孟德尔随机化法对乳酸水平降低罹患乳腺癌风险的研究

目的 临床研究表明乳酸水平与乳腺癌有关。然而,乳酸水平与乳腺癌之间的因果关系仍有待确定。方法 本研究从全基因组关联分析(Genome wide association study,GWAS)数据库中获得了乳酸水平和乳腺癌的数据。然后,进行了两样本的孟德尔随机化(Mendelian Randomization,MR)研究,以确定乳酸水平对乳腺癌是否存在因果关系。结果 确定了乳酸水平对乳腺癌存在负向因果关系,MR逆方差分析(OR=0.9886,95%CI=0.974,0.997,P=0.012)。结论 MR研究表明,乳酸水平可能会降低乳腺癌患病风险,这将有助于了解乳酸水平在乳腺癌发病中的作用,为临床研究提供新的见解。

将大肠杆菌OmpA信号肽改造成为抗菌肽的研究

目的探讨将大肠杆菌OmpA信号肽改造成抗菌肽的方法以及衍生肽的杀菌活性。方法以由21个氨基酸残基组成的大肠杆菌OmpA信号肽(P-AQA)为模板,通过改变其C末端的氨基酸组成,分别合成衍生多肽:(MKKTAIAIAVALAGFARVRQK,P-RQK)、(MKKTAIAIAVALAGFARRKKK,P-KKK)、(MKKTAIAIAVALAGFAD VDQD,P-DQD)。采用琼脂铺板计数法测定以上3条衍生多肽及肠杆菌OmpA信号肽对革兰阳性菌(G^+)(金黄色葡萄球菌)和革兰阴性菌(G-)(大肠杆菌)的杀菌活性。结果天然信号肽P-AQA不溶解水,无杀菌活性;在信号肽C末端加入酸性氨基酸的衍生肽P-DQD对G^+菌和G-菌均无杀菌作用;其余两条在末端加入碱性氨基酸的多肽对G^+菌和G-菌均有较强的杀菌作用,其中末端带有5个碱性氨基酸的多肽(P-KKK)其杀菌活性强于有3个碱性氨基酸的多肽(P-RQK)5倍。结论将大肠杆菌Omp A信号肽C末端中的中性氨基酸替换为碱性氨基酸后,具有明显的杀菌活性,其杀菌活性可能与碱性氨基酸的数量有关。

人ⅠB型磷脂酶A_2N端衍生多肽结构与杀菌活性关系的研究

目的探讨人ⅠB型磷脂酶A2(groupⅠB phospholipase A2,PLA2ⅠB)N末端衍生12肽的结构与杀菌活性的关系。方法以人PLA2ⅠB一级结构N末端的12个氨基酸残基为模板,分别合成结构不同的多肽,采用琼脂铺板计数法,记录并计算不同浓度(1000、200、40、8μg/m L)的多肽对革兰阳性(G+)菌(金黄色葡萄球菌)和革兰阴性(G-)菌(大肠埃希菌)的杀菌率。结果PLA2-Q4D、PLA2-C11R抗菌活性明显降低。第4位中性氨基酸Q替换为酸性氨基酸后(PLA2-Q4D),失去了杀G-菌的作用,杀G+菌的活性也明显降低;第11位C替换为精氨酸后(PLA2-C11R)也明显失去了杀G-菌的作用,杀G+菌的活性也明显降低。结论人PLA2ⅠB衍生肽PLA2的杀菌作用与其疏水性氨基酸的比例和位置有关,也与碱性氨基酸的量和位置有关,在特定位置改变疏水性氨基酸可降低它的杀菌活性,增加碱性氨基酸的量不一定能提高它的杀菌活性。

衍生自大肠杆菌OmpA信号肽的多肽P-KKK杀菌作用研究

目的研究和比较大肠杆菌OmpA信号肽衍生多肽P-KKK在体外对不同细菌的杀菌效应。方法采用琼脂铺板计数法测定衍生多肽P-KKK对革兰阳性(G+)菌和革兰阴性(G-)菌的杀菌活性,将不同浓度的衍生多肽P-KKK分别与3种G+菌(金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌)和3种G-菌(大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓杆菌)在37℃孵育2 h,铺板后置于37℃中培养18~24 h,记录每一琼脂板上菌落形成数量(CFU),计算多肽P-KKK的杀菌率。结果衍生肽P-KKK对G+菌具有较强的杀菌活性,浓度在200 ug/m L时,能杀灭98.5%以上的G+菌,浓度为40 ug/m L时杀菌率也达80.2%以上;对G-菌也有较强的杀菌活性,浓度在200 ug/m L时,能杀灭93.8%以上的G-菌,浓度为40 ug/m L时杀菌率也达15.2%~99.7%。结论大肠杆菌OmpA信号肽衍生肽P-KKK对G+菌及G-菌均具有明显的杀菌活性,进一步对其结构与功能进行研究将有助于开发出新型抗菌药物。