小檗碱对HepG2胰岛素抵抗细胞PI3K/AKT1/GLUT1信号通路的调控作用

目的 :探讨小檗碱对Hep G2胰岛素抵抗细胞PI3K/AKT1/GLUT1信号通路的调控作用。方法 :MTT法检测小檗碱不同浓度对细胞生长的抑制率;建立胰岛素抵抗细胞模型,实验分为5组,分别为空白组、模型组、二甲双胍组、小檗碱高剂量组、小檗碱低剂量组,给予相应的药物后,Western Blot检测葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B1(AKT1)的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞培养基中的葡萄糖含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),说明胰岛素抵抗细胞模型建立成功。与空白组比较,模型组PI3K蛋白、GLUT1蛋白表达显著降低,AKT1蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,二甲双胍组、小檗碱高剂量组、小檗碱低剂量组PI3K蛋白、GLUT1蛋白表达显著升高,AKT1蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:小檗碱具有改善细胞胰岛素抵抗的作用,其分子机制可能通过调控PI3K/AKT1/GLUT1信号通路中转录因子蛋白的表达,从而改善细胞胰岛素抵抗状态。

仙茅配方颗粒质量标准研究

目的建立仙茅配方颗粒的质量标准。方法运用薄层色谱法,以仙茅苷为对照,建立仙茅配方颗粒的薄层鉴别方法。采用高效液相色谱法建立仙茅配方颗粒仙茅苷的含量测定方法。结果薄层鉴别斑点清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。高效液相色谱法测定仙茅苷在0.1404~2.808μg/ml的范围内呈良好线性关系（r=0.9998）,加样回收率在97.3%~103.4%,RSD为1.9%（n=6）。结论该方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于仙茅配方颗粒的质量控制方法。

决明子薄层鉴别方法改进研究

目的修订中国药典决明子薄层鉴别方法。方法修改提取方法,参照《中国药典》(2015版)展开条件,进行决明子薄层鉴别实验,并对修订后的方法进行了方法学验证。结果所有样品均能检出橙黄决明素、大黄酚斑点,斑点清晰,易于检测。结论决明子修订后的薄层色谱鉴别方法操作简便、专属性强、斑点清晰。

炒薏苡仁油对乳腺癌MCF-7和ZR-75-1细胞凋亡的影响及其相关氧化应激机制

目的探索炒薏苡仁油对人乳腺癌MCF-7和ZR-75-1细胞凋亡的影响及其相关氧化应激机制。方法用不同浓度炒薏苡仁油(0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mg/mL)处理人乳腺癌MCF-7和ZR-75-1细胞36 h和48 h后,采用MTT法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR法检测细胞中相关基因CDK4、Cyclin A、Cyclin E、Bax、Bcl-2的表达,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达,采用ELISA法检测细胞活性氧(ROS)及其相关氧化应激指标SOD、GPX、CAT的含量。结果不同浓度炒薏苡仁油处理48 h后,MCF-7和ZR-75-1细胞活力显著下降(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率随着给药浓度的升高呈降低趋势。PCR结果显示CDK4、Cyclin A、Cyclin E、Bcl-2表达显著下调(P<0.05或P<0.01),Bax表达显著上调(P<0.05或P<0.01)。Western blot结果显示Bcl-2表达显著下调(P<0.01),Bax表达显著上调(P<0.01)。细胞内ROS及其相关氧化应激指标SOD、GPX、CAT含量显著增加(P<0.05或P<0.01),且各指标值大小具有浓度依赖性。结论炒薏苡仁油具有抗乳腺癌作用,其机制可能是促进细胞内ROS及其相关氧化应激指标释放,下调Bcl-2和上调Bax的表达。