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猪瘟病毒PCR-ELISA检测方法的初步应用
1
作者
王利平
金前跃
+3 位作者
刘兴友
王选年
谭东鹤
李鹏
《家畜生态学报》
北大核心
2023年第7期64-71,共8页
猪瘟(classicalswinefever,CSF)是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCR-ELISA检测方法是在PCR和ELISA基础上创新的一种新技术,其灵敏性和准确性都高于单纯的PCR检测和E...
猪瘟(classicalswinefever,CSF)是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCR-ELISA检测方法是在PCR和ELISA基础上创新的一种新技术,其灵敏性和准确性都高于单纯的PCR检测和ELISA检测。根据GenBank中猪瘟石门株序列,设计特异性引物,分别在5'端标记生物素和地高辛,经过PCR扩增后,加入到包被有链霉亲和素的ELISA反应板上,然后通过DIG-HRP抗体进行显色反应,建立PCR-ELISA检测方法。结果表明:PCR-ELISA最低检测到1.81×10^(4)拷贝/μL,普通PCR最低检测到1.81×10^(6)拷贝/μL,因此PCR-ELISA灵敏性比普通PCR高约100倍;对27份未知样品进行检测,普通PCR检测出阳性样品15份,阳性率为55.5%,PCR-ELISA检出20份阳性样品,阴性7份,阳性率为74%,阳性检出率增加18.5%;用建立的Real-TimePCR进行验证,检测结果与PCR-ELISA一致,两者的符合度为100%;然后用PK15细胞对普通PCR未检测出的阳性样品进行病毒分离培养,通过间接免疫荧光(IFA)及普通PCR检测,结果显示该5份样品均为阳性。说明本研究所建立的PCR-ELISA方法具有灵敏、特异、准确、快速、安全等优势,可应用于CSFV的快速诊断,为CSFV的流行病学监测提供有力保障。
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关键词
猪瘟病毒
PCR-ELISA
荧光定量PCR
间接免疫荧光
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职称材料
日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响
被引量:
1
2
作者
王利平
孙国鹏
+4 位作者
谭东鹤
张艳芳
刘鑫
李昱霖
李鹏
《中国饲料》
北大核心
2021年第14期113-116,共4页
文章旨在评估日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响。试验将840只平均体重为(58.01±0.67)g的1日龄肉鸡随机分为4组,每组5个重复,每个重复42只鸡。对照组和处理组分别饲喂基础日粮+0、1.5%、2.5%和3.5%海...
文章旨在评估日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响。试验将840只平均体重为(58.01±0.67)g的1日龄肉鸡随机分为4组,每组5个重复,每个重复42只鸡。对照组和处理组分别饲喂基础日粮+0、1.5%、2.5%和3.5%海藻,试验共开展42 d。结果:与对照组相比,3.5%海藻组42 d肉鸡体重显著提高1.39%(P<0.05),但22~42 d采食量及1~42 d料重比较对照组显著降低5.19%和4.80%(P<0.05)。3.5%海藻组22~42 d肉鸡料重比较对照组和1.5%海藻组分别显著降低7.2%和5.69%(P<0.05)。对照组血清胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白浓度显著高于3.5%海藻组(P<0.05),同时,对照组和1.5%海藻组血清总脂浓度较3.5%海藻组分别显著提高11.86%和7.73%(P<0.05)。与对照组相比,处理组血清超氧化物歧化酶活性分别显著提高10.78%、12.49%和11.89%(P<0.05)。与对照组相比,1.5%~3.5%海藻组42 d肉鸡抗绵羊红细胞抗体滴度分别显著提高20.63%、15.61%和18.52%(P<0.05)。结论:在本试验条件下,综合考虑生长性能、血清抗氧化和抗体滴度,1~42 d肉鸡日粮中海藻适宜的添加水平为3.5%。
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关键词
海藻
肉鸡
生长性能
抗氧化
免疫性能
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职称材料
戊二醛癸甲溴铵对链球菌的消毒效果评价
被引量:
2
3
作者
王利平
谭东鹤
+2 位作者
刘新月
赵会敏
李鹏
《现代畜牧兽医》
2021年第11期10-13,共4页
试验旨在研究配比不同浓度条件下的戊二醛癸甲溴铵溶液对链球菌的消毒效果。试验采用猪链球菌为指示菌,以抑菌圈试验和悬液定量杀菌试验结果为判断标准。结果显示,戊二醛癸甲溴铵无明显抑制细菌效果;悬液定量试验条件下,戊二醛癸甲溴铵...
