miR-95在子宫内膜癌组织的表达及临床意义

目的:探讨miR-95在子宫内膜癌患者组织的表达及其临床意义。方法:收集2007年9月至2009年12月子宫内膜癌患者手术标本66例,以癌旁组织标本作为正常对照,应用原位杂交(in situ hybridization,ISH)及实时荧光定量PCR(real time quantityPCR,qRT-PCR)检测子宫内膜癌患者组织及癌旁组织中miR-95的表达水平,分析miR-95表达与子宫内膜癌临床病理参数之间的关系,并分析miR-95表达与患者预后的关系。结果:ISH检测显示,66例子宫内膜癌组织中miR-95阳性表达率为75.76%,与癌旁对照组(25.76%)的差异有统计学意义(P<0.01);qRT-PCR结果显示,临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期子宫内膜癌组织miR-95表达水平为1.65±0.11、2.92±0.27、3.44±0.29、5.12±0.41,与癌旁组织的差异均有统计学意义(P<0.05),各期组间比较,差异亦有统计学意义(P<0.01);有、无盆腔淋巴结转移子宫内膜癌患者组织miR-95的表达水平分别为5.16±0.46、2.39±0.31,差异有统计学意义(P<0.01);高、中、低分化子宫内膜癌组织中miR-95表达水平为3.42±0.33、3.87±0.49、3.57±0.41,三者无统计学差异(P>0.05);Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌组织中miR-95表达水平分别为3.94±0.58、3.70±0.45,与癌旁组织的差异均有统计学意义(P<0.05),但二者差异无统计学意义(P>0.05);子宫内膜样腺癌和非子宫内膜样腺癌子宫内膜癌组织中miR-95表达水平分别为3.69±0.44,3.73±0.41,与癌旁组织的差异均有统计学意义(P<0.05),但二者差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,miR-95表达越高患者生存率越低(P=0.010)。结论:miR-95与子宫内膜癌的发生、临床分期及淋巴结转移等密切相关,将其作为子宫内膜癌潜在的治疗靶点及预后判断具有重大意义。

血清脂联素在子宫内膜癌患者中的表达及意义

目的探讨脂联素在子宫内膜癌患者血清中的表达及临床意义。方法运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测37例子宫内膜癌、16例子宫内膜增生过长患者血清及12例健康妇女血清脂联素的表达水平,分析脂联素与子宫内膜癌临床病理参数之间的关系。结果血清脂联素在子宫内膜癌、子宫内膜增生过长患者及健康妇女中表达分别为(5.83±2.28)、(11.20±2.48)、(15.34±3.05)mg/L,三者间差异有统计学意义(P<0.01);脂联素的表达随着子宫内膜癌临床分期演进而降低,临床Ⅲ/Ⅳ期患者血清脂联素表达水平[(4.44±1.30)mg/L]低于Ⅰ/Ⅱ期[(6.31±2.27)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05);高、中、低分化的子宫内膜癌患者血清脂联素表达水平分别为(7.98±2.18)、(5.49±1.48)、(3.74±0.65)mg/L,三者间差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移者血清脂联素的表达水平[(4.07±1.09)mg/L]低于无淋巴结转移者[(6.48±2.27)mg/L](P<0.05);脂联素的表达与子宫内膜癌的病理分型无关(P>0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,血清脂联素表达水平越低患者生存率越低(P=0.047)。结论血清脂联素可能是子宫内膜恶性转变以及子宫内膜癌发生、转移的重要生物学标志,是子宫内膜癌发病的危险因素。

