地塞米松联合异烟肼鞘内注药治疗结核性脑膜炎疗效分析

目的观察地塞米松联合异烟肼鞘内给药治疗结核性脑膜炎的临床疗效。方法将临床确诊的60例结核性脑膜炎患者回顾性均分两组,两组均采用常规抗结核治疗联合使用脑脊液置换加鞘内给药治疗方案,对照组单用异烟肼鞘内注药,治疗组采用地塞米松联合异烟肼鞘内注药。观察两组患者临床症状与体征变化,颅内病灶吸收情况和脑脊液的变化。结果地塞米松联合异烟肼给药4周后脑脊液检测基本恢复正常,患者症状与体征均显著改善,颅内压力降至正常,脑脊液的白细胞数、蛋白、糖、氯化物的恢复时间均短于对照组。结论地塞米松联合异烟肼鞘内给药是治疗结核性脑膜炎更为有效的方法。

氧化苦参碱通过调节T淋巴细胞亚群抑制HBV转基因小鼠的病毒复制

目的观察氧化苦参碱对HBV转基因小鼠病毒复制的作用,并探讨其是否与调节T淋巴细胞亚群有关。方法选取SPF级HBV转基因雄性小鼠36只,按随机数字表法分为模型组、氧化苦参碱组及拉米夫定组,每组12只,另取12只非转基因BALB/c雄性小鼠作为对照组。各组分别给予相应的药物治疗。观察各组小鼠肝脏组织病理变化,并检测血清及肝脏乙肝表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒HBV-DNA水平、血液T淋巴细胞亚群水平以及血清细胞因子水平。结果治疗后,与模型组比较,氧化苦参碱组与拉米夫定组血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平较低(P<0.05),而氧化苦参碱组与拉米夫定组血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,氧化苦参碱组与拉米夫定组血液CD3^+、CD4^+T淋巴细胞、CD4^+/CD8^+水平较高,且氧化苦参碱组>拉米夫定组;CD8^+T淋巴细胞水平较低,且氧化苦参碱组<拉米夫定组(P<0.05);氧化苦参碱组与拉米夫定组血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平较高,且氧化苦参碱组>拉米夫定组;白细胞介素-4(IL-4)水平较低,且氧化苦参碱组<拉米夫定组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氧化苦参碱能有效抑制HBV转基因小鼠血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平,该作用可能与调节T淋巴细胞亚群水平及Th1/Th2细胞因子水平、改善免疫功能有关。

肠道病毒71型手足口病患者外周血淋巴细胞增殖反应

目的研究肠道病毒71型(EV71)手足口病患者外周血淋巴细胞对不同EV71抗原刺激的增殖反应。方法将38例研究对象分为手足口病EV71阳性重症组8例、轻症组10例、EV71阴性组10例、健康对照组10例。外周血单核细胞(PBMC)与EV71合成多肽SP1、SP2、SP3、灭活EV71和植物血凝素(PHA)分别共同孵育,加入胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),然后收集细胞于液闪仪测定每分钟脉冲数(cpm)。结果对不同EV71抗原的淋巴细胞增殖反应发现,以灭活病毒EV71免疫原性最强,SP2次之。EV71轻症和重症患者淋巴细胞增殖反应比较差异无统计学意义(P>0.05),EV71阴性手足口病患者及健康对照组对EV71抗原未能显示有效的淋巴细胞增殖反应。结论灭活EV71免疫原性最强,感染EV71的患者淋巴细胞对EV71抗原刺激呈特异性增殖反应。

艾滋病合并新型隐球菌脑膜炎临床特征及转归

目的通过对8例艾滋病合并新型隐球菌脑膜炎的临床特征及转归的分析,提高对艾滋病合并新型隐球菌脑膜炎的认识。方法对该院2004年9月～2009年2月收治的8例艾滋病合并新型隐球菌脑膜炎病例进行回顾性分析。结果8例新型隐球菌脑膜炎患者均为艾滋病晚期患者,在确诊时已合并多种机会感染,所有患者出现头痛,1例未经治疗死亡,1例自动出院,6例应用两性霉素B或两性霉素B脂质体抗真菌治疗后,4例病情好转,2例死亡。结论艾滋病患者合并新型隐球菌脑膜炎病情重,预后差,早发现早治疗,两性霉素B或两性霉素B脂质体治疗可取得较好的治疗效果。

