日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾细胞增殖、亚群及细胞因子的动态变化

目的观察日本血吸虫重组Bb（p GEX-Sj32）疫苗诱导免疫鼠脾细胞免疫应答的动态变化,探讨该重组疫苗的免疫机制。方法 88只BALB/c鼠随机分为口服组和滴鼻组,口服组小鼠经口服单次接种106克隆形成单位（CFU）重组疫苗,滴鼻组小鼠经滴鼻单次接种105CFU重组疫苗;于免疫后0~20周内间隔2周每组随机剖杀4只小鼠,取脾并制备脾细胞悬液,分别经未刺激（脾细胞悬液）、Sj AWA刺激和Con A刺激培养。MTT法检测脾细胞增殖效率,流式细胞术检测脾CD4＋T细胞和CD8＋T细胞亚群变化,双抗体夹心ELISA法检测培养上清液中TNF-α、IL-10和IL-12表达水平。结果与0周相比,未刺激、Sj AWA刺激和Con A刺激时,口服组和滴鼻组脾细胞均分别在免疫后2~16周和2~18周发生极显著增殖（P〈0.01）;两组CD4＋T细胞亚群均于免疫后2~12周显著升高（P〈0.01）,CD8＋T细胞亚群在观察期间升高不明显;不同培养条件下,口服组脾细胞因子TNF-α、IL-10和IL-12水平均分别在免疫后2~14周、2~18周和2~14周升高,于8周、10周和6周达峰值;滴鼻组3者分别在免疫后2~14周、2~18周和2~18周升高,于8周、10周和8周达峰值。结论日本血吸虫重组Bb（p GEX-32）疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。

日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗免疫BALB/c小鼠诱导免疫应答的动态研究

目的动态观察日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj32）疫苗免疫BALB/c小鼠后诱导的免疫应答,探讨该疫苗的免疫机制。方法将日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj32）疫苗分别经口服（PO）和滴鼻（IN）途径免疫BALB/c小鼠,在免疫后0~20周,每隔2周每组随机剖杀4只小鼠,取脾并制备脾细胞悬液,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测脾细胞增殖水平、流式细胞仪（FACsort）检测脾CD4＋和CD8＋T淋巴细胞亚群和脾细胞凋亡、双抗体夹心ELISA法检测血清及脾细胞培养上清液中细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平和血清抗体IgG及其亚类、IgE和IgA的动态变化。结果当SjAWA和ConA刺激或不刺激时,PO组和IN组脾细胞增殖水平均于免疫后6周达最高水平,分别于6周和8周达最高脾细胞凋亡发生率,脾CD4＋T细胞亚群百分比分别在6周和8周达峰值,两组CD8＋T细胞亚群百分比在免疫后2~20周升高不显著,PO组脾细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平均分别于10周、6周和8周达峰值,IN组分别在10周、8周和8周达峰值,口服组血清抗体IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgA水平均于8周达峰值,而IN组除IgG和IgA于8周达峰值外,其余均于12周达最高水平,IgE于14周达峰值,两组血清细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平分别在免疫后（PO组）14、6和8周及（IN组）8、6和8周达最高水平。结论该疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。

电动车辆电磁辐射骚扰测试与整改应用

通过对电动车辆的电磁辐射骚扰测试技术进行解析,并以某一纯电动工程车电磁场辐射骚扰特性(9KHz^30MHz)进行评估测试,针对测试结果进行辐射骚扰源分析,提出相应的整改方案,使其满足国家标准GB/T 18387-2008的要求。

解析国际电磁兼容标准—ISO 7637-3

主要介绍了ISO 7637-3道路车辆除电源线外的导线通过容性和感性耦合的电瞬态发射测试方法与步骤,以评价车载电子电气设备对耦合到非电源电路的电瞬态的抗扰度。并详细阐述了电容耦合(CCC)、直接电容耦合(DCC)和电感耦合(ICC)三种方法的瞬态试验脉冲的应用。

电动汽车整车控制器电磁兼容性设计与试验研究

针对电动汽车整车控制器电磁辐射和电磁抗扰性问题,提出电磁兼容设计技术方案,并选取某电动汽车整车控制器进行试验,进一步研究整车控制器内部构造和原理,提出相应的整改措施,使其满足设计要求。