试验旨在研究配比不同浓度条件下的戊二醛癸甲溴铵溶液对链球菌的消毒效果。试验采用猪链球菌为指示菌,以抑菌圈试验和悬液定量杀菌试验结果为判断标准。结果显示,戊二醛癸甲溴铵无明显抑制细菌效果;悬液定量试验条件下,戊二醛癸甲溴铵消毒剂有效浓度为3.00、3.60、4.50μg/L时对试验菌消毒效果达到100%。研究表明,根据试验结果确定了悬液定量条件下杀菌效果最佳的消毒剂的有效浓度,为畜牧业中开展消毒防疫工作提供参考。
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关键词
戊二醛癸甲溴铵消毒剂
猪链球菌
杀菌效果
抑菌圈
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职称材料
题名
猪瘟病毒PCR-ELISA检测方法的初步应用
1
作者
王利平
金前跃
刘兴友
王选年
谭东鹤
李鹏
机构
新乡学院生命科学与基础医学学院
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
出处
《家畜生态学报》
北大核心
2023年第7期64-71,共8页
基金
河南省重点研发与推广专项(科技攻关)(202102110094,212102310335)
新乡市科技攻关项目(GG2019018,GG2020018)。
文摘
猪瘟(classicalswinefever,CSF)是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCR-ELISA检测方法是在PCR和ELISA基础上创新的一种新技术,其灵敏性和准确性都高于单纯的PCR检测和ELISA检测。根据GenBank中猪瘟石门株序列,设计特异性引物,分别在5'端标记生物素和地高辛,经过PCR扩增后,加入到包被有链霉亲和素的ELISA反应板上,然后通过DIG-HRP抗体进行显色反应,建立PCR-ELISA检测方法。结果表明:PCR-ELISA最低检测到1.81×10^(4)拷贝/μL,普通PCR最低检测到1.81×10^(6)拷贝/μL,因此PCR-ELISA灵敏性比普通PCR高约100倍;对27份未知样品进行检测,普通PCR检测出阳性样品15份,阳性率为55.5%,PCR-ELISA检出20份阳性样品,阴性7份,阳性率为74%,阳性检出率增加18.5%;用建立的Real-TimePCR进行验证,检测结果与PCR-ELISA一致,两者的符合度为100%;然后用PK15细胞对普通PCR未检测出的阳性样品进行病毒分离培养,通过间接免疫荧光(IFA)及普通PCR检测,结果显示该5份样品均为阳性。说明本研究所建立的PCR-ELISA方法具有灵敏、特异、准确、快速、安全等优势,可应用于CSFV的快速诊断,为CSFV的流行病学监测提供有力保障。
关键词
猪瘟病毒
PCR-ELISA
荧光定量PCR
间接免疫荧光
Keywords
classical swine fever virus
PCR-ELISA
fluorescence quantification PCR
indirect immunofluorescence
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响
被引量:
1
2
作者
王利平
孙国鹏
谭东鹤
张艳芳
刘鑫
李昱霖
李鹏
机构
新乡学院生命科学与基础医学学院
出处
《中国饲料》
北大核心
2021年第14期113-116,共4页
文摘
文章旨在评估日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响。试验将840只平均体重为(58.01±0.67)g的1日龄肉鸡随机分为4组,每组5个重复,每个重复42只鸡。对照组和处理组分别饲喂基础日粮+0、1.5%、2.5%和3.5%海藻,试验共开展42 d。结果:与对照组相比,3.5%海藻组42 d肉鸡体重显著提高1.39%(P<0.05),但22~42 d采食量及1~42 d料重比较对照组显著降低5.19%和4.80%(P<0.05)。3.5%海藻组22~42 d肉鸡料重比较对照组和1.5%海藻组分别显著降低7.2%和5.69%(P<0.05)。对照组血清胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白浓度显著高于3.5%海藻组(P<0.05),同时,对照组和1.5%海藻组血清总脂浓度较3.5%海藻组分别显著提高11.86%和7.73%(P<0.05)。与对照组相比,处理组血清超氧化物歧化酶活性分别显著提高10.78%、12.49%和11.89%(P<0.05)。与对照组相比,1.5%~3.5%海藻组42 d肉鸡抗绵羊红细胞抗体滴度分别显著提高20.63%、15.61%和18.52%(P<0.05)。结论:在本试验条件下,综合考虑生长性能、血清抗氧化和抗体滴度,1~42 d肉鸡日粮中海藻适宜的添加水平为3.5%。
关键词
海藻
肉鸡
生长性能
抗氧化
免疫性能
Keywords
algae
broiler
growth performance
anti-oxidation
immunity
分类号
S831 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
戊二醛癸甲溴铵对链球菌的消毒效果评价
被引量:
2
3
作者
王利平
谭东鹤
刘新月
赵会敏
李鹏
机构
新乡学院生命科学与基础医学学院
浙江工商大学食品与生物工程学院
出处
《现代畜牧兽医》
2021年第11期10-13,共4页
基金
新乡市科技攻关项目(GG20200182021)。
文摘
试验旨在研究配比不同浓度条件下的戊二醛癸甲溴铵溶液对链球菌的消毒效果。试验采用猪链球菌为指示菌,以抑菌圈试验和悬液定量杀菌试验结果为判断标准。结果显示,戊二醛癸甲溴铵无明显抑制细菌效果;悬液定量试验条件下,戊二醛癸甲溴铵消毒剂有效浓度为3.00、3.60、4.50μg/L时对试验菌消毒效果达到100%。研究表明,根据试验结果确定了悬液定量条件下杀菌效果最佳的消毒剂的有效浓度,为畜牧业中开展消毒防疫工作提供参考。
关键词
戊二醛癸甲溴铵消毒剂
猪链球菌
杀菌效果
抑菌圈
Keywords
Glutaraldehyde decamethylamonium bromide
Streptococcus
Bactericidal effect
Bacteriostatic zone
分类号
S815 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒PCR-ELISA检测方法的初步应用
王利平
金前跃
刘兴友
王选年
谭东鹤
李鹏
《家畜生态学报》
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
日粮添加不同水平的海藻对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫性能的影响
王利平
孙国鹏
谭东鹤
张艳芳
刘鑫
李昱霖
李鹏
《中国饲料》
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
3
戊二醛癸甲溴铵对链球菌的消毒效果评价
王利平
谭东鹤
刘新月
赵会敏
李鹏
《现代畜牧兽医》
2021
2
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职称材料
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