TAX1结合蛋白1加重苯肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡

目的探究TAX1结合蛋白1(TAX1BP1)对苯肾上腺素(PE)诱导的原代新生大鼠心肌细胞(NRCM)凋亡的影响。方法将培养的NRCM分为正常组、模型组(PE 50μmol/L)、阴性组、转染组(转染TAX1BP1过表达腺病毒)、对照组、刺激组(转染TAX1BP1过表达腺病毒后,用PE 50μmol/L)。采用α肌动蛋白免疫荧光染色观察NRCM面积,TUNEL染色检测NRCM凋亡程度,免疫印迹法检测TAX1BP1及促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达。结果模型组NRCM中TAX1BP1表达较正常组明显升高(0.97±0.16 vs 0.69±0.06,P<0.05)。与阴性组相比,转染组NRCM中的TAX1BP1表达上调(0.98±0.08 vs 0.65±0.07,P<0.05);与转染组相比,刺激组NRCM中的TAX1BP1表达上调(1.24±0.06 vs 0.98±0.08,P<0.05)。与阴性组比较,对照组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);与对照组比较,刺激组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。结论TAX1BP1可促进PE诱导的心肌细胞肥大,通过增加Bax表达以及抑制Bcl-2来加重PE诱导的心肌细胞凋亡。

DNA甲基转移酶与心脏纤维化的研究进展

心脏纤维化在心血管疾病的发生、发展中起到重要作用,长期的心脏纤维化可引起心肌僵硬、心功能障碍,预后不良。DNA甲基转移酶是DNA甲基化过程中的关键酶,参与调控基因的转录过程。已有的研究发现部分基因的DNA异常高甲基化在心脏纤维化中发挥重要作用。本文主要对DNA甲基转移酶对心脏纤维化的影响以及DNA甲基转移酶作为治疗心脏纤维化的新靶点的有关研究进展进行归纳与讨论,希望能够加深对DNA甲基化与心脏纤维化发生、发展的有关机制的理解,并为发现心脏纤维化的新治疗靶点提供新的方向。

46XY性发育异常并发无性细胞瘤复发再治疗1例

性发育异常是一组染色体、性腺及附属性器官发育异常的先天性疾病,46XY性发育异常是其中一种类型,需要多学科诊疗。46XY性发育异常患者合并无性细胞瘤少见,无性细胞瘤是一种起源于原始生殖细胞的恶性肿瘤,好发于年轻女性,综合治疗后预后较好。本文报道2021年3月23杭州市临平区第一人民医院收治的1例46XY性发育异常并发无性细胞瘤复发后再治疗患者,分享其诊治经验,以期为加强妇产科医生对性发育异常疾病的识别及诊断和无性细胞瘤的规范治疗提供帮助。

高迁移率族蛋白A1在转化生长因子β诱导的人脐静脉内皮间质转化中的作用

目的研究高迁移率族蛋白(HMG)A1在转化生长因子β(TGF-β)诱导的人脐静脉内皮间质转化中的作用机制。方法选择人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分组:(1)空白模型组和空白对照组,分别采用10 ng/ml的TGF-β和等体积PBS刺激72 h;(2)对照1组[携带绿色荧光蛋白的腺相关病毒(AAV9-GFP)+PBS],HMGA1组(AAV9-HMGA1+PBS),模型1组(AAV9-GFP+TGF-β),实验1组(AAV9-HMGA1+TGF-β),各组细胞进行AAV9-HMGA1或AAV9-GFP转染后,给予TGF-β或PBS刺激72 h;(3)对照2组[阴性对照siRNA(si-NC)+PBS],si-HMGA1组[靶向HMGA1的小干扰RNA(si-HMGA1)+PBS],模型2组(si-NC+TGF-β),实验2组(si-HMGA1+TGF-β),各组细胞转染后,给予TGF-β或PBS刺激72 h。检测各组HMGA1、CD31、CD34、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白、β连环蛋白(β-catenin)表达。结果与空白对照组比较,空白模型组HMGA1蛋白表达明显增加(0.33±0.03 vs 0.19±0.01,P<0.05)。HMGA1组HMGA1蛋白表达水平明显高于对照1组(0.73±0.09 vs 0.19±0.02,P<0.05)。与模型1组比较,实验1组HUVEC的CD31荧光强度明显减弱,波形蛋白荧光强度明显增强(P<0.05)。与模型1组比较,实验1组CD31和CD34蛋白表达明显降低,α-SMA、波形蛋白及β-catenin表达显著上调(P<0.05)。与对照2组比较,si-HMGA1组HMGA1蛋白表达明显下调(P<0.05);与模型2组比较,实验2组CD31表达上调,α-SMA和β-catenin表达下调(P<0.05)。结论TGF-β可以诱导HUVEC的HMGA1表达上调,并且HMGA1通过Wnt/β-catenin信号通路促进内皮间质转化。