汽车仪表电磁兼容测试与研究

简要介绍目前汽车仪表的电磁兼容试验的国家标准,阐述了汽车仪表在进行电磁兼容试验时的测试方法,试验中可能出现的问题和引起的电磁兼容问题的潜在原因,并针对具体的试验项目给出了电磁兼容的设计对策。

日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21中的表达

目的构建日本血吸虫(Sj)重组质粒pGEX-Sj32并研究其在大肠埃希菌BL21中的表达效率。方法从该实验室保存的BL21(pET28α-Sj32)重组菌中抽提质粒pET28α-Sj32,PCR扩增Sj32抗原编码基因,定向克隆入穿梭载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Sj32。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达;表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果 PCR成功扩增出Sj32编码基因,并成功构建了重组质粒pGEX-Sj32;SDS-PAGE显示相对分子质量约为58×103的重组蛋白,薄层扫描分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的21%;Western blot显示重组蛋白可被日本血吸虫感染兔血清识别。结论成功构建日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj32,该重组质粒在大肠埃希菌BL21中得到了高效表达,且表达蛋白具有特异的抗原性。

汽车电磁骚扰抑制技术研究与应用

围绕着汽车电子电气设备的电磁兼容性问题,介绍汽车电磁骚扰的来源和危害,阐述了抑制和削弱电磁骚扰技术主要措施,并针对暖风电动机电磁骚扰特性进行分析,提出相应的整改方案,对整改前后的测试结果进行详细比对,电磁骚扰特性得到了大幅的改善和提高。

日本血吸虫重组Bb疫苗不同途径免疫BALB/c小鼠不同时间诱导的免疫应答作用

目的：探讨日本血吸虫重组两歧双歧杆菌（rBb）疫苗不同途径免疫BALB/c小鼠后不同时间诱导的免疫应答作用,阐明该疫苗的免疫应答机制。方法：将88只BALB/c小鼠随机分为2组,每组44只,分别经皮下注射（皮下注射组,SC组）和鼻腔黏膜（鼻腔黏膜接种组,IN组）接种免疫小鼠,在免疫后0-20周每2周每组随机取4只小鼠,无菌取脾,制备悬浮脾细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测脾细胞增殖活性,流式细胞仪（FACsort）检测T细胞亚群和脾细胞凋亡率,双抗体夹心ELISA法检测脾细胞上清液中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素10（IL-10）和白细胞介素17（IL-17）的动态变化。结果：与免疫0周时比较,SC组小鼠脾细胞增殖活性于免疫后8周达到峰值（P〈0.05）,IN组小鼠于免疫后4周达到峰值（P〈0.05）。与免疫0周时比较,SC组和IN组小鼠CD4＋T细胞均于免疫后8周达到峰值（P〈0.05）;CD8＋T细胞分别于8周和6周达到峰值,但差异无统计学意义（P〉0.05）。与免疫0周时比较,2组小鼠脾细胞上清液中IFN-γ水平均于免疫后2周达到峰值（P〈0.05）,SC组和IN组IL-17水平分别于免疫后14和12周达到峰值（P〈0.05）。与免疫0周时比较,SC组小鼠脾细胞凋亡率于免疫后2周达到峰值（P〈0.05）,IN组于4周达到峰值（P〈0.05）。IN组与SC组小鼠各检测指标比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：经皮下注射和鼻腔黏膜途径接种的日本血吸虫重组Bb疫苗早期即可诱导小鼠产生有效的免疫应答,以Th1型免疫应答为主,2种免疫途径所诱导的免疫应答无明显差异。