L-苏糖酸镁增强恩替卡韦对HBV感染小鼠的抗病毒作用及其机制

目的:观察L-苏糖酸镁(MLT)是否可增强恩替卡韦(ETV)对乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠的抗病毒作用,并初步探讨其机制。方法:采用高压水动力法经尾静脉注射携带1.3拷贝HBV基因组(ayw亚型)的重组8型腺相关病毒建立HBV持续感染的C57BL/6小鼠模型。成模后分为模型组、MLT组(1.2 g·kg^-1 L-苏糖酸镁胶囊)、ETV组(75μg·kg^-1恩替卡韦片)、联合处理组(1.2 g·kg^-1 L-苏糖酸镁胶囊+75μg·kg^-1恩替卡韦片),每组8只;另选取8只未经病毒感染的正常小鼠作为对照组,连续给药4周。采用ELISA法检测小鼠血清HBsAg和HBeAg水平;采用荧光定量PCR法检测小鼠肝脏组织及血清中HBV DNA拷贝数;分离小鼠外周血CD8+T细胞,检测小鼠血清及CD8+T细胞中Mg^2+含量,并采用流式细胞仪检测小鼠外周血CD8+T细胞中表面分子程序性死亡受体1(PD-1)、自然杀伤细胞活化受体(NKG2D)、CD95和CD38表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清和CD8+T细胞中Mg 2+含量及CD8+T细胞中表面活化性分子NKG2D和CD38表达水平明显降低(P<0.05),而抑制性分子PD-1和CD95表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠血清HBsAg、HBeAg水平及肝脏组织和血清中HBV DNA拷贝数均明显降低(P<0.05),且联合处理组小鼠各指标改善效果最好;与模型组比较,MLT组和联合处理组小鼠血清及CD8+T细胞中Mg 2+含量及CD8+T细胞表面活化性分子NKG2D和CD38表达水平明显升高(P<0.05),而抑制性分子PD-1和CD95表达水平明显降低(P<0.05),但ETV组小鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MLT可增强ETV对HBV感染小鼠的抗病毒作用,其机制可能是MLT可引起CD8+T细胞内Mg 2+含量增加,提高CD8+T细胞活性,进而更加有效地清除HBV。

复方二氯醋酸二异丙胺对抗结核药物性肝损的治疗观察

目的:探讨复方二氯醋酸二异丙胺治疗抗结核药物性肝损的临床疗效。方法:收治抗结核药物性肝损患者60例,随机分为两组。试验组给予复方二氯醋酸二异丙胺治疗,对照组给予维生素C治疗,比较两组临床疗效。结果:试验组治疗有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论:复方二氯醋酸二异丙胺治疗抗结核药物性肝损的临床疗效较好。

神经梅毒17例临床分析

目的分析神经梅毒的临床特征和早期诊断依据。方法回顾性分析我院17例神经梅毒的临床特征、血清、脑脊液改变及影像学表现。结果本组无症状神经梅毒5例,梅毒性脑膜炎1例,脑膜血管梅毒2例,耳神经梅毒1例,麻痹性痴呆6例,脊髓痨1例,视神经萎缩1例。17例血清TRUST及TPPA均为阳性,CSF-VDRL阳性者12例。7例在治疗后1～6月复查脑脊液的各项指标,白细胞计数和蛋白含量均下降或转阴,而CSF-VDRL试验仅1例转阴。结论未能早期发现和治疗梅毒是导致神经梅毒的重要因素。神经梅毒的临床表现多种多样,容易误诊,梅毒血清及脑脊液检查是诊断的必要依据。脑脊液白细胞计数与蛋白含量是监测神经梅毒疗效的较敏感指标,应争取早期诊断、早期治疗以改善预后。