术中意外发现克罗恩病的外科治疗及预后

目的探讨术中意外发现克罗恩病的外科治疗及预后。方法采用回顾性队列研究方法。收集2012年1月至2016年6月浙江大学医学院附属邵逸夫医院收治的81例术中意外发现克罗恩病并首次确诊的患者的临床资料。31例我院手术患者根据其临床表现完善相关检查后行相关手术治疗，50例术后转诊患者根据其具体情况行相关治疗。观察指标：（1）总体手术情况：手术指征、手术方式、术后并发症。（2）后续治疗：术后用药。（3）随访情况：克罗恩病相关再次手术（排除因首次手术并发症再手术、造口还纳和肛瘘手术等）。采用门诊及电话方式进行随访，了解患者克罗恩病相关再次手术情况，随访时间截至2016年8月。正态分布的计量资料采用面±s表示，偏态分布计量资料采用M（范围）表示。计数资料采用Fisher确切概率法。采用Kaplan—Meier法计算再次手术率。结果（1）总体手术情况：①手术指征：81例患者中，手术指征包括“急性阑尾炎”23例，消化道梗阻22例，消化道穿孔17例，腹腔脓肿或包块7例，消化道出血5例，可疑肠道肿瘤4例，肠皮肤瘘1例，肠道异物1例，肠膀胱瘘1例。其中急诊手术63例，择期手术18例。②手术方式：81例患者中，单纯阑尾切除17例，回盲部切除14例，结肠节段切除9例，小肠节段切除36例，单纯穿孔修补3例，远端胃大部切除术1例，肠道异物取出＋修补术1例。③术后并发症：81例患者中术后出现Clavien—Dindo GradeⅡ级以上术后并发症15例，其中肠瘘或腹腔脓肿12例，肠梗阻3例。（2）后续治疗：81例患者中66例接受克罗恩病药物治疗（部分患者采用多种方式进行治疗），其中40例采用免疫抑制剂治疗，34例采用美沙拉嗪治疗，22例采用生物制剂治疗，18例采用激素治疗。（3）随访情况：81例患者均获得随访，随访时间为6个月至23年，中位随访时间为3年。24例患者随访期间出现复发，接受再次手术。3年内再次手术率为12．3％，5年内再次手术率为17．3％，10年内再次手术率为24．7％。结论外科医师需提高对克罗恩病的认识，术中意外发现克罗恩病施行合适手术治疗，患者预后良好。

NLRP3对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化的作用机制

目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)在心肌纤维化中的作用。方法体内实验采用NLRP3基因敲除和野生型小鼠,腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)构建心肌纤维化模型,运用Masson染色检测小鼠心脏纤维化程度,CD31免疫组化染色标记小鼠心脏的血管密度,蛋白质免疫印迹技术检测内皮细胞和间质细胞相关标志物的表达改变,体外实验采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和小干扰RNA沉默NLRP3,运用CD31和a-SMA免疫荧光共染检测内皮间质转化的情况。结果NLRP3基因敲除后可明显减轻ISO诱导的小鼠心肌胶原沉积和血管密度减少(P<0.05),增加内皮细胞标志物CD34的表达(P<0.05),降低间质细胞标志物a-SMA和Vimentin的表达(P<0.05),同时HUVEC的CD31和a-SMA免疫荧光共染结果显示、TGF-β刺激后内皮细胞的标志物CD31的表达明显减少,间质细胞标志物a-SMA的表达明显上升,NLRP3沉默后可明显逆转这种表型的改变(P<0.05)。结论NLRP3基因敲除可能通过抑制内皮-间质转化(EndMT)来缓解ISO诱导的心肌纤维化。

结肠克罗恩病58例外科处理分析

目的 探讨结肠克罗恩病的外科处理方式及预后.方法 回顾性分析2014年5月至2017年4月浙江大学医学院附属邵逸夫医院58例结肠克罗恩病手术患者的临床和随访资料.结果58例患者中52例采取结肠节段切除术,6例采取结肠广泛切除术,其中腹腔镜手术40例,术后围手术期并发症15例.中位随访时间17.8个月,内镜复发22例,其中5例需再次手术.累及横结肠远端的结肠克罗恩病合并小肠病变少,手术时间及术后住院时间更长.结论 结肠克罗恩病的手术治疗应根据病变范围选择结肠节段切除手术或全结肠或全结直肠切除手术,术后密切随访复发情况.

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3在心血管疾病中的作用

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白(C1q/tumor necrosis factor-related protein,CTRP)是与脂联素具有高度同源性的分泌性蛋白家族,在多种心血管疾病的病理生理过程中发挥着重要作用.CTRP3是CTRP家族成员之一,具有调节糖脂代谢,抑制炎症,减少细胞凋亡,抗组织纤维化,促血管生成等多种生物学效应.本文将从心肌肥厚、心肌缺血以及糖尿病性心肌病三个方面介绍CTRP3在心血管疾病中的作用.

妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清总胆汁酸和Th17/Treg平衡关系对围生儿结局的影响

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者血清总胆汁酸(TBA)和Th17/Treg平衡关系对围生儿结局的影响。方法选取2019年10月—2020年11月杭州市临平区第一人民医院收治的90例ICP产妇为观察组,另选取同期在该院进行产检的110例正常妊娠期孕妇为对照组,对其临床资料进行回顾性分析。检测所有产妇的血清TBA水平、Th17/Treg比值。根据观察组产妇血清TBA水平将其分为高TBA组(TBA≥40μmol/L,34例)和低TBA组(TBA<40μmol/L,56例),统计两组母婴结局和新生儿并发症发生率并进行比较。比较正常围生儿结局产妇和不良围生儿结局产妇血清各因子(TBA、Th17、Treg及Th17/Treg)水平的差异。结果观察组产妇血清TBA、Th17及Th17/Treg水平[(72.36±10.85)μmol/L、(1.54±0.23)%及(0.36±0.05)]均明显高于对照组[(16.41±2.46)μmol/L、(1.09±0.16)%及(0.21±0.03)],Treg水平[(4.42±0.66)%]低于对照组[(5.73±0.85)%],差异均有统计学意义(t=52.487、16.268、26.226及11.963,均P<0.05)。低TBA组宫内发育迟缓和胎儿窘迫发生率明显低于高TBA组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在产妇妊娠结局方面,低TBA组剖宫产率低于高TBA组,自然分娩率高于高TBA组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高TBA组新生儿并发症总发生率(20.58%)明显高于低TBA组(5.35%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.969,P<0.05)。不良围生儿结局产妇血清TBA、Th17及Th17/Treg水平均高于正常围生儿结局产妇,Treg水平低于正常围生儿结局产妇,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ICP产妇的血清TBA水平升高和Th17/Treg平衡失衡可增加胎儿窘迫等不良妊娠结局发生率,临床上应密切观察ICP产妇TBA水平和Th17/Treg平衡情况,并及时给予有效救治措施,从而改善母婴结局。

妊娠期糖尿病并发感染患者外周血p38-MAPK 信号通路表达及意义

目的 分析妊娠期糖尿病(GDM)并发感染患者外周血p38丝裂原活化蛋白激酶(p38-MAPK)信号通路表达及意义。方法 选取2018年5月-2021年6月杭州市临平区第一人民医院收治的GDM患者165例为研究对象,将62例感染患者纳入感染组,103例无感染患者纳入未感染组,采集患者痰液、尿液及血液等标本,分离培养病原菌进行药敏试验,对比其临床资料及外周血p38-MAPK水平,分析导致GDM并发感染的危险因素。结果62例并发感染以呼吸道、泌尿道感染为主;共分离出病原菌79株,其中革兰阴性菌47株(59.49%)、革兰阳性菌32株(40.51%);肺炎克雷伯菌对氨苄西林完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、阿米卡星、氨曲南、亚胺培南、美罗培南均敏感,大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林耐药率>75%,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌对青霉素G耐药率分别为87.50%、83.33%;感染组外周血p38-MAPK、磷酸化-p38MAPK抗体(p-p38-MAPK)、p38-MAPK/p-p38-MAPK高于未感染组(P<0.05);多因素分析发现,住院时间、侵入性操作、使用抗菌药物及外周血p38-MAPK为GDM患者并发感染的危险因素(P<0.05)。结论 GDM患者易受多因素影响并发感染,尤其是p38-MAPK信号通路表达水平发生改变,对其进行监测有重要意义。

N6-甲基腺苷依赖性pri-miR-17-92成熟激活AKT/mTOR途径促进子宫内膜癌进展

目的探究N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)及其调节因子甲基转移酶3(METTL3)在子宫内膜癌非编码RNA中的作用。方法定量检测浙江大学医学院附属第二医院临平院区2016年7月至2020年12月妇产科20例子宫内膜癌患者配对的癌和癌旁组织样本m6A及METTL3的表达水平。购自ATCC的HEC-1-A细胞系构建METTL3过表达及敲低的细胞。Western blot检测METTL3高表达和敲低细胞的METTL3、AKT/mTOR中关键分子的磷酸化水平;使用qRT-PCR定量检测METTL3高表达和敲低细胞的mRNA;使用RNA免疫共沉淀检测METTL3过表达及敲低细胞的m6A与其受体DGCR8的结合水平。结果m6A RNA甲基化定量试剂盒检测结果表明,子宫癌组织中m6A(1.0±0.15)vs(1.7±0.34)(P<0.01)和METTL3(1.0±0.13)vs(2.5±0.45)(P<0.05)水平升高。过表达METTL3的miR-17-92细胞簇中,Western blot及qRT-PCR检测结果表明,METTL3过表达显著增加了pri-miR-17-92上的m6A修饰(P<0.05),AKT/mTOR途径相关蛋白的磷酸化水平上调。此外,RIP检测结果表明DGCR8与pri-miR-17-92的结合显著提高。结论METTL3修饰m6A通过m6A/DGCR8依赖机制促进了pri-miR-1792加工成miR-17-92簇,进而激活了AKT/mTOR途径。