高频超声心动图评价心梗小鼠左室整体功能和节段性室壁运动异常

目的通过建立小鼠心梗模型,探讨应用超高分辨率超声系统评价心梗小鼠心脏结构及心功能方面的应用价值。方法 25只雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,即开胸结扎左冠状动脉前降支建立心梗模型组(n=15)和仅在相同结扎位置穿针,不结扎的方法建立假手术组(n=10)。术前3 d和术后1周采用二维、M型、脉冲多普勒(PWD)、组织多普勒(TDI)和EKVTM超声技术对心梗小鼠心脏形态结构、室壁运动以及心功能进行评价。术后1周,取小鼠心脏进行HE染色并观察心肌组织结构。结果二维超声与HE色染均显示,心梗模型组心肌有明显的梗死区;心梗模型组与假手术组比较,心室明显扩大,室壁明显变薄,心室收缩功能与舒张功能均显著下降(P<0.05);局部室壁运动受阻严重,心室发生重构。结论采用2D超声心动图联合M型、PWD、TDI以及EKVTM超声心动图观察小鼠心梗模型能够更精准敏感地判断心肌梗死位置和梗死程度,为临床心肌梗死诊断、治疗和预后评估提供了参考价值。

压力超负荷心衰小鼠模型的心脏结构和功能病理进程特征

目的建立小鼠心衰模型,应用超声影像学和病理学技术综合评价疾病发展过程中的特征性的心脏功能和结构的改变。方法应用主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)手术技术建立压力超负荷致小鼠心衰模型,造模前0周和造模后2、4、8周采集主动脉弓缩窄处血流多普勒估测血管承受压力,采集B型和M型超声图像评价心脏结构左室收缩功能,采集二尖瓣口血流多普勒结合二尖瓣环组织多普勒评价心脏舒张功能,采集心脏组织进行组织病理学观察。结果超声影像学结果显示术后2、4、8周主动脉血流压力均显著性增加。术后2周主要表现为特征性左室壁代偿性厚度增加、内径减少,收缩功能代偿性增加,但伴随舒张功能受损和心肌纤维化;术后4周为过渡期,主要表现为从室壁肥厚到心室扩张的过渡、收缩功能开始下降、舒张功能持续性受损、心肌进一步纤维化;术后8周为表现为特征性的心室腔扩大,收缩、舒张功能均显著性降低,心肌细胞部分溶解并且显著性纤维化。结论通过评价小鼠主动脉弓缩窄后代偿性心肌肥厚期、过渡期到失代偿扩张型心衰等三个阶段的左室结构和功能,为主动脉弓缩窄模型的在基础和转化研究上的应用提供理论依据。

蕨麻小型猪心梗模型的建立及梗死边缘区的基因表达谱分析

目的建立应用蕨麻小型猪建立心肌梗死(心梗)的造模方法和具有临床意义的模型指标,探讨心梗边缘区的基因表达与代谢失偿的相关性。方法选取13只雄性蕨麻小型猪,随机分组,其中假手术对照组和心梗手术组各5只,不经任何手术处理的正常对照组3只。麻醉后在左前冠状动脉行靠近心尖的三分一降支主干支进行永久性结扎形成心肌缺血、梗死。术后4周进行心功能超声检测、采血并进行血清生化分析;安乐死后取梗死边缘区进行病理和基因芯片分析。结果超声图可见明显的心梗区域,数据显示心梗手术组的收缩末期左心室腔射血分数及短轴缩短率较假手术组分别降低32%和40%;血清中有谷草转氨酶、血清胆红素、乳酸脱氢酶等升高;病理切片显示梗死边缘区域的心肌纤维断裂、溶解,结缔组织增生,中性粒细胞和淋巴细胞增多;基因表达谱分析显示在梗死边缘区有2个调控心梗后重构和组织病理通路,3个炎症和免疫调节通路,8个脂肪、蛋白、糖能量代谢途径的基因表达有显著性改变。结论成功建立了蕨麻小型猪的心梗模型,其冠状动脉分支少,便于手术且成模稳定性,模型表征可与临床指标相吻合;模型梗死边缘区的基因表达谱特征与临床上代谢失偿表现有相同变化趋势,为心梗机理的研究提供了实验动物模型及心梗边缘区的具有参考价值的特征性改变。

蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全动物模型建立

本试验的目的是建立蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全动物模型及获得其评价指标。试验方法:蕨麻小型猪麻醉后在超声引导下,经右颈总动脉,采用套管插管戳破部分瓣膜建立主动脉瓣关闭不全动物模型;检测建模前,建模后即刻及1个月后动物主动脉弓血流峰值速度;血液生理学指标和血液生化指标,血压变化。试验结果:建模后即刻及1个月后主动脉弓血流峰值速度增加;血压降低;血液生理学指标无显著变化;血液生化指标中ALT、AST、CK、LDH建模1个月后显著升高,其他指标无显著变化。结论:在超声引导下经右颈总动脉套管插管建立蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全模型可行,操作简单、重复性好,效果可靠,建模后1个月不会发生自愈,初步获得主动脉瓣关闭不全动物模型评价指标。

紫苏籽提取物在ApoE-/-小鼠中的抗动脉粥样硬化和心脏保护作用

目的应用ApoE^-/-小鼠研究紫苏籽油性提取物(PSO)减少斑块形成和心脏保护的作用及分子机制。方法3月龄ApoE^-/-小鼠随机分为ApoE^-/-组(无药物处理)、PSO低剂量组、PSO高剂量组和阿托伐他汀组,B6小鼠为对照(WT组),给予常规饮食。连续治疗8周后,进行生化检测、HE染色病理学检测、超声检测、qPCR检测、ATP检测、Pro-Q Diamond染色。结果与WT组相比,ApoE^-/-小鼠出现心脏结构与功能异常。PSO治疗后,斑块面积减少,心脏结构和功能改善;ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达下调,PPARα和PGC-1α的mRNA表达上调,胞內ATP含量增加,TnI的磷酸化水平增加。结论PSO抑制ApoE^-/-小鼠动脉斑块形成、维持正常心脏结构和功能,其可能通过调节PPARα/PCG-1α/NRF-1轴增加ATP和肌丝蛋白磷酸化、改善能量代谢、发挥心脏保护的作用。

miR-144、miR-21-3p、miR-142-5p及miR-27b-3p对心肌梗塞后血管再生的作用

目的以五指山小型猪心肌梗塞模型为研究对象,筛选对心肌梗塞易感且可能调控血管生成素-2(ANGPT-2,促血管生长和形成的重要基因)表达的miRNAs。以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为细胞模型,探索候选miRNAs对人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移及细胞血管形成中的作用。方法通过小RNA测序和生物信息学软件预测靶标于ANGPT-2,并且在心肌梗塞组和对照组中差异表达的miRNAs,利用Edu法、Transwell法、体外实验法检测候选miRNAs对HUVECs的增殖、迁移和血管成腔的影响。结果miR-144、miR-21-3p、miR-142-5p及miR-27b-3p是潜在的靶标于ANGPT-2,并且在心肌梗塞和对照两组表达水平差异显著的miRNAs。miR-144不能直接影响HUVECs的增殖,但能抑制细胞的迁移及血管形成;miR-21-3p能抑制HUVECs增殖和迁移,但促进HUVECs血管形成;miR-142-5p和miR-27b-3p能抑制HUVECs增殖、迁移及成管;miR-142-5p和miR-27b-3p能显著抑制ANGPT-2的转录表达。结论心肌梗塞后,miR-142-5p和miR-27b-3p可能通过靶标于ANGPT-2的3’UTR并且抑制ANGPT-2的转录表达,抑制血管内皮细胞的增殖、迁移及血管形成,进而抑制血管再生。

