果:5 mM水杨酸钠处理细胞后1 h,Caspase 3 mRNA表达水平没有明显改变(P>0.05),但是当水杨酸钠处理3 h后,其表达水平明显上调(P<0.05),并呈时间依赖关系。而其蛋白表达水平也同样明显升高(P<0.05)。结论:本实验取蜗轴螺旋管进行原代培养,获得较多的SGN,而水杨酸钠能上调这些原代培养SGN的Caspase 3 mRNA及蛋白的表达,导致SGN调亡,这对水杨酸钠耳蜗毒性的研究有一定应用价值。

广西五地区25万自然人群EB病毒VCA-IgA联合EBNA1-IgA鼻咽癌筛查结果分析

目的对广西五地南宁市青秀区、崇左市江州区、桂平市、宾阳县以及田东县30~59岁自然人群共248437人进行鼻咽癌血清学筛查,并对危险人群进行鼻咽活检以期促进广西鼻咽癌的早诊早治。方法以上5地各级卫生部门对所在片区30~59岁自然人群进行登记造册,ELISA法检测筛查自然人群血清中EBNA1-IgA和VCA-IgA的rA值,并将结果代入联合筛查公式计算P值,通过P值大小将人群分为鼻咽癌高危人群、EB病毒(EBV)阳性人群和EBV阴性人群。将血清学阳性+家族史者,或者头颈部体检可疑鼻咽癌者也归为高危人群。高危人群及阳性人群均行鼻内镜检查,鼻内镜下可疑鼻咽癌者进行鼻咽部活检以确诊鼻咽癌。采用SPSS17.0对数据进行统计学分析。结果筛查自然人群248437人检出EBV阳性15914人,阳性率6.41%(15914/248437),95%CI为6.31%~6.50%;鼻咽癌高危人数7487人,高危率3.01%(7487/248437),95%CI为2.95%~3.10%。检出鼻咽癌26例,鼻咽癌检出率为10.5/10万(26/248437),95%CI为6.4/10万~14.5/10万,其中阳性人群为50.00%(13/26),高危人群为50.00%(13/26);阳性人群鼻咽癌检出率为82.3/10万(13/15901),95%CI为37.3/10万~126.1/10万;高危人群鼻咽癌检出率为173.9/10万(13/7474),95%CI为79.3/10万~268.0/10万;男性鼻咽癌检出的高峰年龄为40~44岁,女性为50~54岁。结论通过ELISA法检测筛查自然人群血清中EBNA1-IgA和VCA-IgA从而对人群进行分层的筛查方案可以提高广西地区鼻咽癌的检出率。高危人群中鼻咽癌风险更高,建议增加随访频次。若筛查重点放在男性40~44岁女性50~54岁人群中,可以大幅提高鼻咽癌检出率。

鼻咽癌放疗后颈部血管假性动脉瘤诊疗进展

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma）是中国南方地区常见的恶性肿瘤〔1〕,对放疗具有高度敏感性且治疗效果良好〔2〕。大宗病例报道,早期鼻咽癌5年生存率约达80%〔3〕。随着生存率的提高,放疗后导致的包括鼻咽部大出血等〔4-6〕各种并发症就越发突出,成为影响患者生存质量的重要因素。

苦参碱改构体X对人鼻咽癌细胞CNE2裸鼠移植瘤的抑制作用研究

目的:探讨苦参碱改构体X对人鼻咽癌细胞CNE2裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE2建立裸鼠皮下移植瘤模型,行苦参碱改构体X体内抑瘤实验;实时荧光定量PCR及Western Blot法分别观察移植瘤中Bax、Bcl-2及Caspase3在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果:苦参碱改构体X中、高剂量组抑瘤率分别为32.55%和44.89%,具有明显的抑瘤作用;荧光定量PCR及Western Blot法结果显示,苦参碱改构体X可上调Bax、Caspase3mRNA和蛋白的表达水平,下调Bcl-2mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性,其中高剂量组变化明显(P<0.05)。结论:苦参碱改构体X对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用;可能与调节Bax/Bcl-2及Caspase3的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡等作用有关。