黄脸油葫芦精巢TeHsc70和TeHsp90敲低对20E相关基因表达的影响

为了研究Hsc70和Hsp90与ERR和20E下游初、次级应答基因的关联性,明确Hsc70和Hsp90如何参与20E信号通路进而调控雄性生殖,以雄性成体黄脸油葫芦(Teleogryllus emma Ohmachi&Matsuura)为实验对象,设实验组、阴性对照组和Control组。实验组注射ds TeHsc70和ds TeHsp90;阴性对照组注射EGFP-dsRNA,干扰48、72和96h后qPCR检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)效率和20E相关基因的表达。结果显示,TeEcR、TeERR和TeUsp在空白组成体精巢中高表达,并且TeERR mRNA的表达显著高于TeEcR和TeUsp(P<0.05)。ds TeHsc70+ds TeHsp90干扰96h后,TeHsc70和TeHsp90 mRNA的表达显著下调(P<0.05),并且TeERR和20E初、次级应答基因TeEcR、TeUsp、TeE75B和TeHR3mRNA的表达也随之极显著下调(P<0.01)。据此推测,TeHsc70、TeHsp90和TeERR均参与20E信号通路,并且TeHsc70、TeHsp90和TeERR对于20E信号通路维持精巢的发育和形态建成方面必不可少。

拟黑多刺蚁5-HT2A受体基因cDNA的克隆及表达

【目的】克隆拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)5-HT2A受体基因的cDNA序列,并对其核苷酸序列和系统进化进行分析,检测其在拟黑多刺蚁不同发育阶段幼虫和不同品级成虫mRNA的表达情况,为探究5-HT2A受体基因对拟黑多刺蚁生长发育的调控规律提供证据。【方法】从拟黑多刺蚁中提取总RNA,RT-PCR扩增并克隆Pv5-HT2A受体基因;用ProtParam预测蛋白质序列,Blast比较蛋白质序列同源性,用Clustal X进行核酸和氨基酸序列比对,MEGA 6.0比邻法生成系统进化树。利用荧光实时定量PCR检测Pv5-HT2A受体基因在拟黑多刺蚁不同发育阶段幼虫及不同品级成虫mRNA的表达水平。【结果】克隆得到Pv5-HT2A受体基因的cDNA序列,全长2 965bp,开放阅读框长1 926bp,编码641个氨基酸。疏水性分析显示,Pv5-HT2A受体氨基酸具有7个跨膜疏水区,属于典型的G蛋白偶联受体类型。系统发育分析表明,拟黑多刺蚁与红收获蚁的亲缘关系最近,相似度达69%。荧光实时定量PCR结果显示,拟黑多刺蚁5-HT2A mRNA在不同发育阶段和不同品级成虫中均有表达,其中卵、3龄幼虫及蛹期的表达量较高;成虫中,雄蚁表达量最高,雌蚁的表达量最低。【结论】拟黑多刺蚁与其他昆虫的5-HT2A受体基因存在相关性,推测5-HT2A受体基因对拟黑多刺蚁的生长发育具有一定调节作用。

对高校体育专业课中德育的思考——以排球课程为例

在体育教学中渗透德育很有必要。如何在高校体育专业课中进行德育,这个问题值得高校体育教师深入思考。文章采用文献资料法、逻辑分析法等方法,对高校体育专业课中的德育进行研究,分析了高校体育专业课中实施德育的必要性、原则及途径。研究发现,在体育专业课中进行德育,顺应国家教育体制改革的趋势,合乎德育与体育相辅相成的内在关系,契合教育本质属性的要求。文章建议,高校体育教师应坚持显性德育与隐性德育相融合、言传与身教相统一、适时与适度相结合的原则,将德育贯穿于体育教育教学全过程。