毛壳菌产抗真菌活性物质菌株的筛选与鉴定

对实验室分离保存的40株毛壳菌菌株代谢产物进行抗真菌活性筛选,5个菌株代谢产物对植物病原真菌具有选择性抑制效果。其中,菌株CH08、CH23发酵液对芒果炭疽菌、苹果炭疽菌、小麦根腐菌有较强的抑制作用;菌株CH16、CH17发酵液对芒果炭疽菌、苹果炭疽病具有较强的抑制作用;菌株CH21发酵液对西瓜枯萎菌、辣椒炭疽菌有较强的抑制作用。经形态学鉴定,CH08、CH16、CH17、CH23为球毛壳菌,CH21为角毛壳菌。

以抗生素抗性为选择标记的毛壳菌种间原生质体融合

以抗生素抗性为选择标记进行角毛壳菌和球毛壳菌种间原生质体融合。角毛壳菌CH21－I－402菌株对潮霉素有抗性、对G418敏感，球毛壳菌CH08对潮霉素和G418敏感。根癌农杆菌介导的新霉素磷酸转移酶基因转化球毛壳菌，得到成功转化新霉素磷酸转移酶基因的球毛壳菌菌株，转化子对G418抗性提高3～4倍，对潮霉素仍然比较敏感。以耐潮霉素、不耐G418的角毛壳菌和不耐潮霉素、耐G418的球毛壳菌为出发菌株，以PEG6000为助融剂进行原生质体融合，用G418和潮霉素抗性进行筛选，获得再生菌株。经AFLP分析表明：再生菌株PF1、PF26为融合菌株，融合菌株菌落形态均与亲本存在明显差异。

抗菌素430产生菌发酵条件研究

从云南元阳土壤中分离得到链霉菌菌株TJ430,其代谢产生的蒽环类抗生素具有广谱抗真菌、细菌活性。通过研究该菌株摇瓶发酵条件,明确其摇瓶发酵培养基配方为:葡萄糖1.8%、蛋白胨0.5%、豆粕0.3%、酵母膏0.1%、碳酸钙0.025%;最优发酵条件为:250 mL摇瓶装液量25 mL,接种量9.0%,培养温度28°C,初始pH 8.5,转速200 rpm,培养时间96 h。

中国毛壳菌科分类研究(Ⅱ)毛壳菌属一新记录种

从植物残体上和土壤中分离到一种毛壳菌 ,经鉴定为四角毛壳 (Chaetomiumquadrangulatum )。该菌主要鉴别特征为 :子囊果椭圆形或坛状 ;果壁细胞褐色 ,具棱角 ,花瓣状排列 ;顶生附属丝螺旋状卷 ;子囊棍棒状 ,具柄 ;子囊孢子四角形。该种为我国新记录种。

捷安肽素对采后柑桔青绿霉菌的抑制效果及作用机理

将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZK菌株发酵产物捷安肽素用于柑桔采后的生物防治,研究了不同浓度、不同接入时间的捷安肽素对柑桔青霉菌(Penicillium italium)和绿霉菌(P.digitaum)的抑制效果,并与常用化学杀菌剂抑霉唑、咪鲜胺、甲基硫菌灵和多菌灵作比较.PDA平板上,柑桔绿霉菌比青霉菌对捷安肽素敏感.在柑桔果实上,53.86μg/mL捷安肽素处理下,柑桔青霉病和绿霉病的发病率分别为5%和5.28%,比对照低95%和94.72%.柑桔青霉病和绿霉病的病情指数分别为1.87和2.18,比对照低73.73和97.82.捷安肽素作用于柑桔绿霉菌1h内,菌丝体内K+含量迅速下降,为对照绿霉菌K+含量的37.53%,1h后菌丝体内K+含量变化趋于平缓.捷安肽素作用于柑桔绿霉菌12h内蛋白质、核酸缓慢泄漏,12h后蛋白质、核酸含量变化趋于平缓.实验结果表明:捷安肽素可以迅速改变绿霉菌细胞膜通透性.

