猪Sirt5基因的克隆及其腺病毒载体的构建和鉴定

为了从猪脑中克隆得到Sirt5基因,并构建腺病毒载体,提取长白猪脑组织总RNA,利用RT-PCR和PCR扩增得到Sirt5基因。再将此基因克隆至穿梭载体上,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-IRES-Sirt5。经酶切线性化,电击转化已含骨架载体pAdEasy-1DNA的BJ5183+感受态菌,得到重组腺病毒质粒Ad-Sirt5。重组腺病毒质粒经酶切线性化鉴定。结果本试验获得的Sirt5基因与NCBI公布序列一致。利用细菌同源重组技术构建重组腺病毒载体,经酶切鉴定正确。表明本试验成功克隆得到Sirt5基因,并成功构建Sirt5基因的腺病毒载体。

久违了,《新闻界》!

编辑同志:我是50年代开始写新闻的老通讯员了,最近几年由于担任中学领导职务,写稿时间少了,近两年《新闻界》也没订了。4月28日去县上参加教育工作会议,未报到前,去县委报道组闲谈,发现办公桌上92年的几期《新闻界》,随手翻翻第1期。

注射用头孢硫脒生产线分装机清洁验证中取样方法及检验方法的建立

目的建立注射用头孢硫脒生产线分装机清洁验证的取样方法及检验方法。方法采用擦拭法作为头孢硫脒清场过程中的取样方法,采用高效液相色谱(HPLC)法检测清场过程微量的残留头孢硫脒。结果头孢硫脒的取样回收率为80.72%,RSD为5.3%;检验方法回收率均在97.0%～99.1%之间,RSD为0.7%;溶剂以及取样棉签均对主成分峰无干扰;检测限为0.094μg·mL^(-1)。结论该方法准确、可靠,能满足验证需求。