日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST)疫苗免疫BALB/c小鼠脾细胞动态观察

目的观察日本血吸虫重组Bb（pGEX—Sj26GST）疫苗免疫BALB／c小鼠后脾细胞增殖、亚群和凋亡的动态变化。方法将疫苗分别经皮下注射（SC组）和鼻腔粘膜接种（IN组）免疫BALB／c鼠，在免疫后O～22周每2周每组随机剖杀4只小鼠，无菌取脾，制成单个悬浮脾细胞，用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测脾细胞增殖水平、用流式细胞仪（FACsort）检测T细胞亚群和脾细胞凋亡状况。结果未刺激及sjAWA刺激时SC组小鼠脾细胞增值水平于免疫后4～20周明显升高，ConA刺激时于4～18周显著升高，均于免疫后8周达最高水平；IN组脾细胞增殖水平原液组、SjAwA组和ConA组分别于2～18周、2～10周及14～18周、2～8周和12～18周显著升高，均于免疫后4周达最大值（P〈0．01或P〈0．05）。SC组和IN组CD＋T细胞分别于免疫后2～14周、2周及6～16周升高，并于8周达峰值（P〈0．01或P〈0．05）；两组CD＋T细胞均于2～20周轻微升高，分别于8周和6周达较高值（P〉0．05）。未刺激和ConA刺激时SC组脾细胞凋亡水平分别于免疫后2～4周、2～6周升高显著，均于免疫后2周达最大值（P〈O．01或P〈O．05）；IN组均于4周显著升高并达峰值（P〈O．01）。结论日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj26GST）疫苗可诱导脾细胞的增殖，增加cD＋T细胞的数目，抑制脾细胞的凋亡而发挥保护性免疫应答。

福特汽车电子瞬态传导抗扰性试验分析

对福特公司汽车EMC标准ES-XW7T-1A278-AC《零部件电磁兼容-全球需求和测试程序》中关于电子瞬态传导抗扰性试验进行了研究。从标准要求、原理分析、应用分析等方面进行了阐述,与国际标准进行了对比,提出了该试验的解决方案及自动实施步骤。

GB/T 18655-2010对于汽车零部件辐射发射试验的研究

深入研究GB/T 18655-2010,详细阐述了汽车零部件辐射发射的测试流程、测试布置、限值等方面。并对比GB 18655-2002,进行了新旧标准不同点的比较,以提高对新版标准的理解。

农村饮水安全工程项目可持续性评估研究

针对农村饮水安全工程建设项目中存在的持续性不足的问题,探索了农村饮水安全工程项目可持续性评估的指标体系,构建了基于PPP模式的农村饮水安全工程可持续性评估模型,采用层次分析法并从工程项目的经济、社会以及环境效益角度出发,评估农村饮水安全工程建设的可持续性综合效益值。研究可为农村饮水安全工程建设的可持续性评估提供决策依据。

新形势下高职院校辅导员培育学生职业素养的工作路径探析

本文针对新形势下高职院校学生就业难的情况,分析了培育学生职业素养对于增强学生就业竞争力的重要作用。尤其是高职院校辅导员在学生职业素养培育过程中起着重要作用,本文主要从学生的职业价值观树立、职业素养的培育方向和途径方面着手,探析高职院校辅导员培育学生职业素养的工作路径。

表面激素结合支气管扩张剂长期吸入治疗COPD的疗效分析

目的探讨表面激素结合支气管扩张剂长期吸入治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效。方法病例资料来源于我院2013年2月—2014年10月收治的慢性阻塞性肺疾病患者,共100例,随机分成2组各50例。对照组采取支气管扩张剂吸入治疗,研究组采用布地奈德与支气管扩张剂吸入联合治疗,对2组疗效进行比较分析。结果采用布地奈德与支气管扩张剂吸入联合治疗的研究组治疗总有效率高达96.0%,明显高于对照组的80.00%,且治疗后研究组患者症状消失时间、住院时间均显著短于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用表面激素联合支气管扩张剂吸入对慢性阻塞性肺疾病进行联合治疗,临床疗效显著,有利于改善患者的症状,且不良反应少,安全可靠,可提高患者生活质量,值得临床借鉴。