中国毛壳菌科研究Ⅰ. ——毛壳菌属的种(英文)

报道了毛壳菌属的十一个种,旋丝毛壳 Chaetomium bostrychodes,反卷毛壳 C. convolutum,舟形毛壳 C. cymbiforme,高大毛壳 C. elatum,粪生毛壳 C. funicola,球孢毛壳 C. globosporum,球毛壳 C. globosum,细丽毛壳 C. gracile,六孢毛壳 C. hexagonosporum,印度毛壳 C. indicum和近缘毛壳C. subaffine。其中包括四个中国新记录种:舟形毛壳 C. cymbiforme,球孢毛壳 C. globosporum,六孢毛壳 C. hexagonosporum和近缘毛壳 C. subaffine。根据我国的标本和菌种对新记录种作了描述,并附了显微照片。标本与菌种保存在西北农林科技大学真菌标本室 (HMUABO)。

GFP标记的多粘芽孢杆菌1114在番茄根际的定殖

多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa菌株1114对多种植物病原菌具有良好的防治效果。为研究其在作物根际土壤中的迁移和定殖规律,通过电击转化引入绿色荧光标记质粒pB-SVG101,得到稳定表达的荧光标记菌株,转化后的菌株对青枯菌Ralstonia solanacearum仍保持良好的抑制效果。通过多种接种方法,发现该菌株能通过浸根的方式侵入番茄的维管组织和周围细胞。

胎牛血清乙酰胆碱酯酶的酶学性质研究

为研究胎牛血清中乙酰胆碱酯酶(AChE)的酶学特性,分别采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100和DEAE-纤维素DE23柱层析方法,从胎牛血清中分离纯化出乙酰胆碱酯酶。结果表明,以碘化硫代乙酰胆碱(ATCl)为底物时,酶促反应的最适温度为37℃,最适pH值为8.0,米氏常数K_m为7.48 mmol/L,最大反应速度V_(max)为0.098mol/min。研究表明,Mg^(2+)、Ca^(2+)、Zn^(2+)、Fe^(2+)等金属离子对胆碱酯酶具有不同程度的激活作用,而Cd^(2+)、Pb^(2+)、Cu^(2+)对胆碱酯酶活性具有不同程度的抑制作用;分离出的乙酰胆碱酯酶对乐果和敌敌畏的敏感性最强。

40％噻嗪酮悬浮剂在水稻和土壤中的残留动态研究

为制定40%噻嗪酮悬浮剂在水稻上的安全使用标准,采用田间试验的方法研究噻嗪酮在水稻、土壤、水中的残留与降解动态,应用气相色谱法进行定性和定量分析。结果表明,噻嗪酮在水稻茎杆、土壤和水中消解较快,其半衰期分别为3.5～3.7 d、4.7～5.5 d和5.2～6.6 d。施药量为282.0 g(ai)/hm^2,距末次施药14 d后,噻嗪酮在水稻糙米中未检出,上壤中的最高残留量为0.032 mg/kg,低于我国制定的稻米中噻嗪酮最大残留限量O.3 mg/kg,说明噻嗪酮属于低残留、易降解农药。

中国毛壳菌科研究III.毛壳菌属和梭孢壳属的种(英文)

报道了毛壳菌属和梭孢壳属5个新记录种,同丝毛壳Chaetomiumhomopilatum,刺毛壳C.spinosum,变绿毛壳C.virescens,小孢梭孢壳Thielaviamicrospora,栖土梭孢壳T.terricola。根据所采集的标本和菌种对这些种进行了描述和照像。干制培养物标本和菌种保藏在西北农林科技大学真菌标本室(HMUABO)。

土壤放线菌的选择性分离及其代谢产物抗菌活性评价

从土壤中选择性分离放线菌,并进行抗菌活性评价,以期筛选到具有潜在应用开发价值的菌株。以改良的HV培养基为分离培养基,添加萘啶酮酸、制霉菌素作为抑制剂,对从安徽、重庆、河北、湖北、江苏、吉林、山东、四川、天津、云南及德国莱比锡等地采集的45份土壤样品中的放线菌进行了选择性分离。以植物病原菌黑曲霉、棉花枯萎病菌、稻瘟病菌、辣椒疫霉、茄青枯病菌为指示菌,通过平板琼脂块初筛,并结合摇瓶复筛和盆栽防效进行评价。共选择性分离到570株放线菌;初筛显示,212个菌株代谢产物显示了抗真菌或抗细菌活性,占总菌株数量的37.2%,33个菌株代谢产物兼具抗真菌活性和抗细菌活性,占菌株数量的5.8%;摇瓶复筛显示,其中2株放线菌TJ231、TJ430发酵液对黑曲霉、棉花枯萎病菌、稻瘟病菌、辣椒疫霉、茄青枯病菌显示了强烈的抑制效果;1株放线菌TJ561发酵液对黑曲霉、棉花枯萎菌、稻瘟菌、辣椒疫霉显示了强烈的抑制效果;盆栽试验表明,放线菌TJ231、TJ430、TJ561发酵液对辣椒疫霉病的保护效果分别为56.2%、87.2%、61.4%。

