低剂量辐射对白血病模型小鼠治疗作用研究

目的 :探讨低剂量辐射对白血病模型小鼠的治疗作用。方法 :使用 61 5小鼠和 L61 5 K淋巴细胞白血病细胞株建立 T淋巴细胞白血病小鼠模型 ,给予 75 m Gy的低剂量辐射后 ,检测外周血白细胞数、小鼠的生存时间及脾脏指数。结果 :接受 75 m Gy的低剂量辐射后 ,荷瘤小鼠白血病细胞生长受抑 ,生存期延长。结论

氯化镉对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其对免疫功能的影响

目的:探讨氯化镉对S180肉瘤生长的抑制作用,寻找其最佳抗肿瘤应用剂量。方法:应用0.25、1.00及4.00 mg.kg-1的氯化镉处理S180肉瘤小鼠模型,检测瘤重确定氯化镉对S180肉瘤的抑瘤作用,采用胸腺指数、脾脏指数、碳粒廓清试验、淋巴细胞转化实验、半数溶血素实验检测小鼠免疫功能的变化。结果:0.25、1.00及4.00 mg.kg-1氯化镉组瘤重低于对照组(P<0.05或P<0.01),其中以1.00 mg.kg-1剂量组最明显(P<0.01)。0.25、1.00及4.00 mg.kg-1氯化镉组模型鼠的胸腺指数及4.00 mg.kg-1氯化镉组模型鼠的脾脏指数均高于对照组,0.25和1.00 mg.kg-1氯化镉组模型鼠碳粒廓清指数、吞噬指数及淋巴细胞增殖率高于对照组(P<0.05或P<0.01);各氯化镉处理组与对照组比较,半数溶血素数值差异无显著性(P>0.05)。结论:氯化镉能够抑制S180肉瘤生长,同时可增加荷瘤鼠非特异性及细胞免疫功能,以1 mg.kg-1剂量最为明显。

NF-E2对红系造血相关基因表达的影响

目的探讨红系特异性转录因子NF-E 2对红系造血相关基因表达的影响。方法应用基因芯片方法检测转染p45NF-E 2基因后红白血病细胞株HB 22.2中基因表达的变化;通过改变培养条件诱导红白血病细胞株HB 60-5向成熟细胞分化,检测诱导分化过程中NF-E 2等红系造血相关基因表达变化。结果p45NF-E 2缺陷细胞HB 22.2转染外源p45NF-E 2后,血红蛋白基因及G ata-1、EDRF基因表达上调,F li基因表达下调;HB 60-5向成熟细胞分化过程中,随着p45NF-E 2的表达上调,同样出现G ata-1和EDRF表达增强,F li表达减弱。结论NF-E 2能对多种红系相关基因表达调控。从而促进红系分化。

红系造血相关转录因子在红系诱导分化中表达的变化

目的探讨红系细胞分化中细胞生长及相关转录因子表达的变化。方法利用红白血病细胞株HB60-5的生长特性,通过改变培养条件,促使细胞向成熟细胞分化。绘制细胞生长曲线,应用Northern blot方法检测诱导分化过程中红系造血相关基因表达变化。结果HB60-5细胞随着诱导分化时间的延长,生长减慢,红系分化标记α-珠蛋白表达逐渐升高,同时伴有GATA-1、p45NF-E2、EDRF等基因表达上调,Fli-1基因表达下调。结论红系分化过程中,细胞增殖受到抑制,红系细胞分化的基因表达上调,红系细胞增殖的基因表达下调。

