真菌内生蜡样芽孢杆菌7-1Y的分离鉴定及其功能探索

【目的】真菌内生细菌是一类特殊细菌,在寄主真菌体内及生态系统中发挥重要作用。前期从盘龙参菌根中筛选出一株含有内生细菌的真菌YZU172013(Phoma sp.),本研究进一步分离和鉴定YZU172013的内生细菌,并探索其生物学功能。【方法】首先通过16S rDNA序列扩增和SYTO-9染色检测YZU172013内生细菌的存在,接着用菌丝组织研磨法分离内生细菌,并通过形态及分子特征对其进行鉴定;然后运用特异引物验证细菌的内生性,并初步探究内生细菌的产胞外酶和耐药性等生物学功能;最后通过喂饲及注射初步探索了内生细菌的杀虫活性。【结果】真菌YZU172013能检测到细菌16S rDNA序列且菌丝内存在较多的细菌颗粒类似物。从YZU172013菌丝内分离出一株内生蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus 7-1Y),其营养体细胞仅为(1~1.5)μm×(0.3~0.5)μm,比普通蜡样芽孢杆菌小很多;通过蜡样芽孢杆菌特有的高丝氨酸环内酯酶(AHLase)序列扩增证明了其内生性。7-1Y具有水解淀粉、纤维素、解磷等功能。喂饲72 h后,家蚕代谢紊乱;注射24 h后家蚕的死亡率为100%。【结论】首次分离了一株真菌内生蜡样芽孢杆菌,该菌株7-1Y可产生多种胞外酶,且该细菌代谢物对昆虫血细胞具有较强毒性,具有很好的生防应用潜质。研究结果为真菌内生细菌的探究提供重要材料,为生防资源挖掘提供新思路。