野外繁育蝉花菌株的筛选及分子标记分析

【目的】拟通过蝉花野外繁育菌株的子实体培养筛选和分子标记分析,建立蝉花野外繁育菌株鉴别体系,获得可用于生产的优质菌株。【方法】以蝉花A17-7-1菌株野外繁育获得的7个蝉花菌株进行子实体培养筛选,并用A17-7-1菌株特异的SCAR分子标记对菌株进行分析。经SCAR标记确认的繁育菌株再以ISSR分子标记分析判定繁育菌株遗传性状。【结果】经子实体培养筛选,2个菌株子实体产量高于A17-7-1;SCAR分子标记分析显示,从这2个子实体产量提高的菌株基因组NDA中扩增出A17-7-1菌株特有的DNA片段;ISSR分子标记分析表明,一株子实体产量明显提高的菌株与A17-7-1具有完全相同的条带,另一个子实体产量提高不显著的菌株有2个条带缺失。【结论】野外繁育蝉花可提高子实体产量,SCAR标记可快速鉴别菌株是否为繁育菌株,ISSR标记能够初步判断菌株遗传特性。

乌岩岭自然保护区的虫草研究

该文对乌岩岭自然保护区的7种虫草类真菌(蝉花、细脚棒束孢、鲜红虫草、发丝线虫草、长座线虫草、小蝉草、蜂头线虫草)进行调查,并对几种虫草及其无性型进行讨论,为乌岩岭自然保护区虫草的进一步开发利用提供依据。

人工培养的蝉花子实体对小鼠免疫功能影响的研究

目的:研究人工培养的蝉花子实体对小鼠免疫功能的影响。方法:实验设低、中、高3个剂量组,分别为0.083 g/kg、0.167 g/kg、0.5 g/kg,相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍和30倍,取蒸馏水作为阴性对照组,进行碳廓清实验,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验以及NK细胞活性鉴定实验。结果:与对照组相比,中、高剂量组均能提高小鼠的吞噬指数(P 【0.05);蝉花虫草子实体中剂量组和高剂量组NK细胞活性提高,差异均有显著性差异(P 【0.05)。结论:蝉花子实体能增强巨噬细胞的吞噬能力和NK细胞的杀伤活性。

赤子爱胜蚓对几种不同原料制得饵料的利用研究

文章通过室内模拟试验研究了利用畜禽粪便与蝉花菌质、作物秸秆制得蚯蚓养殖饵料饲喂蚯蚓对蚯蚓生存环境下土壤养分含量的影响。结果表明,pH均显著降低,土壤呈偏酸性;全磷、有效磷含量均显著增加;除对照组以外,有机质、全氮、硝态氮含量显著增加;对照组的铵态氮含量显著增加;全钾含量在试验前后无明显变化。综合分析各处理间的处理效果,可得出:h3 】h1 】h2 】h4,即鸡粪与蝉花菌质、作物秸秆堆置发酵制得的蚯蚓养殖饵料,在经蚯蚓利用后,对土壤养分含量提高效果最为明显。

与蝉花有关的虫草菌生物多样性的研究Ⅱ:重要药用真菌蝉花有性型的发现及命名

我国重要药用真菌蝉花的分类地位和学名在国内外长期混乱,因其有性型未被发现,长期以来误作为根据巴西标本命名的Isaria (Paecilomyces) cicadae。作者最近在井冈山发现了其有性型,研究了标本及分离物的形态特征及多位点系统发育特征,并与GenBank中相关种类的序列进行了对比,证明I.cicadae是物种复合群,确定蝉花是虫草科虫草属中的新种,使用传统药用真菌蝉花的古老名称将其命名为Cordycepschanhua。蝉花子座淡橙色到淡桔黄色,子囊壳半埋生,475–602×222–319μm,子囊孢子246–360×1.5–1.8μm,分孢子圆筒形,6.4–13.8×2.1–3.1μm。孢梗束淡黄色至淡黄褐色,分生孢子长椭圆形或圆筒形,3.5–10.5×1.5–4.5μm。

与蝉花有关的虫草菌生物多样性的研究Ⅰ:文献考证

蝉花是我国重要药用真菌,但长期以来其名称特别是学名的使用一直混乱。本文从古代医药典籍记载确认,"蝉花"是历史最久、使用最广的中名,对于其他中名具有优先权。其学名Isariacicadae系Miquel(1838)根据巴西标本命名,但模式标本已失,原描述文字及插图均极其简单,与蝉花形态差异较大。其有性型迄今未发现,曾先后被认为是小蝉草Ophiocordyceps sobolifera和大蝉草Tolypocladium dujiaolongae(=Cordyceps cicadae Shing)。本文根据文献考证澄清了国内外关于小蝉草和大蝉草的误用,分析了长期以来大量日本文献中的命名混乱对我国认知蝉花的影响,并质疑Ⅰ.cicadae在中国及其他地区的分布,提出它是一复合种,因此蝉花的分类地位及学名需要进一步研究。