13例急性混合细胞白血病临床分析

目的:探讨急性混合细胞白血病(HAL)的临床特征。方法:应用MICM分型方法,对143例急性白血病患者中筛选出13例混合细胞白血病临床特征进行综合分析。结果:急性混合细胞白血病约占同期诊断的急性白血病的9.1%,在13例患者中B-Ly+/My+双表型9例,T-Ly+/My+双表型2例,T+B-Ly+/My+双表型2例,初诊时白细胞计数多明显增高,平均84.15×109/L。接受治疗的12例患者中,首次化疗达CR 1例,PR1例,2例死亡;余8例有2例继续接受治疗,均进行了第2、3疗程而仍未缓解。结论:HAL属特殊类型的白血病,其诊断有赖于对细胞形态学和免疫分型的综合判断。整体预后不佳,肿瘤负荷、免疫分型、细胞遗传学及分子生物学均是影响其预后的因素。目前没有明确的缓解率较高的化疗方案。

红系造血分化中分化调节因子的表达及调控

目的探讨红系分化调节因子(EDRF)在红白血病及正常造血组织中的表达差异及可能的调控机制。方法应用Northern blot方法检测红白血病细胞HB22.2、CB3中EDRF基因的表达,并以正常小鼠胚胎肝脏组织作为对照;通过改变培养条件,诱导红白血病细胞系HB60-5成熟分化,探讨红系分化中EDRF表达的变化;采用Southern blot方法对EDRF基因进行DNA水平检测;通过转基因的方法探讨红系造血调控因子GATA-1、NF-E2、Fli-1对EDRF表达的影响。结果在胚胎肝组织中EDRF表达水平较高,在NF-E2缺陷的红白血病细胞株HB22.2及CB3中,EDRF表达降低,同时α-珠蛋白表达缺失;Southern blot检测未发现红白血病细胞与正常胚胎肝脏组织EDRF基因的差别;HB22.2及CB3转染NF-E2基因后,血红蛋白及EDRF表达水平均明显上调;诱导HB60-5分化成熟后,NF-E2、GATA-1、α-珠蛋白及EDRF的表达逐渐增高,具有一定的相关性;HB60-5细胞转染GATA-1基因后可明显上调EDRF表达,转染Fli-1基因后则EDRF表达水平下降。结论 EDRF是红系造血相关基因,在正常红系细胞中具有高水平表达;红白血病细胞系中EDRF的表达受抑,这种表达减低不是DNA突变所致;红系造血因子GATA-1、NF-E2可上调EDRF的表达,Fli-1可下调EDRF表达。

低剂量辐射对小鼠白血病的治疗作用

目的 观察低剂量辐射对小鼠白血病的治疗作用。方法 使用615小鼠和L615K淋巴细胞白血病细胞株建立T淋巴细胞白血病小鼠模型，给予75mGy的低剂量辐射，检测外周血白细胞变化、小鼠的生存时间及脾脏白血病细胞浸润情况。结果 接受75mGy的低剂量辐射后，荷瘤小鼠白血病细胞生长受抑制，生存期延长。结论 低剂量辐射具有抗淋巴细胞白血病的作用。

急性白血病ZO-1基因表达与甲基化调控关系的研究

目的探讨人急性白血病细胞系与正常骨髓细胞中ZO-1基因启动子区甲基化状态的差异及其与基因表达的关系。方法应用反转录聚合酶链反应的方法观察3种人白血病细胞株HL60、NK92、Molt4及正常人骨髓有核细胞中ZO-1基因的表达情况;应用甲基化特异性聚合酶链反应的方法分别检测其ZO-1基因启动子区的甲基化状态;应用去甲基化药物处理HL-60细胞,观察处理后ZO-1基因甲基化状态及基因表达的变化。结果在10例正常骨髓细胞均可发现ZO-1基因表达,而在3种白血病细胞系中未见其表达;正常骨髓细胞中ZO-1基因启动子区无甲基化,而在3种白血病细胞中呈完全甲基化;应用去甲基化药物处理HL-60细胞使其ZO-1基因启动子区去甲基化,可重新诱导ZO-1基因的表达。结论ZO-1基因的表达受甲基化状态调控,ZO-1基因可能与白血病发生相关。

正常核型急性髓系白血病NPM1、FLT3-ITD突变与外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比相关性研究

