开放实验室培养学生创新思维与能力的探索——以中南大学基础医学实验室为例

高等医科院校实验教学在本科生培养过程中具有十分重要的地位,而实验室开放对于提高实验教学质量、增强学生动手能力、创新思维能力起着不可替代的作用。根据教育部近年颁布的一系列实验教学改革措施要求,中南大学在基础医学实验室开放方面进行了一系列探索与创新。

病理生理学混合式教学课程思政的设计与实践

如何在混合式教学中与思想政治理论课同向同行,形成协同效应的课程思政,是当前高等教育改革的热点课题。中南大学病理生理学系教学团队在进行混合式教学改革中设立了以社会主义核心价值观为中心的思政教学目标,即社会主义核心价值观和责任感、医学生职业胜任力、辩证唯物主义世界观、批判性思维和创新意识。线上慕课通过案例,线下教学把思政融入专业讨论问题,建立起一种思政教学的新模式并取得了较好的教学效果。

运用多种教学手段,改进病理生理学实验教学质量

病理生理学实验课教学的授课目的应包括除培养动手能力外,还应包含科研基本素质的培养和科研理念的灌输。根据不同授课对象要采取因材施教的方法安排教学方法与教学内容。教学内容应体现学科前沿知识、结合临床实际,突出它作为桥梁学科的特点,为后继的临床学习打下坚实的基础。

运用酵母双杂交系统筛选肌营养不良相关蛋白2(DRP2)相互作用蛋白(英文)

目的应用酵母双杂交系统筛选小鼠、大鼠、人类大脑文库中与DRP2相互作用的蛋白,分析中枢神经系统中DRP2分子复合体的组成成分。方法设计3个含有DRP2不同蛋白结构域的诱饵质粒,在完成诱饵质粒的自激活性的鉴定后,对小鼠、大鼠、人类脑MATCHMAKER cDNA文库进行筛选。结果运用DRP2蛋白N-Bait筛选大鼠脑MATCHMAKER cDNA文库,笔者获得了一个阳性文库质粒。该质粒的插入子编码一种SNAP25相互作用的蛋白质Scoilin。Scoilin又被命名为Zwint-1蛋白。同时笔者还确定了这两种相互作用蛋白质的精确结构域:DRP2蛋白以其含有两个Spectrin重复和一个WW蛋白结构域的氨基端与Scoilin(Zwint-1)全蛋白相互作用。结论应用酵母双杂交,笔者于大鼠大脑中找到了DRP2的相互作用的蛋白质Scoilin(Zwint-1),并且确定了这两种相互作用蛋白质的精确结构域。

研究生课程“人类疾病动物模型的研究进展”的设立与实践

本文通过无记名问卷调查,分析在中南大学湘雅医学院2016、2017级共470名医学博士研究生中开设的"人类疾病动物模型的研究进展"课程的教学满意度和教学效果。共发放无记名问卷470份,回收有效问卷449份,统计后获得如下评价结果:①大部分学生认为该课程很有实用性,很满意课程的教学方式,认为课程内容设置很好且授课信息量适中,对国内外研究现状的把握度很好;②大部分学生认为课程的很大程度完善了自身知识结构,培养了自身研究兴趣,提高了自身科研、创新能力。"人类疾病动物模型的研究进展"课程通过设立教学目标,选择合适的教学内容与授课方式,已达到教学目的,在医学研究生教学中值得推广和应用。

非小细胞肺癌患者区域淋巴结LUNX基因表达及其临床意义

目的:探讨人类肺组织特异性X蛋白(lung-specific X protein,LUNX)的基因诊断在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)微转移中的临床意义。方法:随机收集43例临床非小细胞肺癌患者作为实验组,同时随机收集15例良性肺部病变患者作为对照组。通过反转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测人类LUNX的靶基因的mRNA在实验组和对照组患者淋巴结中的表达,并与患者相对应的临床病理资料进行相关性分析。结果:LUNX mRNA在两组患者的肺组织及肿块中均为阳性表达;实验组43例患者的87枚淋巴结中有33枚(37.93%)有LUNX mRNA表达,对照组15例肺部良性病变患者的26枚淋巴结中有2枚(7.69%)表达LUNX mRNA,两组比较差异有统计学意义(P(0.05)。LUNX mRNA淋巴结表达阳性与肺癌患者病理类型、细胞分化程度、临床分期有密切关系(r=0.660,0.500,0.460;P=0.011,0.017,0.021);而与患者性别、年龄、吸烟史,以及血清肺癌4项肿瘤标志物(CEA,CA125,NSE和CYFRA211)无明显关系(r=0.230,0.235,0.180,0.354;P=0.739,0.714,0.773,0.125)。结论:与传统的病理切片检查判断NSCLC淋巴结微转移相比,RT-PCR检测肺癌患者淋巴结LUNX mRNA的表达有较高的敏感性。LUNX mRNA的表达是检测肺癌微转移的一个有价值的指标,可为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。