日本血吸虫重组两歧双歧杆菌（pGEX-Sj32）疫苗构建及鉴定

目的 构建和鉴定日本血吸虫重组两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）pGEX-Sj32疫苗.方法 从重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所构建的重组大肠埃希菌BL21 （pET28α-Sj32）中抽提质粒pET28α-Sj32,通过PCR扩增Sj32抗原编码基因;将Sj32基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj32,将该重组质粒转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞（DE3）,抽提质粒后进行双酶切鉴定;采用电穿孔法,将重组质粒pGEX-Sj32转化至Bb,构建Bb（pGEX-Sj32）疫苗,再从该疫苗中抽提重组质粒pGEX-Sj32,以其为模板进行PCR鉴定.结果 从抽提质粒pET28α-Sj32中PCR扩增出长度约为1 270 bp的Sj32基因片段;重组质粒pGEX-Sj32经双酶切鉴定,获得长度为4 947 bp的载体片段和长度为1 270 bp的Sj32基因片段;以抽提的疫苗质粒pGEX-Sj32为模板进行PCR扩增,得到了长度约为1 270 bp的Sj32基因片段,与预期结果相符.结论 成功构建了日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj32）疫苗.

日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导小鼠脾细胞增殖、凋亡及亚群变化的研究

目的探讨日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾细胞增殖、凋亡及亚群的动态变化。方法将88只BALB/c小鼠随机分为2组,每组44只,分别经口服和滴鼻接种日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周每组剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,经SjAWA刺激培养(设原液和ConA刺激对照组)后采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测脾细胞增殖情况;经Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)双染色后采用流式细胞仪检测脾细胞凋亡率;采用流式细胞仪检测免疫小鼠脾CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群百分比。结果口服组和滴鼻组小鼠脾细胞增殖均于免疫后6周(口服组原液、SjAWA刺激及ConA刺激时分别为0.609±0.144、0.638±0.013及0.638±0.013;滴鼻组三者分别为:0.687±0.009、0.705±0.006及0.728±0.002)达高峰;口服免疫组小鼠脾细胞凋亡率无论有无刺激物作用,均在免疫后4周(原液和ConA刺激组峰值分别为0.092±0.005和0.126±0.002)达最高水平,而滴鼻免疫组在免疫后8周(原液和ConA刺激组峰值分别为0.086±0.005和0.109±0.008)达峰值;口服组CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群分别于免疫后6周(0.321±0.001)和8周(0.080±0.001)达峰值,滴鼻组CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群分别于免疫后8周(0.327±0.010)和12周(0.082±0.002)达峰值,口服组较滴鼻组峰值提前。结论日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞增殖、T细胞亚群升高和抑制脾细胞凋亡,产生有效的免疫应答。

日本血吸虫Sj14-3-3疫苗研究进展

日本血吸虫病是由日本血吸虫引起的一类严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,研制疫苗防治该病是目前的研究热点.Sj14-3-3蛋白是一种有效的疫苗分子,该文就Sj14-3-3蛋白疫苗和核酸疫苗的研究进展进行综述.

日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj14-3-3-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达

目的构建日本血吸虫重组质粒pGEX—Sjl4—3—3-Sj32，探讨重组质粒在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达。方法以重庆医科大学附属第-医院传染病寄生虫病研究所保存的质粒pGEX—sj14—3-3和pET28ct。Si32为模板，通过PCR扩增Sil4—3-3和Si32抗原编码基因，然后采用基因拼接法（geneSOEing）剪接Sil4-3-3和Sj32基因，得到Sjl4-3-3-Sj32融合基因。定向克隆人穿梭载体pGEX-1kT，构建重组质粒pGEX-Sjl4-33Sj32，并采用双酶切法进行验证。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21（DE3），经异丙基硫代-B-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达后，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（Westernblot）法对表达产物进行分析鉴定。结果基因拼接法得到约1750bp的Sjl4—3—3-Sj32融合基因；双酶切证实sj14-3-3-Sj32融合基因成功插入pGEX-1kT载体中；SDS—PAGE分析显示，表达产物为相对分子质量约为73×100的重组蛋白；Westernblot显示，重组蛋白可被日本血吸虫感染的兔血清识别。结论成功构建日本血吸虫重组质粒pGEX—sj14-33Sj32，该重组质粒在大肠埃希菌BL21（DE3）中得到了高效融合表达，且表达的融合蛋白具有特异的抗原性。