本研究旨在分析NPM1和FLT3-ITD突变与急性髓系白血病患者外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比的相关性。回顾分析我中心2009年1月至2011年12月份初治正常核型急性髓系白血病患者51例,其中男性22例,女性29例,中位年龄47岁(14-83岁)。采用聚合酶链式反应检测NPM1及FLT3-ITD突变状态。结果表明,与无NPM1突变患者相比,突变者初诊时外周血白细胞数较多(30.7×109/L vs 8.6×109/L,P=0.002);FLT3-ITD突变患者较无突变患者具有更多的外周血白细胞数(42.38×109/L vs 11.45×109/L,P=0.033)及更高的骨髓原始细胞百分比(74.0%vs 60.25%,P=0.036)。外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比在NPM1、FLT3-ITD无突变组、单独NPM1突变组、单独FLT3-ITD突变组到NPM1、FLT3-ITD双突变组逐步升高(均P<0.05)。白细胞数大于12.55×109/L的患者NPM1突变率明显升高(P=0.002),大于37.85×109/L者FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.033);原始细胞比例大于72.25%的FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.008)。NPM1突变患者首疗程完全缓解率(CR)明显高于无突变者(78.13%vs 40.0%,χ2=4.651,P=0.031)。结论:NPM1及FLT3-ITD突变患者白细胞计数及原始细胞比例大,提示NPM1与FLT3-ITD突变均可能促进白血病细胞增殖,且二者可能具有协同效应。

不同类型供者造血干细胞移植治疗儿童再生障碍性贫血的进展

再生障碍性贫血（Aplastic anemia,AA）是小儿常见贫血性疾病,分为先天性及获得性;是一种多类病因和发病机制引起的骨髓造血功能衰竭征,主要表现为骨髓有核细胞增生低下、全血细胞减少及所致的贫血、出血和感染[1]。西方国家发病率（12）/百万,

氯化镉对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨氯化镉对肝癌细胞增殖的抑制作用,阐明氯化镉对正常组织与肿瘤组织作用效应差异的分子机制。方法:以5、10、25和50μmol.L-1氯化镉分别作用于人肝细胞癌细胞株HepG-2和SMMC-7721,6 h后应用MTT法检测细胞增殖;应用25μmol.L-1氯化镉作用于肝癌细胞株,分别于3、6、12和24 h后检测细胞增殖。应用裸鼠建立荷人肝癌模型,以0.25、1.00及4.00 mg.kg-1氯化镉及10 mg.kg-1氯化锌联合1.0 mg.kg-1氯化镉腹腔注射荷瘤鼠,测定生存期及给药8周后肿瘤体积;采用免疫组织化学方法测定正常肝组织及肝癌组织中金属硫蛋白(MT)表达水平。结果:5、10、25及50μmol.L-1氯化镉均可抑制HepG-2和SMMC-7721增殖,其细胞增殖抑制率高于对照组(P<0.05),随着剂量和作用时间的增加,肿瘤细胞增殖抑制率增加;0.25、1.00及4.00 mg.kg-1氯化镉及锌+镉组肿瘤细胞体积较对照组明显减小(P<0.05),生存期明显延长(P<0.05),锌+镉组与1 mg.kg-1氯化镉组比较肿瘤体积差异无显著性,生存期延长(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,肿瘤组织中MT表达明显低于正常组织,正常肝组织预先应用氯化锌组MT表达水平高于正常组,而在肿瘤组织中表达无变化。结论:氯化镉具有显著的抗肝癌作用,在应用氯化镉前给予锌可以提高正常组织中MT表达水平而起到保护作用;在肝癌组织中MT表达减低,并不能被锌诱导增加。

