实时荧光环介导等温扩增快速分型致泻大肠埃希氏菌方法的建立

致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)是一种重要的食源性致病菌,该研究立足DEC目前流行率高、基层分型困难的现状,建立了快速分型5种DEC的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。针对DEC的8段特征性毒力基因pic、aggR、lt、st、stx 1、stx2、escV、invE及大肠埃希氏菌属特异性基因uidA设计LAMP引物,优化反应体系,并对方法的分析性能及临床菌株分型效果进行了评价。结果显示,所建立的方法对pic和escV的检出限是1 ng/μL,对aggR、stx 1、invE和uidA的检出限是100 pg/μL,对lt、st和stx 2的检出限是10 pg/μL,该方法灵敏度与特异度均为100%,DEC型别间无交叉反应,对临床菌株的分型与实际结果完全一致。方法快速简便、设备要求低,借助恒温荧光读取设备可在40 min内迅速判定待检菌株是否为DEC及其致病类型,可满足各机构现场快速检测的需求。

高中数学解题技巧的几点思考

在学习数学的过程中,掌握解题的技巧是其中不可缺少的一项能力,通过观察构建解题技巧首先要对题目类型进行观察,把握住题目的关键,之后再有目的性地进行加工,对题目的细节进行解析.学习数学,不是要对教材死学,而是要面对高考,使自己的思维灵活性得到锻炼,使自己的开放性思维得以开发,通过解题技巧的运用让自己具有举一反三的能力,养成良好的解题习惯,通过标准的数学语言来对数学题进行表达.