麻醉镇痛管理在实验猪开胸心梗造模手术中的研究进展

猪的心肌梗死开胸造模手术须在麻醉条件下进行。猪的麻醉镇痛管理与造模手术成败密切相关,但文献却缺少详细描述与分析探讨。本文结合文献分析总结麻醉镇痛管理中麻醉用药、麻醉手段、麻醉监测评估、麻醉常见危机以及术前术后的麻醉管理,为建立猪心肌梗死造模规范提供参考。

环氧二十碳三烯酸通过线粒体途径保护缺血/再灌注损伤机制的研究进展

越来越多的证据表明环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)能够通过多种作用机制在组织器官缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤中发挥保护性作用,其中线粒体途径在这些作用机制中有着重要的地位。然而作为I/R损伤防治的重要靶点,线粒体途径在EETs介导的I/R损伤保护机制中却未得到很深入的探讨。本文就线粒体K+通道、线粒体通透性转换孔、线粒体促凋亡蛋白以及线粒体结构完整性在EETs减轻I/R损伤中所起的作用作一综述,为以后更深层次的研究提供理论基础,同时这对于寻找I/R新的防治方式和靶点、保护重要组织器官、改善患者的病情及预后都有着重要意义。

西藏小型猪心肌梗死模型的制备及超声动态心功能进展评价

目的:建立应用于西藏小型猪心肌梗死模型的造模方法,探讨术中室颤的抢救技术并利用超声进行动态的心功能评价完善模型的评估。方法:西藏小型猪全身复合麻醉后,开胸永久结扎第二角支和第三角支之间的左冠状动脉前降支远端1/3处,制备西藏小型猪心肌梗死模型。在手术期间进行ECG监测,造模前、术后2、3、4周分别行超声心动图检查,术后4周全身麻醉下开胸取心脏组织做病理切片。结果:左冠状动脉结扎后可见局部心肌颜色变灰白色并且心电图可见ST段抬高;术后多时间点的超声心动图检查表明随着术后时间的推进,心肌收缩功能逐渐减弱;术后4周病理切片显示梗死边缘区心肌细胞水不完整、组织间隙明显增大、清晰可见结缔组织,可见多量的中性粒细胞及淋巴细胞;梗死区域的心肌结构失去完整性并显示瘢痕组织大量形成。结论:成功建立西藏小型猪的心肌梗死模型,术后多时间点的超声检查能有效评估术后心功能的进展。

Slit2基因过表达小鼠的生物学参数及心脏生理功能分析

目的测量评价人Slit2基因过表达小鼠(Slit2-Tg小鼠)的基本生物学参数、心脏超声形态功能及转录组测序等,为该小鼠在生物医学研究应用提供参考。方法观察比较近交系繁育的Slit2-Tg和C57BL/6 J小鼠繁育情况、运用PCR技术确定基因型、采集血液进行血常规及血生化检测、收集脏器组织进行蛋白表达和病理分析,以及对心脏进行超声评价和转录组测序分析。结果 Slit2-Tg小鼠的每窝产仔数显著高于C57BL/6 J小鼠,并可检测到Slit2基因和蛋白高表达。Slit2-Tg小鼠脾的脏器系数有显著增加,但未见组织结构异常。Slit2-Tg小鼠的红细胞、血小板、嗜酸性粒细胞、葡萄糖、球蛋白、尿素氮、甘油三酯、高密度脂蛋白、动脉粥样硬化指数具有显著改变。Slit2-Tg小鼠的心脏除舒张末期左心室前壁厚度较小外,其他指标差异无显著性,其心脏组织受检的17 513个基因中有535基因表达显著升高或降低,主要涉及15个生物进程和信号转导通路。结论完善了Slit2-Tg小鼠生物学参数,并提示了此模式动物亦适用于心血管疾病相关研究。