黄芩提取化合物单体SBX抗白血病效应及机制研究

本研究探讨黄芩提取化合物单体成分SBX对不同人白血病细胞株的抗白血病效应及其可能的相关机制。体外培养人HL-60、NB4、U937、K562、Jurkat细胞,应用CellTiter-Glo发光法进行细胞活力检测,筛选出敏感细胞株,应用流式细胞术检测SBX对敏感细胞细胞周期的影响,应用蛋白Pathway Array技术检测SBX对敏感细胞蛋白表达的影响。结果显示,SBX(10-200μmol/L,72 h)对各种类型的人白血病细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性(r值分别为0.86,0.88,0.95,0.94,0.96),对HL-60细胞抑制作用最强。流式细胞术显示SBX(50,100μmol/L,48h)对HL-60细胞周期的影响主要是引起G0/G1期阻滞。蛋白Pathway Array技术分析SBX(50μmol/L,48 h)对HL-60蛋白表达的影响显示,p-PKCα/βⅡ、p-p38、Cdc25B、XIAP蛋白表达水平上调,而p-AKT、p-SAPK/JNK、cyclin E、Notch4、Cdk4、Cdc2、Akt、Bcl-2、Bax、cdc42、TNF-α、p27、CaMKKa蛋白表达水平下调。结论:SBX能够抑制各种类型人白血病细胞的增殖,其中敏感细胞株为HL-60。SBX主要影响HL-60的EGFR、Ras/Raf/MAPK和Notch信号传导通路,并通过这些信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达的水平,导致细胞周期G0/G1期阻滞。

激活骨髓和淋巴因子激活的杀伤细胞生物活性的实验研究

目的 :证实激活骨髓 (Activated bone marrow,ABM)具有与淋巴因子激活的杀伤 (LAK)细胞不同的生物学效应。方法 :应用重组白细胞介素 - 2 (r IL - 2 )、抗 CD3 单抗体外激活骨髓和外周血单个核细胞 ,以 MTT比色分析法测定 ABM、L AK细胞的杀伤活性 ,采用甲基纤维素半固体培养法进行粒 -巨噬细胞系祖细胞 (CFU- GM)、红系祖细胞 (BFU- E)培养。结果 :r IL- 2 +抗 CD3 单抗激活的 ABM组杀伤活性最强 (6 5 .8± 9.2 ) % ,r IL - 2激活的 ABM组次之为 (5 6 .3± 7.9) % ,活性强于相同条件下的 L AK组 ,两组差异具有显著性 (P<0 .0 1)。增殖倍数与相同条件下的 LAK细胞相比差异亦具有显著性。体外激活 3～ 5 d的 ABM与同期培养的未激活的骨髓细胞相比 BFU- E、CFU- GM形成率差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,LAK细胞则不具有造血祖细胞活性。结论 :ABM的杀伤活性和增殖效应明显强于 L AK细胞 ,且能保持造血祖细胞活性 ,抗 CD3 单抗能够促进 r IL - 2诱导的 ABM抗肿瘤活性和增殖效应 ,不损伤造血祖细胞活性 ,是优于 LAK细胞的过继免疫疗法。

低剂量辐射对小鼠外周血干/祖细胞的动员作用

目的：探讨低剂量辐射对小鼠外周血干／祖细胞的动员效应。方法：采用深部X线对小鼠进行低剂量辐射，甲基纤维素半固体培养、流式细胞仪检测单纯低剂量辐射及联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）后外周血粒单系造血祖细胞集落（CFU-GM）及造血干祖细胞数量（c-kit^＋细胞数）。结果：小鼠受到25-75mGy照射后外周血CFU-GM集落数明显增多，c-kit^＋细胞数平行增加，其中以75mGy组最明显；受照后24hCFU-GM集落数开始增加，72h最明显，96h后有所下降。75mGy＋半量G-CSF组周围血CFU-GM集落数及c-kit值均明显高于单纯低剂量照射组，接近全量G-CSF组。结论：低剂量辐射对小鼠外周血干／祖细胞有动员效应，联合应用G-CSF有明显的协同作用。