巢式甲基化特异性PCR检测肺癌病人WIF-1基因启动子区异常甲基化

为了检测肺癌患者血浆中WIF-1基因启动子区的甲基化状态,收集肺癌患者及健康对照者的血浆标本,采用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测WIF-1基因启动子区甲基化状态,并与普通甲基化特异性PCR(MSP)法进行了比较,结果在58例肺癌患者血浆样品中经nMSP法发现20例WIF-1基因启动子的过甲基化,用MSP法只检出10例,有吸烟史组WIF-1基因的甲基化率高于无吸烟史组(P<0.05).而20例正常对照血浆中都未检测到WIF-1基因启动子的过甲基化;表明利用巢式MSP(nMSP)法检测外周血血浆中WIF-1基因启动子的甲基化,可为非损伤性筛选和早期诊断肺癌提供有价值的信息.

关于生物信息学的研究

本文较全面地介绍了生物信息学产生的背景、研究目的与研究展望。

浅谈在线教育（e—learning）与医学教育

本文就在线教育的核心组成部分，证实其有效性的部分研究成果，现行国际上所拥有的医学在线教育资源，其评估系统以及医学教育工作者该怎样将在线教育融入到先行医学教育模式中作一简介。

核仁素对糖尿病性心肌病小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨核仁素对糖尿病性小鼠心肌病心肌细胞凋亡的影响。方法:小鼠给予高脂高糖饲料喂养,第5,6周分别予链脲佐菌素60 mg/kg腹腔注射,构建2型糖尿病模型;实验分为4组:野生型小鼠对照组、核仁素转基因小鼠对照组、野生型小鼠糖尿病组、核仁素转基因小鼠糖尿病组;第8周末检测糖尿病相关指标;第20周末,采用HE染色观察心肌形态学改变;TUNEL染色和caspase-3活性检测心肌细胞凋亡程度。结果:糖尿病组小鼠空腹血糖值较野生型对照组明显升高;与野生型对照组相比,野生型糖尿病组小鼠心肌HE染色显示细胞排列紊乱,部分肌纤维出现断裂及溶解,TUNEL染色和caspase-3活性检测显示心肌细胞凋亡明显增加。与野生型糖尿病组小鼠相比,转基因糖尿病组小鼠心肌形态学改变明显减轻,心肌细胞凋亡明显减少。结论:核仁素过表达可抑制糖尿病性心肌病中心肌细胞凋亡的发生。

热休克蛋白70通过Bcl-2抑制氧化应激所致C2C12细胞凋亡

目的探讨C2C12肌原细胞内热休克蛋白70对Bcl-2表达的影响及Bcl-2对热休克蛋白70抗细胞凋亡作用的影响。方法应用Western Blotting观察Bcl-2在转染热休克蛋白70真核表达质粒(pcDNA3.1-HSP70)或其反义寡核苷酸C2C12肌原细胞中的表达;采用基因瞬间转染技术使热休克蛋白70过表达的C2C12肌原细胞内Bcl-2表达抑制,应用流式细胞术检测H2O2处理所致细胞凋亡的发生情况。结果转染热休克蛋白70真核表达质粒的C2C12肌原细胞中,热休克蛋白70和Bcl-2的表达明显高于空载体转染组(P<0.01);而转染热休克蛋白70反义寡核苷酸后,热休克蛋白70和Bcl-2的表达明显低于随机寡核苷酸转染组(P<0.01);热休克蛋白70过表达的C2C12肌原细胞分别转染Bcl-2反义寡核苷酸及随机寡核苷酸,0.5 mmol/L H2O2处理24 h,Bcl-2反义寡核苷酸转染组的细胞凋亡率明显高于随机寡核苷酸转染细胞组。结论热休克蛋白70能上调C2C12肌原细胞内Bcl-2的表达;热休克蛋白70的抗细胞凋亡功能可能与其上调Bcl-2表达相关。