miR-200c靶向调控DNMT1诱导卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性

目的研究miR-200c调控人类卵巢癌对紫杉醇敏感性的影响及其作用机制。方法培养卵巢癌SKOV3细胞,将SKOV3细胞分为miR-200c模拟物组、无关序列对照组及单药组,三组均分别采用0 ng/mL、25 ng/mL、100 ng/mL、400 ng/mL紫杉醇处理,miR-200c模拟物组转染miR-200c模拟物,无关序列对照组转染无关序列,单药组不转染任何序列,MTT法检测不同浓度紫杉醇及联合miR-200c对卵巢癌细胞增殖能力的影响;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度紫杉醇及联合miR-200c对卵巢癌细胞凋亡能力的影响;Western blot试验检测紫杉醇联合miR-200c模拟物对DNMT1蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,不同浓度紫杉醇处理后三组的卵巢癌细胞的增殖能力随紫杉醇浓度的增加而逐渐下降,miR-200c模拟物组SKOV3细胞的增殖能力与无关序列对照及单药组比较均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05),而无关序列对照与单药组比较差异无统计学意义(P>0.05);Annexin V-FITC/PI法结果显示,不同浓度紫杉醇处理后三组的SKOV3细胞的凋亡率随紫杉醇浓度的增加而逐渐增加,miR-200c模拟物组SKOV3细胞的凋亡率与无关序列对照及单药组比较均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),而无关序列对照与单药组比较差异无统计学意义(P>0.05);Western blot试验结果显示,miR-200c模拟物与紫杉醇共处理组SKOV3细胞中DNMT1的蛋白表达水平较单独转染miR-200c模拟物组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200c可通过调控靶蛋白DNMT1的表达促进卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性。

热球法联合药物治疗月经过多症

目的探讨子宫热球剥脱系统联合药物治疗月经过多症的方法及效果。方法利用热球仪加热使子宫内膜发生凝固、坏死、剥脱而达治疗月经过多及术后药物巩固疗效。结果78例患者有效率达97.5%。无月经26例(33.3%),点滴状月经13例(16.7%),少量月经25例(32.1%),正常月经12例(15.4%),无改善2例(2.5%)。结论热球法子宫剥脱联合药物治疗月经过多疗效好,安全性大,无并发症。

妊娠期肝内胆汁淤积症患者外周血miR-155的表达及其临床意义

【目的】探讨miR-155在妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）患者外周血中的表达及意义。【方法】采用qRT-PCR检测43例ICP患者（观察组）及20例同期正常妊娠妇女（对照组）外周血miR-155RNA表达，并比较分析血清miR-155水平与ICP患者的年龄、孕周、经产与否等的相关性。【结果】miR-155在观察组中表达显著高于对照组，血清miR-155水平与ICP患者的年龄、孕周、经产与否、胎数无关，与围产儿预后相关。【结论】血清miR-155在ICP患者中的表达较正常孕妇高，且在ICP诊断和围产儿预后预测中有重要作用。

米索前列醇联合肌注缩宫素预防产后出血的疗效观察

目的:探讨米索前列醇预防产后出血中的临床效果。方法:本院2009年1月-2010年6月将56例有产后出血危险的自然分娩产妇随机分为观察组36例和对照组20例。对照组在胎儿娩出后肌注缩宫素20U,观察组在对照组的基础上舌下含服米索前列醇片0.4mg,分别测定两组产后2h和24h出血量、血红蛋白、血压、心率变化等指标。结果:2h平均出血量(163.2±28.9)ml,24h平均出血量(301.8±22.1)ml,与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05);观察组血红蛋白下降(7.3±1.4)g/L,明显低于对照组(14.9±2.2)g/L,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01);观察组产妇第三产程时间为(7.3±1.4)min,与对照组(11.1±1.9)min比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组用药前后血压、心率均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:米索前列醇联合缩宫素能快速有效地促进产妇子宫收缩,减少产后出血,比单纯使用缩宫素疗效更佳,且给药简便、易掌握,值得临床推广。

脊髓空洞症合并全胃肠道动力障碍1例

患者男性，31岁。因四肢肌无力1年，进行性加重伴吞咽困难、大小便困难半年于2003年5月21日以胃肠道动力障碍查因收入我科。患者于2002年4月始出现四肢肌无力，全身肌肉进行性萎缩。近半年来出现吐词不清、吞咽困难、饮水返呛、腹胀明显，伴解大小便困难，大便2～3天1次，每次至少半小时，小便极度困难，次数明显减少。入院体查：心肺可，腹平软，无压痛及反跳痛。