肠道病毒71型手足口病ELISA诊断试剂盒研制与临床应用

目的研制早期快速检测抗肠道病毒71型（EV71）抗体的ELISA血清学诊断性试剂盒，评价其临床应用价值。方法将表达纯化的EV71重组蛋白VPI作为包被抗原，建立EV71型手足口病间接ELISA的血清学检测方法。通过与逆转录（RT）PCR方法、EV71病毒分离试验和微量血清中和试验比较，评价抗-EV71 IgM和抗-EV71 IgG血清学诊断方法在EV71型手足口病的诊断价值。结果与RT-PCR比较，抗-EV71 IgM敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83％、85％、81％和87％；抗-EV71 IgG敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为72％、74％、68％和77％。与EV71病毒分离方法比较，抗-EV71 IgM敏感度、特异度分别为85％和97％；抗-EV71 IgG敏感度、特异度分别为75％和77％。通过直线相关分析发现，抗-EV71 IgG抗体滴度和中和抗体滴度呈显著正相关（r=0．72，P〈0．05）。EV71型手足口病患儿恢复期血清抗IgG滴度较急性期升高（P〈0．01），但抗IgM滴度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论利用VP1重组蛋白作为包被抗原，成功开发ELISA检测人血清抗-EV71IgM和抗-EV71IgG抗体的诊断试剂盒。

恩替卡韦片联合阿德福韦酯胶囊治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床研究

目的观察恩替卡韦片联合阿德福韦酯胶囊治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床疗效及安全性。方法将120例慢性乙型病毒性肝炎患者随机分为对照组和试验组,每组60例。对照组予以阿德福韦酯每次10 mg,qd,口服;试验组在对照组治疗的基础上,予以恩替卡韦每次0. 5 mg,qd,口服。2组患者均治疗1年。比较2组患者的血清白细胞介素-7(IL-7)、乙型病毒性肝炎病毒(HBV-DNA)载量和谷丙转氨酶(ALT)的变化,ALT复常率,以及药物不良反应的发生情况。结果治疗后6,12个月,试验组的血清IL-7分别为(4. 62±0. 31)和(5. 11±0. 30) ng·mL^(-1),HBV-DNA载量分别为(3. 50±0. 31)和(1. 84±0. 23)copies·mL^(-1),ALT分别为(51. 52±11. 51)和(47. 00±3. 64) U·L^(-1),ALT复常率分别为55. 00%和88. 33%,对照组的血清IL-7分别为(3. 78±0. 30)和(4. 49±0. 27) ng·mL^(-1),HBV-DNA载量分别为(5. 03±0. 30)和(3. 16±0. 24)copies·mL^(-1),ALT分别为(60. 48±19. 65)和(54. 44±13. 14) U·L^(-1),ALT复常率分别为38. 33%和56. 67%,2组患者各时间点的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。试验组和对照组的总药物不良反应发生率分别为6. 67%和8. 33%,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论恩替卡韦片联合阿德福韦酯胶囊治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床疗效显著,其可有效地降低HBV-DNA载量,增加血清IL-7的表达,且不增加药物不良反应的发生率。

轻型和重型手足口病临床和实验室特征分析

目的研究2008年深圳市轻型和重型手足口病临床特点和实验室特征。方法将深圳市东湖医院和儿童医院共145例手足口病住院患者作为研究对象，其中轻型124例，重型21例。收集患者临床和一般实验室资料，急性期与恢复期连续粪便和血标本，通过RT-PCR检测EV71病毒核酸，分离和培养EV71肠道病毒，其中2例死亡患者行病理组织学检测。结果与轻型患者比较，重型患者白细胞计数、血糖显著升高，但年龄显著降低，粪便中轻型和重型患者EV71基因检出率分别为35％与67％，重型患者EV71检出率显著高于轻型患者，从9例患者粪便中分离培养出肠道病毒，其中1例为死亡患者粪便标本。2例患者死于神经源性肺水肿和脑干脑炎。结论EV71是重型患者和死亡患者的最主要病原体，神经源性肺水肿和脑于脑炎是EV71型手足口病的最主要死亡原因，对年龄小于4岁，高热、皮疹稀疏和高血糖的EV71型手足口病患者应警惕向重型发展。