慢性粒细胞白血病ZO-1基因启动子区甲基化状态分析及临床意义探讨

目的通过对慢性期及急变期慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓标本中人紧密连接蛋白1(ZO-1)基因启动子区甲基化状态的分析,初步探讨其在CML病情发展变化中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测5例CML慢性期和10例CML急变期患者骨髓标本中ZO-1基因启动子区的甲基化状态。结果在5例CML-CP患者中ZO-1基因启动子区呈非甲基化状态;在7例CML-BP患者中ZO-1基因启动子区呈高甲基化状态,甲基化阳性率为70%(7/10);1例CML患者其慢性期骨髓标本ZO-1基因启动子区呈非甲基化状态,而急变期则呈甲基化状态,经治疗恢复到慢性期时,则又表现为非甲基化状态。结论 ZO-1基因启动子区甲基化状态可能与CML病情发展变化密切相关,可能是一个提示CML急变的分子标志物。

思维导图在血液科住院医师规范化培训教学中的应用

住院医师规范化培训是医学生毕业后教育的重要组成部分,对于培训临床高层次医师,提高医疗质量极为重要。血液学是内科住院医师规范化培训中的规定内容之一,但其具有专业性强、概念抽象、学科进展迅速、短时间内难以掌握等学科特点。大多数住培医师在血液科的轮转时间仅为2个月,如何在较短的时间内使住培医师掌握血液病相关知识是带教过程中的难题。思维导图是一种将放射性思维具体化的工具,在处理复杂的知识体系和项目管理方面具有显著的优势。我们尝试应用在教学过程中应用思维导图教学方法,有助于培养血液科住培学员的临床思维能力、解决临床实际问题的能力,同时提升带教教师的教学水平。

热电偶和二次仪表现场整体校准系统

长期以来,车间仪表人员都是把热电偶和二次仪表分别拆下来,送计量部门检定,检定完毕后再装回原处。热电偶在拆装过程中经常会损坏,并且测试费用非常高,所以有些人常常放弃热电偶的校准工作。热电偶和二次仪表的现场整体校准技术在目前还是一项新技术,结合长安公司兵器工业四五六区域计量站的项目对热电偶、二次仪表整体校准技术进行了一定的研究。介绍了热电偶和二次仪表现场校准系统的基本组成及测试的整个过程;讨论了面向对象的程序设计技术在整体校准系统中的应用方法;最后简要介绍了整体校准系统的主要功能模块和关键技术。

低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞的兴奋效应

低剂量辐射(LDR)是指剂量在0.2 Gy以内的低传能密度辐射或剂量在0.05 Gy以内的高传能密度辐射。早在1982年,Luckey首先提出LDR的兴奋效应〔1〕,认为LDR对生物体可能有益,随后的研究逐渐证实LDR的兴奋效应存在于机体的从整体到分子、细胞水平,LDR能够刺激动植物生长发育、提高生育力、促进细胞代谢、降低肿瘤发生率、活化淋巴细胞、

伴有t(8;21)的急性髓系白血病CD56表达及其预后意义

目的分析伴有t(8;21)的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者CD56表达情况及其预后意义。方法回顾分析我中心33例伴t(8;21)的初诊AML患者的临床特征、治疗疗效及远期预后。结果 CD56阳性与阴性患者在性别、FAB分型、是否伴有附加染色体异常、基因突变、血象、骨髓原始细胞比例及完全缓解率方面均无显著差异(均P>0.05)。CD56阴性患者无复发生存率高于阳性患者,但二者无统计学差异(P=0.273)。CD56阴性患者总生存率明显优于阳性患者(P=0.028)。结论 CD56可能是t(8;21)患者预后不良的指标之一。

急性早幼粒细胞白血病的治疗演变

急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)是急性髓系白血病的一种特殊亚型,早期病死率较高。APL治疗经历了蒽环类药物为主的联合化疗、全反式维甲酸(all-trans retinotic acid,ATRA)、三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)等阶段,随着其治疗方案的优化,该病已成为可以治愈的疾病之一。