人抗肌萎缩蛋白Dp71 shRNA载体构建与检测

目的:构建有效针对人Dystrophin Dp71基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并验证其干扰效果。方法:设计合成3对针对人Dystrophin Dp71基因的和1对无同源性的siRNA片段,在两端和中间加上酶切位点和Loop环。将合成的DNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人Dp71基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cells,GES-1)和人支气管上皮细胞(human bronchial epithelium,HBE),Western印迹检测Dp71 shRNA真核表达载体的干扰效率。结果:酶切和测序验证均表明各Dp71-shRNA载体构建成功。将空载体及各Dp71 shRNA载体分别转染GES-1和HBEC,和空白细胞对照及shRNA空白载体组相比,3组Dp71-shRNA能够明显抑制Dp71蛋白表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以Dp71 shRNA2对Dp71表达的干扰效率最强。结论:成功构建了3个有效针对人Dystrophin Dp71基因的shRNA干扰载体,3组质粒都能有效地抑制Dp71在GES-1和HBEC中的表达,其中以Dp71-shRNA2的抑制效率最高。

人FoxA1 shRNA载体构建与检测

目的构建有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,并验证其干扰效果。方法设计合成3对针对人FoxA1基因的和1对无同源性的shRNA片段,将合成的shRNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人FoxA1基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901),Realtime RT-PCR和Western-blotting检测干扰载体的干扰效率。结果①酶切和测序验证均表明各shRNA载体构建成功。将空载体及各干扰载体分别转染人正常胃黏膜细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901)发现,和空白对照组相比,3组干扰载体能够从mRNA和蛋白表达水平明显抑制FoxA1的表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以3号质粒对Foxa1的干扰效率最强。结论成功构建了三个有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,三组质粒都能有效地抑制FoxA1在GES-1细胞和SGC-7901细胞中的表达。

建设“病理生理学”开放式精品示范课堂的探索与实践

为提升中南大学本科教学质量及人才培养质量,中南大学自2013年实施了以学生为中心的"开放式精品示范课堂计划"。我系在病理生理学教学中积极推进开放式精品示范课堂的建设,进行了探索和实践。结果显示:60%的学生认为这种教学模式提高了他们的自学能力和表达能力;50%以上的学生认为业余时间的缺乏和专业网络资源的贫乏导致自主学习的积极性和效率不高;80%的学生不赞成由学生进行小讲课。以上的探索与实践为建立一种以学生为主体,具备科学的教学设计、精选的教学内容、灵活的教学手段和考核方式,并且具有可推广性以及能被学生和教师广泛接受的创新教学模式打下了基础。

“能量代谢与内环境器官系统”课程思政建设的实践与体会

课程思政建设是高校落实立德树人的根本举措。“能量代谢与内环境器官系统”是中南大学临床医学八年制器官系统模块教学的一个重要组成部分,如何在该系统教学过程中深化课程思政建设,是目前亟待解决的问题。为了解决这个问题,本研究围绕国家发展需求制订相应的素质目标和能力目标,将价值引领与专业教学相融合;充分凝练隐性思政教育元素,与显性专业教学内容进行整合;并将TBL+PBL、双师课堂等新型教学方式与传统课堂教学方式深度融合,将课程思政教育贯穿整个教学实施过程,从而实现全程育人、全方位育人。这种整合教学模式深入贯彻了“以学生发展为中心”的教学理念和“价值塑造、知识传授、能力培养、智慧启迪”的人才培养思想,力求培养出具有良好政治思想素质和社会责任感,学科基础扎实,具有创新精神和创新能力的医学人才。

