溶血对液相色谱串联质谱检测血浆中儿茶酚胺及其代谢产物的影响

目的探讨溶血对液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆儿茶酚胺[肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)]及其代谢产物[变肾上腺素(MN)、去甲变肾上腺素(NMN)、3-甲氧基酪胺(3-MT)]的影响。方法在正常血浆样本和轻度溶血[血红蛋白(Hb)为0.75 g/L]、中度溶血(Hb分别为1.50、3.00 g/L)、重度溶血(Hb为7.50 g/L)样本中分别加入儿茶酚胺及其代谢产物的标准品溶液,制成低值和高值样本。将上述样本采用弱阳离子固相萃取板进行前处理,每份样本重复检测3次。采用LC-MS/MS检测前处理提取液中的儿茶酚胺及其代谢产物的水平。结果无论MN、NMN、3-MT是高值还是低值,除3-MT在重度溶血(Hb为7.50 g/L)时未能被检测到外,其他不同溶血程度样本MN、NMN、3-MT检测结果与正常样本比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。高值3-MT、MN、NMN 3次检测结果的变异系数(CV)均<15%。低值3-MT在中度溶血(Hb为1.50 g/L)时、低值NMN在重度溶血(Hb为7.50 g/L)时,3次检测结果CV均>15%。对于Hb为3.00 g/L的中度溶血样本,无论DA、E、NE是高值还是低值均无法检出;当Hb≤1.50 g/L时,E、NE和DA低值样本的检测结果与正常样本比较,差异无统计学意义(P>0.05);DA和NE高值样本的检测结果与正常样本比较,差异无统计学意义(P>0.05);而E高值样本的检测结果在轻度溶血(Hb为1.5 g/L)时明显降低(P<0.05)。高、低值DA、E、NE在Hb≤1.50 g/L时3次检测结果的CV均<15%。结论中、重度溶血对LC-MS/MS检测儿茶酚胺及其代谢产物有不同程度的影响。

液相色谱串联质谱法检测法布雷病样本的质量控制研究（英文）

法布雷病(FD)是一种罕见的X连锁隐性遗传的溶酶体贮积病.用于检测FD的常用生物学标志物之一是Lyso-GB3,它是一种脱乙酰基的神经酰胺三己糖苷,通常通过高灵敏和特异性的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行分析.由于LC-MS/MS技术的复杂性,中国大多数医院仍无法自行建立LC-MS/MS对FD进行高效可靠的诊断.患者的样本需要在当地医院采集,然后送到中心实验室进行LC-MS/MS分析.样本经过漫长的运输和储存过程,可能会影响样本质量,从而影响诊断的准确性.我们首先建立并验证了一种新的LC-MS/MS方法以保证FD样本质量,研究了分析前变量对Lyso-GB3检测的影响.这些分析前变量包括血浆的储存温度和时间、血浆的冻融循环、血浆的溶血程度、全血的储存温度和时间,以及离心温度.最后,我们分析了86个FD样本和100个正常人样本,并对Lyso-GB3浓度和与FD疾病分型的关系进行了相关性研究.结果显示,当血浆在20℃下储存时,Lyso-GB3浓度在4 d后开始下降.此外,溶血会显著影响FD样品的质量,重度溶血导致Lyso-GB3浓度下降了57.8%,其他分析前变量对FD样品质量影响不大.本方法在使用分析前标准化操作流程下,筛查FD的灵敏度和特异度为100%,确保了检测的正确性;当Lyso-GB3浓度的cut-off值为55.15μg/L,鉴别经典型、非经典型患者的灵敏度和特异度为71%和100%,ROC曲线下面积为0.83.我们的研究结果有助于医学实验室操作程序的标准化,以保证FD样本的质量,并为临床判定中国法布雷病的分型提供依据.

肾上腺静脉取血联合高效液相色谱-串联质谱法分析肾上腺激素代谢谱在原发性双侧肾上腺大结节增生诊断中的应用

目的探讨肾上腺静脉取血联合高效液相色谱-串联质谱法分析肾上腺激素代谢谱在原发性双侧肾上腺大结节增生中的作用。方法对1例2019年7月于解放军总医院第一医学中心内分泌科就诊的双侧肾上腺占位病人进行临床分析,行内分泌激素检查、影像学分析、肾上腺静脉取血等,通过高效液相色谱-串联质谱法测定肾上腺局部和外周血肾上腺激素代谢谱情况。结果病人血清皮质醇水平轻度升高,促肾上腺皮质激素水平低,小剂量地塞米松抑制试验未被抑制,肾上腺静脉取血得到的肾上腺局部促肾上腺皮质激素水平高于外周血,同时肾上腺激素代谢谱测定分析提示肾上腺局部类固醇激素水平升高,而周围血正常水平。结论肾上腺静脉取血联合高效液相色谱-串联质谱法分析肾上腺激素代谢谱在双侧肾上腺大结节增生的诊断、治疗指导和病因学研究中有一定的帮助。