血红素加氧酶-1在铁代谢中的作用

铁是机体必需的微量元素，有着广泛的生物学作用，包括氧化运输和细胞呼吸作用，缺铁会引起细胞生长停滞或死亡，铁过载会使细胞发生氧化应激进而损伤细胞膜、蛋白质、核酸。血红素加氧酶-1（HO-1）分解血红素产生铁是铁重复利用最主要的来源，在铁代谢中的作用至关重要。

雌激素受体GPR30在上皮性卵巢癌中的表达及其与MMP-9表达的相关性

本文旨在研究新型雌激素受体——G蛋白耦联受体30(G protein-coupled receptor30,GPR30)在上皮性卵巢癌中的表达,及其与基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的相关性。收集39例上皮性卵巢肿瘤组织标本,包括上皮性卵巢癌30例(浆液性囊腺癌19例、粘液性囊腺癌5例和子宫内膜样癌6例)、良性上皮性卵巢肿瘤9例,并取4例正常卵巢组织进行对照,应用免疫组织化学法检测GPR30和MMP-9的表达,使用?2检验、Fisher’s精确检验和Spearman等级相关分析等统计学方法对所得数据进行统计分析。结果显示,上皮性卵巢癌中GPR30的高表达率显著高于良性卵巢肿瘤(P<0.01)和正常卵巢组织(P<0.05);上皮性卵巢癌中MMP-9的高表达率显著高于正常卵巢组织(P<0.05),但与良性卵巢肿瘤无明显差异。肿瘤病理类型、分期和患者年龄因素与GPR30高表达率的相关性分析显示:不同病理类型上皮性卵巢癌的GPR30高表达率之间存在显著性差异(P<0.05),而各病理类型的MMP-9高表达率之间没有差异;临床III^IV期上皮性卵巢癌的GPR30高表达率显著高于I^II期(P<0.05),二者MMP-9高表达率之间没有差异;三个年龄组病例中的GPR30高表达率之间未见明显差异,三者MMP-9高表达率之间亦没有差异。Spearman等级相关分析显示上皮性卵巢癌组织中GPR30与MMP-9的表达之间具有正向相关性(P<0.01)。以上结果提示,GPR30可能参与上皮性卵巢癌的发生发展,并与其侵袭和转移具有一定的相关性,可作为卵巢癌早期诊断和恶性程度判断的指标之一。

G蛋白耦联受体30(GPR30)在上皮性卵巢癌中的表达与增殖相关基因c-fos、cyclinD1表达的相关性

目的:探索新型雌激素受体G蛋白耦联受体30(G protein coupled receptor 30,GPR30)在人上皮性卵巢癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测30例上皮性卵巢癌组织中GPR30、增殖相关基因c-fos和cyclinD1的表达,并以9例良性卵巢肿瘤、4例正常卵巢组织作对照。结果:GPR30在上皮性卵巢癌的表达水平(80.0%)显著高于良性卵巢肿瘤(44.4%)和正常卵巢组织(25.0%)(P<0.01;P<0.05)。GPR30和c-fos的表达与上皮性卵巢癌的病理类型、FIGO分期有关,在浆液性囊腺癌、FIGOⅢ-Ⅳ期的表达水平显著升高(P<0.05)。未见cyclinD1的表达与上皮性卵巢癌临床病理参数的关系(P>0.05)。上皮性卵巢癌中GPR30与c-fos、cyclinD1的表达具有正相关性(P<0.01;P<0.05)。结论:GPR30可能通过c-fos、cyclinD1促进卵巢癌增殖,参与上皮性卵巢癌的发生、发展。

以pET-SUMO质粒为载体的凋亡素组合肽基因工程菌的构建

目的构建以pET-SUMO为载体的凋亡素组合肽基因工程菌,建立简便易行、能够放大的重组凋亡素组合肽纯化方法和工序。方法以pET-SUMO质粒为表达载体,构建凋亡素组合肽基因工程菌,通过镍柱纯化、SDS PAGE、小肽电泳检测重组凋亡素组合肽表达水平,选取适合转化、生产需求的基因工程菌株。结果测序证实凋亡素组合肽与pET-SUMO成功重组,第78~209碱基为凋亡素组合肽的编码序列,200 mmol/L咪唑洗脱融合蛋白表达水平高,收率高。结论确定pET-SUMO凋亡素组合肽基因工程菌为凋亡素组合肽转化开发的备用菌株。

pTWIN质粒的改造及凋亡素组合肽基因工程菌的构建

目的构建凋亡素组合肽基因工程菌,改善组合肽的纯化工艺。方法以pTWIN1质粒为表达载体,构建凋亡素组合肽基因工程菌,对质粒进行改造,用6-His取代几丁质结合蛋白,实现用镍离子柱替换几丁质柱,一次层析纯化组合肽。结果构建了高水平表达凋亡素组合肽的基因工程菌;对pTWIN1质粒进行改造,用镍离子柱替代几丁质亲和柱纯化组合肽,实现了通过镍离子柱一次层析直接获得组合肽,内含肽自动断裂,不需要酶切,改造后的pTWIN1载体适用于凋亡素组合肽的开发,建立了纯化重组凋亡素组合肽方法。结论成功构建了高水平表达凋亡素组合肽的基因工程菌,成功地对pTWIN1质粒进行改造,为在生产中用镍离子柱纯化组合肽降低成本奠定了基础。