三氯乙酸联合干扰素治疗女性尖锐湿疣87例临床观察

为探讨40%三氯乙酸联合干扰素治疗尖锐湿疣的临床疗效,选择我院妇产科门诊治疗的87例外阴尖锐湿疣患者,采用40%三氯乙酸局部涂擦联合干扰素治疗。结果87例患者用药后全部治愈,随诊半年,6例患者复发(占6.9%)。认为采用40%三氯乙酸联合干扰素治疗尖锐湿疣效果良好。

miR-155在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:MicroRNAs是一类19～25 bp内源非编码的小分子RNA,能通过靶向抑制基因的转录和翻译水平。本研究旨在探讨hsa-miR-155(Homo sapiens miR-155,miR-155)在子宫内膜癌患者组织中的表达及其临床意义。方法:收集2007年9月—2009年12月子宫内膜癌患者手术标本66例,癌旁组织标本作为正常对照,并取其表达水平为1,应用原位杂交(in situ hybridization,ISH)及实时荧光定量PCR(real timequantity PCR,qRT-PCR)检测子宫内膜癌患者组织及癌旁组织中miR-155的表达水平,miR-155表达与子宫内膜癌临床病理参数及临床分期之间的关系,并分析miR-155表达与患者预后关系。结果:ISH结果显示,在66例子宫内膜癌组织中miR-155阳性表达率为84.85%,与癌旁对照组18.18%相比,差异有统计学意义(χ2=58.72,P<0.01);qRT-PCR结果显示,临床Ⅰ/Ⅱ、Ⅲ/Ⅳ子宫内膜癌患者组织miR-155表达水平为(4.54±0.55)、(7.93±0.88)倍,差异有统计学意义(t=13.51,P<0.01);有、无盆腔淋巴结转移子宫内膜癌患者组织miR-155的表达水平分别为(9.56±0.86)、(5.49±0.47)倍,差异有统计学意义(t=15.12,P<0.01);高、中、低分化子宫内膜癌组织中miR-155表达水平分别为(6.42±0.63)、(6.97±0.59)、(6.27±0.46)倍,差异均无统计学意义(t=0.412,P>0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,miR-155表达越高患者生存率越低(P=0.001)。结论:miR-155与子宫内膜癌的发生、进展及淋巴结转移等密切相关,对子宫内膜癌潜在的治疗靶点及预后判断具有重大意义。

多形性胶质瘤母细胞瘤患者血清中miR-155、miR-365和BDNF的表达及意义

目的探讨多形性胶质瘤母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)患者血清中miR-155、miR-365和脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor,BDNF)的表达及其相关性。方法运用荧光素报告载体系统检测miR-155和miR-365直接调控的靶基因BDNF。并收集54例GBM患者和12例Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤患者的术前外周血标本,以20例健康志愿者的外周血标本作为对照,应用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验技术分别检测GBM和Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤患者血清中miR-155、miR-365和BDNF的表达水平,分析miR-155、miR-365与BDNF的相关性。结果 BDNF是miR-155和miR-365直接调控的靶基因,miR-155或miR-365均可下调BDNF蛋白的表达;GBM患者血清中miR-155与miR-365的表达水平分别为6.59±1.22、6.96±1.43,两者分别与健康志愿者(1.19±0.24、1.07±0.16)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤患者血清中miR-155与miR-365的表达水平分别为1.35±0.41、1.29±0.39,两者分别与健康志愿者比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。GBM患者血清中的BDNF表达水平为(5.52±1.23)ng/mL,与健康志愿者[(12.55±2.11)ng/mL]比较,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤患者BDNF表达水平为(11.83±3.43)ng/mL,与健康志愿者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析发现,miR-155与miR-365的表达呈正相关(rs=0.875,P<0.01),miR-155、miR-365的表达均与BDNF呈负相关(rs=-0.819,rs=-0.774,P<0.01)。结论 miR-155、miR-365和BDNF三者表达与GBM的发生发展密切相关,其有可能成为判断GBM疗效及预后的潜在生物学指标。

转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶表达变化

目的观察转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达变化。方法培养人胃腺癌MGC-803细胞,将其分为观察组1、对照组1、观察组2、对照组2,观察组1转染miR-185类似物,对照组1转染无关序列,观察组2转染PKM2小RNA干扰,对照组2转染RNA干扰无关序列,48 h后收集观察组1和对照组1细胞,用Western blotting法检测PKM2蛋白,用实时荧光定量PCR法检测PKM2 mRNA;将四组细胞继续培养24、48、72、96 h,采用MTT法测量各组在570 nm波长处的OD值。结果细胞培养48、72、96h时,OD值观察组1较对照组1低(P均<0.05),观察组2较对照组2低(P均<0.05)。观察组1、对照组1人胃腺癌MGC-803细胞PKM2蛋白相对表达量分别为0.522±0.065、0.937±0.111,PKM2 mRNA相对表达量分别为0.584±0.037、1.046±0.058,两组比较,P<0.05或<0.01。结论转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力下降、PKM2表达降低,miR-185的这一作用是通过下调PKM2实现的。