肠外营养、肠内营养及益生菌对重症急性胰腺炎患者肠道细菌变化和细胞因子的影响

目的探讨肠外营养(PN)、肠内营养(EN)及益生菌对重症急性胰腺炎患者肠道细菌变化和细胞因子的影响。方法收集赣南医学院附属萍乡医院2017年1月至2019年12月重症急性胰腺炎患者203例,随机分为三组:肠外营养(PN)组、肠内营养(EN)组、肠内营养+益生菌(EN+益生菌)组。并评估三组APACHEⅡ得分、脓毒血症、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、死亡率、大便菌群的变化、血浆内毒素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10的水平。结果EN组、EN+益生菌组与PN组比较,APACHEⅡ评分、MODS的发生率、死亡率、粪便致病菌数、血清内毒素、TNF-α和IL-6浓度显著降低(P<0.05);粪便有益菌和血清IL-10显著升高(P<0.05)。EN+益生菌组与EN组比较,APACHEⅡ评分、MODS的发生率、粪便致病菌、血清内毒素、TNF-α和IL-6浓度显著降低(P<0.05);粪便有益菌和血清IL-10显著升高(P<0.05);两组死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论EN可通过改善肠道屏障功能在SAP的治疗中发挥有效作用,益生菌可与EN起协同作用,提高治疗效果。

器官系统整合课程中课程思政的教学设计与实施——以“循环系统”为例

本团队遵循“循环系统”课程的特点,按照课程设置泰勒模型的要求,有机结合《中国本科医学教育标准》和社会主义核心价值观,深入提炼“循环系统”课程中所蕴含的职业素养、道德等德育元素,以具体案例为教学载体,在教学的各个环节中融入课程思政,旨在为器官系统整合课程及其他医学课程教学提供参考。

血管活性肠肽对脓毒性休克大鼠肝损伤的保护作用

采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制备脓毒性休克大鼠模型,探讨血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)对脓毒性休克大鼠肝损伤的保护作用及其可能机制.将48只雄性SD大鼠随机分成4组:假手术组(SO,n=12)、CLP组(n=12)、VIP组(n=12)和生理盐水组(NS,n=12).VIP组大鼠在行CLP术后即刻给予6 nmol VIP,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清谷丙转氨酶ALT和谷草转氨酶AST水平,同时检测血清炎症因子:促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),抑炎因子白介素-10(IL-10)的变化;取大鼠肝脏组织行病理检查.在6 h以后的各时间点,与NS组比较,VIP组TNF-α水平明显降低,IL-10水平持续升高,VIP组AST和ALT水平自12 h始明显降低,肝脏病理损伤明显改善.实验表明,VIP通过抑制促炎因子的生成并促进抗炎因子的产生在大鼠脓毒性休克肝损伤中发挥保护作用.

奥曲肽对高/低风险患者ERCP术后生活质量的影响及其胰腺炎的预防

目的探讨奥曲肽对高/低风险患者内镜逆行性胰胆管造影术(Endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)术后生活质量的影响及其胰腺炎(post-ERCP pancreatitis,PEP)的预防作用。方法回顾分析我院2011年1月~2019年3月行ERCP治疗的患者1184例,根据发生PEP的风险性,将患者分为PEP高风险和低风险组,两组再根据是否使用奥曲肽的基础上再分为奥曲肽亚组和空白对照亚组。分析四组ERCP术后住院成本、ERCP后住院天数、高淀粉酶血症、PEP、术后6 h、12 h和24 h视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)、肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6),IL-8浓度、并发症和副反应的发生率。结果高风险组中,与空白对照组比较,奥曲肽组住院成本、住院时间,奥曲肽组高淀粉酶血发生率、PEP发生率显著性减少,术后6 h、12 h、24 h各时间点VAS疼痛评分显著性降低,术后6 h、12 h、24 h时间点TNF-α、IL-6和IL-8的浓度显著性降低,同组内VAS、6 h、12 h、24 h TNF-α、IL-6和IL-8的浓度比较,均依次显著性降低,并发症的发生率显著性降低,副反应发生率显著性升高。在低风险组中,与空白对照组比较,奥曲肽组住院成本、住院时间、高淀粉酶血发生率、PEP发生率差异无统计学意义,术后6 h、12 h、24 h VAS疼痛评分显著性降低,术后6 h、12 h、24 h时间点TNF-α、IL-6和IL-8的浓度显著性降低,同组内VAS、6 h、12 h、24 h TNF-α、IL-6和IL-8的浓度比较,均依次显著性降低,两组均无并发症发生,副反应发生率显著升高。结论对于PEP高风险患者,奥曲肽可有效减少PEP的发生率,并改善患者术后生活质量;对于PEP低风险组患者,奥曲肽不能减少PEP的发生率,但可改善患者术后生活质量。