手足口病的临床特征及中枢神经系统并发症高危因素分析

目的探讨不同肠道病毒所致手足口病的临床特征及发生中枢神经系统并发症（CNSC）的高危因素。方法分析272例手足口病患儿，其中肠道病毒71型（EV71）感染92例、柯萨奇病毒组16型（CA16）感染31例、非EV71非CA16感染149例。有CNSC42例，无CNSC230例。比较分析不同肠道病毒感染患儿的临床特征，同时对伴有CNSC者进行多因素Logistic分析。结果3组不同肠道病毒感染患儿的年龄、外周血白细胞计数（WBCC）、C-反应蛋白（CRP）、血糖（BG）水平差异元显著性（P〉0．05）；而体温、热程、中性粒细胞百分比（NP）、肢体抖动（MJOL）及CNSC发生率3组间差异有显著性（P〈0．05）。多因素Logistic分析发现，MJOL、WBCC〉1．2×10^9／L、EV71感染是CNSC的高危因素，而且MJOL具有最大相对危险度（OR=242．848，P=0．000）。Locsdc线性预测因子Z=-12．825＋5．492（MJOL）＋2．624（WBCC〉1．2×10^9／L）＋1．900（EV71感染）。结论（1）EV71感染者比其他肠道病毒感染者有更高体温、NP、CNSC及MJOL发生率，热程比CA16感染者更长。（2）EV71感染、MIOL、WBCC〉1．2×10^9／L是手足口病发生CNSC的高危因素，尤其MJOL对预测CNSC有重要意义。

深圳市甲型H1N1流行性感冒确诊病例流行病学及临床特征

目的了解2009年深圳市收治的30例甲型H1N1流行性感冒（流感）确诊病例的流行病学和临床特点。方法30例患者均经2次鼻拭子、咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性（RT—PCR法），此后每天检测病毒核酸直至连续2d均阴性。第1次病毒核酸检测阳性后立即开始奥司他韦（商品名为达菲）或“中药I号”抗病毒治疗，5d为一疗程。收集患者流行病学、临床和一般实验室资料。统计学处理采用t检验。结果29例患者为输人性病例，另1例为二代病例，系7个月女婴。发病平均年龄（20．42±12．59）岁，离开疫区至发病的平均时间为（53．33±53．08）h，其中2例离开疫区超过8d才发病，其密切接触人群中发现1例隐性感染者。30例患者均有发热，平均最高体温（38．40±0．80）℃，其他临床症状依次为咳嗽17例（56．7％）、流涕9例（30．0％）、咽痛9例（30．0％）、头痛7例（23．3％）、鼻塞2例（6．7％）、肌肉酸痛1例（3．3％）。22例患者在抗病毒治疗5d内病毒核酸转阴，8例在抗病毒治疗第6天或以后病毒核酸转阴。21例在病程7d内病毒核酸转阴，9例在起病后病毒核酸阳性持续8d或以上，后者较前者中性粒细胞计数明显下降，分别为（1．47±1．03）×10^9／L和（2．69±1．63）×10^9／L（t=2．06，P=0．048），血常规异常持续时间也明显延长，分别为（2．78±2．49）d和（0．71±1．31）d，差异有统计学意义（t=2．34，P=0．006）。结论甲型H1N1流感发病年龄偏低，临床症状不严重。部分病例潜伏期可能超过7d，病程7d或抗病毒治疗5d后仍有可能检出病毒，存在亚临床隐性感染的可能。血常规变化与病毒核酸阳性的持续时间存在一定关系。

肠道病毒71型重组VP1蛋白的表达和EV71型手足口病血清学诊断方法的建立

目的获得纯化的具有免疫活性的肠道病毒71型VPI蛋白，建立EV71感染早期、快速和准确的ELISA血清学诊断方法。方法通过PCR方法扩增出VPl基因，定向克隆到原核表达载体pET-21b（＋），阳性质粒转化入E．coliBI21（DE3）感受态细胞经IPTG诱导，SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹分析目的蛋白的表达水平。纯化的VPI蛋白用作包被抗原，建立手足口病（HFMD）患者抗。EV71-IgM和IgG的血清学诊断方法。结果成功表达和纯化了VP1重组蛋白，所表达的蛋白能被EV71型手足口病患者血清所识别。调查发现，与正常人和EV71阴性手足口病患儿比较，EV71阳性手足口病血清中抗-EV71-IgM和IgG中A值垃著升高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。与RT-PCR结果比较，发现该方法IgM的诊断敏感性和特异性分别为73％和77％；该IgG诊断方法的敏感性和特异性分别为82％和83％。完成该试验仅需4h。结论利用pET原核表达系统成功克隆、表达和纯化了肠道病毒71型重组外壳蛋白VP1，且具有良好的抗原性。该抗原可用于研制EV71血清学诊断试剂盒。