阴式与腹腔镜子宫全切除术58例临床观察

目的:研究分析阴式与腹腔镜子宫全切除术的临床治疗效果。方法:选取笔者所在医院于2009年3月-2011年3月收治的58例需行子宫全切术的患者,在尊重患者意愿以及自身特点的情况下,分为治疗组和对照组,治疗组36例行腹腔镜手术,对照组22例行阴式手术,对比分析两组治疗效果。结果:对照组手术时间少于治疗组,术中出血量方面治疗组较少;治疗组术后镇痛用药率、术后肛门排气时间以及住院时间均优于对照组;治疗组并发症发生率为11.1%,对照组发生率为9.0%。结论:阴式与腹腔镜子宫全切除术各有利弊,应根据患者实际情况具体实施。

miR-185与PKM2在胃癌中的表达及临床意义

目的 研究miR-185与PKM2在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用原位杂交和免疫组化技术检测胃癌组织与癌旁正常胃粘膜组织中miR-185与PKM2的表达情况,分析miR-185与PKM2之间的相关性以及与胃癌患者临床病理参数的关系。结果 原位杂交检测显示,在126例胃癌组织中miR-185阳性表达率为38.10%,与正常对照组56.38%比较,差异有统计学意义（χ^2=14.36,P=0.000）。免疫组化结果显示,在126例胃癌组织中PKM2阳性表达率为63.49%,与正常对照组43.59%比较,差异有统计学意义（χ^2=7.74,P=0.006）。相关性分析显示,在胃癌组织中miR-185的表达与PKM2的表达呈负相关（r=0.09,P=0.006）;Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者miR-185的高表达率明显低于Ⅰ-Ⅱ期胃癌患者（P=0.001）,且有淋巴结转移者miR-185的高表达率也明显低于无淋巴转移者（P=0.003）;而PKM2在Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者的高表达率明显高于Ⅰ-Ⅱ期胃癌患者（P=0.002）,且在有淋巴结转移者PKM2的高表达率也明显高于无淋巴转移者（P=0.006）,但是miR-185与PKM2在胃癌患者中的表达与患者的年龄、性别、组织分化程度以及T分期无明显相关性。结论 miR-185在胃癌组织中低表达,PKM2在胃癌组织中高表达可能是肿瘤细胞发生浸润转移的重要生物学标志。

外生型宫颈浸润癌介入治疗的探讨

目的探讨超选择性子宫动脉化疗栓塞治疗53例外生型宫颈浸润癌的意义。方法常规采用Seld ing's技术,经皮股动脉穿刺插管,髂内动脉造影及子宫动脉化疗栓塞治疗。结果超选择子宫动脉化疗栓塞治疗后突起子宫颈局部肿瘤大部分或全部坏死脱落。结论采用超选择性子宫动脉化疗栓塞是治疗中晚期宫颈癌的一种安全有效的方法。

miR-200c对人胃癌细胞增殖能力的影响及其机制探讨

目的观察miR-200c对人胃癌细胞增殖能力的影响,并探讨其是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶(DNMT3B)表达发挥作用。方法采用MTT法检测miR-200c对人胃癌MGC-803细胞生长增殖能力的影响;构建DNMT3B 3'UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告载体系统观察miR-200c对DNMT3B 3'UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-200c mimics转染胃癌细胞MGC-803,采用Western blot检测DNMT3B表达水平。结果 MTT结果显示,在转染miR-200c mimics 24、48、72 h后,细胞增殖活性OD值分别为0.31±0.01、0.47±0.01、0.53±0.02,与对照组的0.44±0.03、0.62±0.01、0.87±0.01比较,P均<0.05;荧光素报告载体系统证实,DNMT3B是miR-200c直接调控的靶基因。Western blot结果显示,miR-200c可抑制DNMT3B蛋白的表达。结论 miR-200c通过靶向调控DNMT3B的表达而抑制胃癌细胞生长增殖能力。