2008年深圳地区手足口病病原学调查

目的研究2008年深圳地区手足口病病原体EV71和CoxA16感染情况，为手足口病的防治提供依据。方法应用RT—PCR技术检测307例手足口病患儿标本病原体EV71、CoxA16基因，将PCR产物测序，并应用ClustalW2在线分析软件进行序列分析、进化树分析。结果不同标本中EV71的阳性率分别为：大便标本24．4％（75／307）、咽拭子为7．8％（24／307）、外周血12．5％（1／8）；CoxA16的阳性率分别为，大便13．8％（28／203），咽拭子11．0％（20／181），其中EV71和CoxA16同时为阳性的有3份（0．98％）；脑脊液标本未检测到EV71和CoxA16。与标准株BrCr序列比对分析，测序的14例标本中，8例的EV71新出现多个位点变异，其中2例标本的A2528G变异导致氨基酸改变，即N595D，1例标本的A2714G变异引起氨基酸改变，即1658V。进化树分析显示，有2例标本的病毒株与anhui毒株亲缘关系较近，与标准株BrCr及深圳株SHH02—6、SHZH02—40、SHZH03—58等亲缘关系较远；而其余12株与上述毒株亲缘关系较远。根据文献报道的EV71基因分型方法分析，测序的14株EV71基因型为c型。结论在引起2008年深圳手足口病病原体中相当的比例是EV71，且可能部分是anhui病毒株的入侵。

RT-PCR检测手足口病病原体EV71

目的应用分子生物学技术检测手足口病病原体EV71,为临床诊断提供依据。方法根据卫生部发布的《手足口病预防控制指南》(2008年版),收集2008年5月深圳市东湖医院收治的临床诊断为手足口病患儿的大便标本265份。应用RT-PCR技术检测手足口病病原体EV71,将RT-PCR产物测序并在GenBank进行比对分析以检测该方法的准确度。结果RT-PCR扩增到特异性EV71VP1区DNA片段,大便阳性率为24%。测序验证所得DNA片段是EV71VP1区基因,同时也验证RT-PCR准确度达70%(14/21)。结论RT-PCR检测手足口病病原体EV71可以应用于临床辅助诊断。

甲型H1N1流感患者排毒规律及抗病毒治疗研究

目的 研究2009年深圳市收治的甲型H1N1流感确诊病例排毒规律和抗病毒治疗疗效.方法 75例患者均经两次鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性（RT-PCR）,此后每天检测病毒核酸直至连续两天均阴性.第1次病毒检测阳性后立即随机分三组抗病毒治疗,分别为奥司他韦（Oseltamivir）（组Ⅰ）、中药（组Ⅱ）和奥司他韦联合中药（组Ⅲ）抗病毒治疗,5 d为一疗程.应用流式细胞仪检测T细胞亚群和IL-17表达.结果 75例患者中,78.7%（59/75）在起病后甲型H1N1流感病毒核酸阳性持续≤7 d,平均年龄为（22.25±10.38）岁;21.3%（16/75）病毒持续＞7 d,年龄为（17.16±13.66）岁.对其中56例患者细胞与体液免疫功能进行分析,发现其IL-17表达明显低于季节性流感和健康人（P＜0.01）.进一步研究发现,10例病毒持续＞7 d的患者IL-17表达值（1.91±0.80）明显低于46例病毒持续≤7 d者IL-17表达（3.05±1.59）（P＜0.05）,也明显低于季节性流感（P＜0.01）和正常对照组（P＜0.001）.比较三治疗组抗病毒治疗5 d疗程结束时病毒核酸转阴率,分别为组Ⅲ92.86%,组Ⅰ71.43%,组Ⅱ46.15%,组Ⅱ明显低于前两组（分别为P＜0.01,P＜0.05）.组Ⅲ经治疗后体温恢复正常时间较组Ⅰ、组Ⅱ缩短（P＜0.05）.结论 IL-17和年龄与甲型H1N1流感病毒感染及排毒时间长短可能存在一定关系.奥司他韦联合中药治疗在抗病毒疗效和减轻症状方面均有其独特优势.