米非司酮与戊酸雌二醇治疗放置曼月乐后阴道不规则出血的疗效研究

目的比较米非司酮与戊酸雌二醇治疗放置曼月乐后阴道不规则出血的临床效果。方法选取作者医院收治的81例因放置曼月乐后不规则出血超过3个月的患者,采用随机数字表法将患者分为治疗组(n=40)和对照组(n=41),治疗组患者口服米非司酮100 mg,4周一次,共3次;对照组患者口服戊酸雌二醇片1 mg/d,连续3周,停药7天,重复3次。比较两组患者出血模式、出血/点滴出血天数、月经失血图(pictorial blood loss assessment chart,PBAC)评分以及满意度。结果治疗后第4周,治疗组的出血总天数与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);随着时间推移,治疗组长时间出血、频繁出血以及不规则出血的比例均低于对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。从第8周开始,治疗组的PBAC评分低于对照组,满意度较高。两组患者治疗前后的内膜厚度、不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论与口服戊酸雌二醇相比,米非司酮治疗放置曼月乐后的阴道不规则出血效果更佳,能缩短出血/点滴出血天数,减少不规则出血以及频繁出血的发生率,且服用方便,安全性良好。

miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法用Target scan human在线软件预测miR-185调控的靶基因;采用荧光素酶报告载体系统检测miR-185对M2型丙酮酸激酶(PKM2)3'UTR荧光酶活性的影响;蛋白质印迹法检测miR-185对PKM2蛋白表达的影响。将肝癌HepG2细胞分为观察1组、对照1组、观察2组、对照2组、观察3组。观察1组转染miR-185 mimics,对照1组转染Scramble;观察2组转染PKM2-siRNA,对照2组转染Control-siRNA;观察3组转染miR-185 inhibitors与PKM2-siRNA。采用MTT法检测上述5组细胞增殖能力,采用Annexin V-FITC和PI染色法检测上述5组细胞凋亡率。结果在线预测软件发现miR-185与PKM2的3'UTR有共同的结合位点,荧光素酶报告载体系统显示在Hep G2细胞中miR-185能抑制Wild-PKM2报告质粒组荧光素酶的活性,Western blotting结果显示miR-185能下调Hep G2细胞中PKM2蛋白表达,证实PKM2是miR-185直接调控的靶基因;MTT结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞OD值分别为0.446±0.034、0.472±0.028,与对照1组(0.649±0.041)和对照2组(0.610±0.023)相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。观察3组的OD值为0.606±0.016,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义;凋亡实验结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞凋亡率分别为(29.13±2.04)%、(27.46±1.95)%,对照1组、对照2组分别为(8.76±0.53)%、(8.51±0.47)%,观察1组、观察2组与对照1组、对照2组比较,P均<0.05。观察3组的凋亡率为(9.47±0.61)%,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义。结论 miR-185可抑制人肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡;机制可能是通过下调PKM2表达实现。

初中音乐教学以人为本教学理念应用探究

随着我国科学教育教学理念的不断提出、素质教育的不断推进,教学改革进程在我国不断加速,改革逐渐深入教学方方面面。以人为本新型科学化教学理念逐渐成为教育教学的核心出发点,也是教师开展教学工作的核心依据。在此背景下,初中音乐教学作为艺术培养性教学,也显示出新的发展需要。本文从实际出发,立足于初中音乐,以学生艺术素质能力发展与学习规律为依托,以素质化教育教学开展特点为核心,多角度探究初中音乐教学中以人为本教学理念的高效运用措施。

子宫内膜癌染色体不稳定性研究

目的探讨子宫内膜癌染色体不稳定性。方法取21例子宫内膜癌患者外周血淋巴细胞体外常规培养、制片、GTG显带分析染色体畸变(CAR),Brdu法分化染色分析姊妹染色单体交换(SCE)、微核(MN)、核仁组织形成区(NOR)。结果内膜癌组(21例)染色体结构畸变以出现次数的多少排列为:1、3、2、5、7、8号,染色体数目、结构畸变率分别为12.86%6、.1%,SCE频率、MN率、Ag-NOR分别为7.4±1.5次/细胞(、6.6±1.9)‰、7.1±1.6个/细胞,对照组(10例)染色体数目、结构畸变率分别为3.4%、0.4%,SCE频率、MN率、Ag-NOR分别为4.8±0.6次/细胞(、2.0±0.9)‰、4.9±1.1个/细胞,内膜癌组均明显高于对照组(P<0.01)。结论子宫内膜癌病人外周血淋巴细胞染色体数目和结构畸变率增高。